實(shí)驗(yàn)用離心機(jī)分為制備性離心機(jī)和分析性離心機(jī),制備性離心機(jī)主要用于分離各種生物材料,每次分離的樣品容量比較大,分析性離心機(jī)一般都帶有光學(xué)系統(tǒng),主要用于研究純的生物大分子和顆粒的理化性質(zhì),依據(jù)待測(cè)物質(zhì)在離心場(chǎng)中的行為(用離心機(jī)中的光學(xué)系統(tǒng)連續(xù)監(jiān)測(cè)),能推斷物質(zhì)的純度、形狀和分子量等。分析性離心機(jī)都是超速離心機(jī)。
1.制備性離心機(jī)可分為三類(lèi):
⑴普通離心機(jī):大轉(zhuǎn)速6000rpm左右,大相對(duì)離心力近6000×g,容量為幾十毫升至幾升,分離形式是固液沉降分離,轉(zhuǎn)子有角式和外擺式,其轉(zhuǎn)速不能?chē)?yán)格控制,通常不帶冷凍系統(tǒng),于室溫下操作,用于收集易沉降的大顆粒物質(zhì),如紅血球、酵母細(xì)胞等。這種離心機(jī)多用交流整流子電動(dòng)機(jī)驅(qū)動(dòng),電機(jī)的碳刷易磨損,轉(zhuǎn)速是用電壓調(diào)壓器調(diào)節(jié),起動(dòng)電流大,速度升降不均勻,一般轉(zhuǎn)頭是置于一個(gè)硬質(zhì)鋼軸上,因此地平衡離心管及內(nèi)容物就極為重要,否則會(huì)損壞離心機(jī)。
⑵高速冷凍離心機(jī):大轉(zhuǎn)速為20000~25000rpm(r/min),大相對(duì)離心力為89000×g,大容量可達(dá)3升,分離形式也是固液沉降分離,轉(zhuǎn)頭配有各種角式轉(zhuǎn)頭、蕩平式轉(zhuǎn)頭、區(qū)帶轉(zhuǎn)頭、垂直轉(zhuǎn)頭和大容量連續(xù)流動(dòng)式轉(zhuǎn)頭、一般都有制冷系統(tǒng),以消除高速旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭與空氣之間摩擦而產(chǎn)生的熱量,離心室的溫度可以調(diào)節(jié)和維持在0~40C,轉(zhuǎn)速、溫度和時(shí)間都可以嚴(yán)格準(zhǔn)確地控制,并有指針或數(shù)字顯示,通常用于微生物菌體、細(xì)胞碎片、大細(xì)胞器、硫銨沉淀和免疫沉淀物等的分離純化工作,但不能有效地沉降病毒、小細(xì)胞器(如核蛋白體)或單個(gè)分子。
⑶超速離心機(jī):轉(zhuǎn)速可達(dá)50000~80000rpm,相對(duì)離心力大可達(dá)510000×g,的生產(chǎn)廠商有美國(guó)的貝克曼公司和日本的日立公司等,離心容量由幾十毫升至2升,分離的形式是差速沉降分離和密度梯度區(qū)帶分離,離心管平衡允許的誤差要小于0.1克。超速離心機(jī)的出現(xiàn),使生物科學(xué)的研究領(lǐng)域有了新的擴(kuò)展,它能使過(guò)去僅僅在電子顯微鏡觀察到的亞細(xì)胞器得到分級(jí)分離,還可以分離病毒、核酸、蛋白質(zhì)和多糖等。
超速離心機(jī)主要由驅(qū)動(dòng)和速度控制、溫度控制、真空系統(tǒng)和轉(zhuǎn)頭四部分組成。超速離心機(jī)的驅(qū)動(dòng)裝置是由水冷或風(fēng)冷電動(dòng)機(jī)通過(guò)精密齒輪箱或皮帶變速,或直接用變頻感應(yīng)電機(jī)驅(qū)動(dòng),并由微機(jī)進(jìn)行控制,由于驅(qū)動(dòng)軸的直徑較細(xì),因而在旋轉(zhuǎn)時(shí)此細(xì)軸可有的彈性彎曲,以適應(yīng)轉(zhuǎn)頭輕度的不平衡,而不致于引起震動(dòng)或轉(zhuǎn)軸損傷,除速度控制系統(tǒng)外,還有一個(gè)過(guò)速保護(hù)系統(tǒng),以防止轉(zhuǎn)速超過(guò)轉(zhuǎn)頭大規(guī)定轉(zhuǎn)速而引起轉(zhuǎn)頭的撕裂或,為此,離心腔用能承受此種的裝甲鋼板密閉。
溫度控制是由安裝在轉(zhuǎn)頭下面的紅外線射量感受器直接并連續(xù)監(jiān)測(cè)離心腔的溫度,以保證更準(zhǔn)確更靈敏的溫度調(diào)控,這種紅外線溫控比高速離心機(jī)的熱電偶控制裝置更敏感,更準(zhǔn)確。
超速離心機(jī)裝有真空系統(tǒng),這是它與高速離心機(jī)的主要區(qū)別。離心機(jī)的速度在2000rpm以下時(shí),空氣與旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭之間的磨擦只產(chǎn)生少量的熱,速度超過(guò)20000rpm時(shí),由磨擦產(chǎn)生的熱量顯著增大,當(dāng)速度在40000rpm以上時(shí),由磨擦產(chǎn)生的熱量就成為嚴(yán)重問(wèn)題,為此,將離心腔密封,并由機(jī)械泵和擴(kuò)散泵串聯(lián)工作的真空泵系統(tǒng)抽成真空,溫度的變化容易控制,磨擦力很小,這樣才能達(dá)到所需的超高轉(zhuǎn)速。
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