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瑞沃德“拍了拍”你,把這款GX實(shí)驗(yàn)神器分享給你!

來(lái)源:深圳市瑞沃德生命科技股份有限公司 更新時(shí)間:2020-07-07 14:57:39 閱讀量:1334

手動(dòng)計(jì)數(shù)太麻煩?

這款神器用起來(lái)!

四大分析一安排,

細(xì)胞狀況全明白!

細(xì)胞房必備計(jì)數(shù)神器,

瑞沃德C100自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀!


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01-細(xì)胞計(jì)數(shù)分析


C100適用于直徑在4-60μm的細(xì)胞或微粒的計(jì)數(shù),如絕大部分細(xì)胞系、干細(xì)胞、原代細(xì)胞等。


通過(guò)參數(shù)設(shè)置中的圈門(mén)選項(xiàng),可以對(duì)細(xì)胞的圓度、亮度、直徑進(jìn)行圈選劃分,從而排除非目標(biāo)細(xì)胞干擾。


算法可有效識(shí)別聚團(tuán)細(xì)胞,提高計(jì)數(shù)準(zhǔn)確度。


非臺(tái)盼藍(lán)模式下,對(duì)于已知細(xì)胞狀態(tài)或不需要測(cè)定細(xì)胞活率的樣本,用戶(hù)可直接略過(guò)染色步驟,進(jìn)行總細(xì)胞濃度的分析。


02-細(xì)胞活力分析


臺(tái)盼藍(lán)模式下,用戶(hù)可使用隨機(jī)附配的0.4%的臺(tái)盼藍(lán)染料,對(duì)死細(xì)胞進(jìn)行染色,從而進(jìn)行活死細(xì)胞的區(qū)分,進(jìn)行細(xì)胞活力(通常是以細(xì)胞活率進(jìn)行表征)的檢測(cè)。此時(shí),活細(xì)胞會(huì)被綠圈標(biāo)記,死細(xì)胞會(huì)被紅圈標(biāo)記。


Tips


1:臺(tái)盼藍(lán)染色原理是什么?


一般活細(xì)胞,細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)完整且具有選擇通透的活性。因而可易排斥臺(tái)盼藍(lán)染料,使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi)。而死細(xì)胞的細(xì)胞膜可能是不完整的或者細(xì)胞膜的通透性會(huì)增加,因而臺(tái)盼藍(lán)可進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)。通過(guò)這種染色法,可以有效區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。


2:什么時(shí)候需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力分析?


> 監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖狀態(tài)(繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn))

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)是測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)數(shù)的常用方法,也是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo),是培養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。

一般細(xì)胞傳代之后,經(jīng)過(guò)短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過(guò)長(zhǎng)短不同的潛伏期,即進(jìn)入大量分裂的指數(shù)生長(zhǎng)期。在細(xì)胞達(dá)到飽和密度后,停止生長(zhǎng),進(jìn)入平頂期,然后退化衰亡。為了準(zhǔn)確描述整個(gè)過(guò)程中細(xì)胞數(shù)目的動(dòng)態(tài)變化,典型的生長(zhǎng)曲線(xiàn)可分為生長(zhǎng)緩慢的潛伏期,斜率較大的指數(shù)生長(zhǎng)期,呈平臺(tái)狀的平穩(wěn)期和衰退期四個(gè)部分。以存活細(xì)胞數(shù)(10'000/mL)對(duì)培養(yǎng)時(shí)間(h或d)作圖,即得生長(zhǎng)曲線(xiàn)。


> 細(xì)胞傳代

確定細(xì)胞傳代后合適的生長(zhǎng)密度。


> 細(xì)胞凍存、復(fù)蘇過(guò)程

細(xì)胞凍存、復(fù)蘇過(guò)程中測(cè)定細(xì)胞活力。凍存復(fù)蘇的過(guò)程中,細(xì)胞損傷是不可避免的,細(xì)胞濃度活率計(jì)數(shù)在凍存和復(fù)蘇的各個(gè)環(huán)節(jié)至關(guān)重要。例如,如果凍存前的細(xì)胞濃度或活率過(guò)低,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞復(fù)蘇后生長(zhǎng)緩慢或者無(wú)法生長(zhǎng)。


> 細(xì)胞染色時(shí)數(shù)目確定

細(xì)胞進(jìn)行抗體染色時(shí)需要根據(jù)細(xì)胞的數(shù)目確定抗體的用量。


> 使用流式細(xì)胞儀前細(xì)胞濃度確定

流式細(xì)胞儀上樣前需要確認(rèn)樣品的細(xì)胞濃度,過(guò)濃容易堵塞機(jī)器。


03-細(xì)胞大小分析


C100自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在完成計(jì)數(shù)的同時(shí),會(huì)自動(dòng)生成一個(gè)細(xì)胞直徑分布直方圖和計(jì)算細(xì)胞的平均直徑。


在細(xì)胞研究中,細(xì)胞大小的改變是一個(gè)關(guān)鍵特征,通常在細(xì)胞轉(zhuǎn)染、藥物測(cè)試和細(xì)胞活化分析中被測(cè)定。


04-細(xì)胞熒光分析


1)檢測(cè)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率(GFP、RFP)

對(duì)細(xì)胞進(jìn)行目的基因轉(zhuǎn)染時(shí),需要對(duì)轉(zhuǎn)染效率進(jìn)行評(píng)估。一般情況下,轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒上有編碼熒光蛋白的序列作為報(bào)告基因,因而轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞就應(yīng)該是該熒光蛋白表達(dá)陽(yáng)性的。一般情況下,使用熒光顯微鏡或者流式細(xì)胞儀是實(shí)驗(yàn)室常用的轉(zhuǎn)染效率分析的方法,但二者皆具有操作復(fù)雜、成本高的弊端。


利用C100的熒光分析功能,配備對(duì)應(yīng)的熒光模塊后,可實(shí)現(xiàn)對(duì)GFP、RFP等熒光蛋白表達(dá)情況的分析,并對(duì)其進(jìn)行自動(dòng)計(jì)數(shù),從而快速、簡(jiǎn)單、GX地得到目的基因表達(dá)的陽(yáng)性率。


2)細(xì)胞活力鑒定(AO/PI雙熒光染色法)

區(qū)分細(xì)胞死活的方法,除了主流的臺(tái)盼藍(lán)染色,AO/PI雙熒光染色計(jì)數(shù)法這種更jingque的染色鑒定方法在一些領(lǐng)域如細(xì)胞ZL等高要求行業(yè)也趨于流行。


以上就是細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的四大分析介紹,想get細(xì)胞、分子實(shí)驗(yàn)解決方案更多詳情,歡迎留言或來(lái)電咨詢(xún)0755-86111286-8008


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