熒光偶極子的取向分布和擺動角度對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和狀態(tài)具有重要影響,但由于寬場顯微鏡的光學(xué)切片能力差,偏振調(diào)制信號容易受到相鄰熒光團(tuán)的干擾。
本文提出了一種利用偏振結(jié)構(gòu)照明實現(xiàn)光學(xué)切片的偏振調(diào)制成像方法,并結(jié)合雙色比率成像測量極性脂質(zhì)。結(jié)果顯示,該方法顯著提升了偶極子取向和擺動測量的精度。與傳統(tǒng)的共聚焦偏振成像相比,這種方法的成像速度提高了一個數(shù)量級,能夠捕捉到活細(xì)胞亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的快速動態(tài)變化。
圖1 OS-PM跟蹤活細(xì)胞中脂質(zhì)膜的快速動態(tài)變化。(a) 用尼羅紅標(biāo)記的不同亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的成像結(jié)果,速度為30 f.p.s。寬場(左)、寬場偏振調(diào)制(中)和光學(xué)切片偏振調(diào)制(右)。(b) (a) 中的放大圖像和延時圖像,比例尺:2μm。
雙色光學(xué)切片偏振調(diào)制(OS-PM)技術(shù)能夠快速、準(zhǔn)確地對極性和非極性脂質(zhì)膜的脂質(zhì)順序進(jìn)行成像,這對于研究脂質(zhì)流動性至關(guān)重要。鑫圖Dhyana 400BSI相機(jī)采用背照式sCMOS芯片技術(shù),具有高靈敏、高速和高動態(tài)成像優(yōu)勢,不僅可以快速檢測微弱的熒光信號,減少光毒性和光漂白,還能快速捕捉活細(xì)胞動態(tài)變化過程,提高測量精度和成像效率。
參考文獻(xiàn)
Zhanghao K, Liu W, Li M, et al. Fast, Accurate Polarization and Polarity Imaging with Polarized Structured Illumination[J]. bioRxiv, 2019: 640268.
該文章旨在為大家提供先進(jìn)成像技術(shù)相關(guān)應(yīng)用參考,部分內(nèi)容摘抄于相關(guān)論文研究成果,版權(quán)歸原作者所有,引用請標(biāo)注出處。
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