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柴瑞平 冉良驥
01
貫穿產(chǎn)學(xué)研的有力紐帶——液相色譜技術(shù)支撐
產(chǎn)學(xué)研協(xié)同創(chuàng)新、技術(shù)轉(zhuǎn)移是實(shí)現(xiàn)科研成果從高校走進(jìn)企業(yè)、從實(shí)驗(yàn)室走向生產(chǎn)線、從理論探索走上實(shí)際應(yīng)用的最佳模式之一。以中藥新藥研發(fā)為例,中藥經(jīng)典名方復(fù)方制劑新藥研發(fā)前期研發(fā)周期長(zhǎng),內(nèi)容包含本草考證、資源評(píng)估、炮制加工、質(zhì)量研究、中試工藝等,其中基于液相色譜法建立的指紋圖譜、多成分含量測(cè)定項(xiàng)被認(rèn)為是質(zhì)量評(píng)價(jià)關(guān)鍵指標(biāo),同時(shí)需要重點(diǎn)考察飲片-物質(zhì)基準(zhǔn)-制劑中目標(biāo)成分的量值傳遞關(guān)系,進(jìn)而指導(dǎo)生產(chǎn)工藝的調(diào)整和優(yōu)化。國(guó)內(nèi)多所高校與中醫(yī)藥科研機(jī)構(gòu)積極與藥企合作,采用賽默飛Vanquish UHPLC及Ultimate 3000完成了多個(gè)中藥經(jīng)典名方品種(如:化肝煎[1]、厚樸溫中湯[2]、黃連湯[3]等)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)前期研究,并發(fā)表論文數(shù)十篇,為該類新藥研發(fā)與生產(chǎn)提供了完善、科學(xué)的技術(shù)支撐,不斷推進(jìn)中藥現(xiàn)代化的創(chuàng)新之路。
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02
定量無(wú)紫外吸收目標(biāo)物——CAD檢測(cè)器方法開(kāi)發(fā)
電霧式檢測(cè)器(Charged Aerosol Detector,CAD)在無(wú)紫外吸收成分定量應(yīng)用顯示極大優(yōu)勢(shì),有效解決了無(wú)發(fā)色團(tuán)的成分檢測(cè)難題,明顯改善了UV低波段的漂移與低靈敏度問(wèn)題,且成功規(guī)避了RI/ELSD檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)的限制,因此,在各個(gè)行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)化研究中成為了一個(gè)備受關(guān)注的液相色譜檢測(cè)器,具體可見(jiàn)下方圖片。科研學(xué)界采用CAD進(jìn)行創(chuàng)新研究時(shí),常見(jiàn)科研思路有:
① CAD定量原理與響應(yīng)一致性基礎(chǔ)研究[4,5];
② CAD與其他檢測(cè)器檢測(cè)方法對(duì)比研究[6];
③ 現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升研究[7];
④ 藥學(xué)研究與新藥開(kāi)發(fā)(中藥活性成分[8]/化藥有關(guān)物質(zhì)[9]/生物藥新型遞送系統(tǒng)[10]等);
⑤ 復(fù)雜體系研究等等[11]。
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02
專注復(fù)雜體系研究——在線二維液相色譜合理運(yùn)用
賽默飛雙三元液相色譜是賽默飛液相家族中的明星產(chǎn)品,一個(gè)機(jī)箱內(nèi)部同時(shí)含有2個(gè)三元梯度泵,在開(kāi)展二維液相色譜分析時(shí)可為科研人員帶來(lái)極大便利,目前可支持的工作流程包括:在線固相萃取液相色譜(Online SPE-HPLC)、中心切割二維液相色譜(Heart cutting 2D-LC)、Simple Switch?多功能二維液相色譜等等。
上述工作流可為植物、藥物、食品、生物大分子等復(fù)雜體系分離分析時(shí)解決以下問(wèn)題:
① 目標(biāo)成分含量低,需要富集后再分析;
