基質(zhì)：植物油

樣品提取：

稱取2 g（準確至±20 mg）食用油樣品于250mL帶蓋錐形瓶中，加入0.1mL（30-120ppm）9種混標，加入20 mL皂化液{氫氧化鉀乙醇水溶液：16.8 g氫氧化鉀溶于100 mL（乙醇：水=1：1）}，于70℃加熱2 h，期間進行多次震蕩，皂化直至油滴消失；取出后轉(zhuǎn)移液體至分液漏斗，加入40 mL正己烷，室溫下震搖5min，分層后去除下層水相，再加入50mL水，多次水洗至丟失的水相為中性，棄去水相，向分液漏斗加入適量的無水硫酸鈉，將有機相轉(zhuǎn)移至旋蒸瓶中，室溫氮吹濃縮至1mL左右，待SPE凈化。

SPE小柱操作：

SPE：CNWBOND 0.3%定制硝酸銀硅膠 SPE 玻璃小柱（貨號：SBEQ-CA13AA-glass）；

活化：15mL二氯甲烷

平衡：15mL正己烷

上樣：1mL提取液

第一步洗脫（MOSH部分洗脫）：正己烷 6.5mL

第二步洗脫（MOAH部分洗脫）：二氯甲烷：正己烷（1：1）溶液 10mL

兩步洗脫液分別收集，洗脫液在常溫下氮吹濃縮至1.0 mL，上機檢測。

加標樣品：

稱取樣品后，加入 0.05mL石蠟油使用溶液（2000 μg/mL），加入 0.05mL多環(huán)芳烴使用溶液（20 μg/mL），后續(xù)操作同上。

備注：

9種混標溶液主要用作為定量內(nèi)標、前處理方法考察和儀器性能考察；石蠟油和多環(huán)芳烴主要作為制備質(zhì)控樣加標使用；正構(gòu)烷烴混標主要用作時間窗口確認。

前處理注意事項：

① 皂化操作完成后注意觀察樣品瓶中是否有油滴，需保障樣品皂化完全；

② 注意控制氮吹溫度和流速；

③ SPE小柱的洗脫條件可以根據(jù)具體樣品的洗脫曲線進行調(diào)整，以保障礦物油的分離和回收；

④ 建議使用GC級正己烷（CBEQ-4-108708-4000）和二氯甲烷（CBEQ-4-103002-4000）溶劑；

⑤ 盡量避免塑料耗材使用，建議使用玻璃耗材，如玻璃巴斯德吸管。

3.1 氣相色譜條件

氣相色譜GC-FID

色譜柱：CD-5HT（30m*0.25mm*0.1um）（貨號：GAEQ-621511）

流速：2.0mL/min

進樣口：280℃，不分流進樣，進樣量：2μL

程序升溫：50℃保持5min，以20℃/min升至350℃保持15min

FID檢測器溫度：350℃

3.2 標準溶液譜圖

4.1 小柱洗脫曲線

9種混標中膽甾烷是飽和烴MOSH洗脫結(jié)束的標志，1,3,5-三叔丁基苯是芳香烴MOAH洗脫開始的標志，苝是芳香烴MOAH洗脫結(jié)束的標志。圖4和圖5分別是礦物油兩步洗脫的洗脫趨勢圖，分析確認，建議礦物油分離MOSH部分需要6.5 mL正己烷洗脫，分離MOAH部分需要10 mL二氯甲烷：正己烷（1：1）溶液。

圖4  0.3%硝酸銀硅膠小柱MOSH部分洗脫趨勢圖

圖5  0.3%硝酸銀硅膠小柱MOAH部分洗脫趨勢圖

4.2 小柱加標回收率數(shù)據(jù)

9種混標在0.3%硝酸銀硅膠小柱上的回收率數(shù)據(jù)見表2，十一烷、十三烷、雙環(huán)己烷和膽甾烷在第一步洗脫回收，回收率在100%—120%之間；戊基苯、1-甲基萘、2-甲基萘、1,3,5－三叔丁基苯和苝在第二步洗脫回收，回收率在80%—110%左右。

表2 小柱加標9種內(nèi)標的回收率數(shù)據(jù)

石蠟油和多環(huán)芳烴的加標回收率數(shù)據(jù)見表3，使用雙環(huán)己烷為定量內(nèi)標，計算十一烷和石蠟油的含量，回收率在85%—100%之間；使用2-甲基萘為定量內(nèi)標，計算戊基苯和多環(huán)芳烴的含量，回收率在95%—125%之間。

表3 小柱加標石蠟油和多環(huán)芳烴的回收率數(shù)據(jù)

4.3 小柱加標樣品譜圖

圖6 小柱加標樣品－第一步洗脫

圖7 小柱加標樣品－第二步洗脫

4.4 植物油加標回收率數(shù)據(jù)

5種植物油中石蠟油和多環(huán)芳烴的加標回收率數(shù)據(jù)見表4和表5，5種植物油基質(zhì)均有MOSH檢出，檢出量在10-70 mg/kg之間，使用雙環(huán)己烷為定量內(nèi)標，石蠟油的回收率在95%—135%之間；使用2-甲基萘為定量內(nèi)標，多環(huán)芳烴的回收率在85%—110%之間。

表4 植物油中石蠟油的加標回收率數(shù)據(jù)

表5 植物油中多環(huán)芳烴的加標回收率數(shù)據(jù)

4.5 植物油樣品譜圖

使用CNWBOND 0.3% 硝酸銀硅膠小柱（SBEQ-CA13AA-glass），可以實現(xiàn)植物油基質(zhì)中飽和烴礦物油和芳香烴礦物油的分離，內(nèi)標法計算回收率在85%—135%之間，該方法普適性較高，可滿足食用油中礦物油的檢測。針對不同植物油中的雜峰干擾，建議可根據(jù)“EN 16995:2017”，選擇氧化鋁硅膠小柱（SBEQ-CA13AO-glass）去除飽和烴部分的長鏈正構(gòu)烷烴干擾，選擇環(huán)氧化試劑（間氯過氧化苯甲酸）進行環(huán)氧化反應(yīng)去除芳香烴部分的烯烴、角鯊烯、甾烯、胡蘿卜素等物質(zhì)干擾。