② 手動(dòng)前處理操作繁瑣,期望簡(jiǎn)化操作,降低前處理耗材費(fèi)用;
③ 共流出峰在一維難分離,需要收集后再分離;
④ 色譜流動(dòng)相與質(zhì)譜不兼容,但又迫切需要開(kāi)展鑒定工作等。
近年來(lái),科研工作者基于賽默飛2DLC發(fā)表多篇應(yīng)用型論文,如:中心切割法用于特殊醫(yī)學(xué)用途奶粉中的?;撬岫糠治?sup style="box-sizing: border-box;">[12];OnlineSPE-HPLC-FLD用于快速檢測(cè)牛奶中5種氟喹諾酮抗生素殘留[13];多中心切割法用于中藥人參皂苷定量分析[14]等。隨著研究的拓展,CAD、HRMS等新穎檢測(cè)器與2DLC聯(lián)用也逐漸成為科研新熱點(diǎn)[15]。
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04
讓深入研究變得更容易——分析純化液相不可少
生命科學(xué)領(lǐng)域近年來(lái)不斷實(shí)現(xiàn)突破,新的治療模式包括雙特異性抗體/蛋白、抗體偶聯(lián)藥物、細(xì)胞和基因療法推動(dòng)了生物制品行業(yè)的崛起,科研人員仍在挖掘活性更強(qiáng)、靶向更準(zhǔn)的生物大分子,并搭建新型的藥物遞送載體。為了獲得更穩(wěn)定的治療效果,生物大分子的質(zhì)量評(píng)價(jià)面臨系列挑戰(zhàn),一方面,處于新藥開(kāi)發(fā)前沿的實(shí)驗(yàn)室,通常面臨樣品基質(zhì)復(fù)雜,目標(biāo)雜質(zhì)或活性化合物豐度低,流動(dòng)相質(zhì)譜不兼容等突出問(wèn)題,需要將目標(biāo)物進(jìn)行高效分離與精準(zhǔn)純化;另一方面,科研人員希望為化合物表征或下游工作流程提供的高效純化,兼具智能化、自動(dòng)化,簡(jiǎn)化后續(xù)結(jié)構(gòu)解析和表征的復(fù)雜性,即在不同的分析技術(shù)手段間實(shí)現(xiàn)有效連接,如電鏡檢測(cè)前的樣本制備等。賽默飛餾分收集器作為核心模塊,將高分離度的 UHPLC 分離和快速準(zhǔn)確的樣品純化相結(jié)合,助力科研客戶搭建一整套功能強(qiáng)大、靈活易用的平臺(tái)。
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05
有效改善分離與保留——不同機(jī)理色譜柱的創(chuàng)新使用
色譜柱是液相分離的核心部件,其填料創(chuàng)新發(fā)展極為迅速,賽默飛現(xiàn)擁有多種類型液相色譜柱類型可供科研客戶選擇,有:耐用性強(qiáng)通用性好的反相色譜柱(C18/苯基柱等)、特殊應(yīng)用專用柱(Hypersil Green PAH 、Accliam Surfactant Plus 等)、新型生物色譜柱(ProPac 、MabPac 、DNAPac RP/IEX/SEC等)及特色混合模式色譜柱(Acclaim Mix mode、Trinity P1/P2/Q1)等,可支持科學(xué)研究中各類檢測(cè)項(xiàng)目。
隨著科研深入,賽默飛可提供在線工具(制備式 HPLC 色譜柱方法變換工具,掃碼查看)將您的分析柱方法直接放大成制備柱方法,并支持定制制備式HPLC色譜柱,滿足科學(xué)研究中從發(fā)現(xiàn)到制備的全分析流程。
賽默飛可提供科學(xué)研究中使用的各類色譜質(zhì)譜儀器、耗材及軟件,其中液相色譜產(chǎn)品也是各個(gè)學(xué)科的必備神器:不僅擁有豐富的色譜檢測(cè)器類型(UV/FLD/RI/CAD等),可輕松實(shí)現(xiàn)多檢測(cè)器串聯(lián)(UV-CAD/UV-FLD等),一針進(jìn)樣,即可完成多角度表征樣品信息;還支持不同分析技術(shù)聯(lián)合使用,如①UHPLC-HRMS聯(lián)用;②全自動(dòng)在線LC-GC聯(lián)用;③在線LC-ICPMS聯(lián)用等,將創(chuàng)新再推向新高度,化合物信息全面表征不再困難。
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參考文獻(xiàn):
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