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抗體純化伴侶的選擇-配基篇

來源：翌圣生物科技(上海)股份有限公司 更新時(shí)間：2024-12-25 14:32:55 閱讀量：98
在細(xì)菌表面可分泌表達(dá)特殊功能蛋白與免疫球蛋白特異結(jié)合，主要分為Protein A金黃色葡萄球菌蛋白 A（Staphylococcal proteinA, SPA）、Protein G鏈球菌G群的細(xì)胞表面蛋白 G（Streptococcal protein G, SPG）和Protein L大消化鏈球菌蛋白 L（Peptostreptococcus protein L, PPL），均為典型的免疫球蛋白結(jié)合蛋白。可結(jié)合大多數(shù)哺乳動(dòng)物的免疫球蛋白，其結(jié)合方式和結(jié)合譜有所差異，三種蛋白可以優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，靈活應(yīng)用。
 
新產(chǎn)品借助天然蛋白結(jié)構(gòu)域分析，特異設(shè)計(jì)與之對(duì)應(yīng)的重組蛋白產(chǎn)品，具有高純度，低內(nèi)毒素以及無外源引入IgG等特點(diǎn)，使之在免疫學(xué)相關(guān)研究與生產(chǎn)中發(fā)揮巨大作用。
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圖1. Yeasen 的Protein系列重組蛋白
 
作為應(yīng)用較為廣泛的親和配基使用，研究工作者分別解析其區(qū)域結(jié)合域，具體如下：
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圖2. SPA蛋白結(jié)構(gòu)示意圖
 
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圖3. SPG蛋白結(jié)構(gòu)示意圖
 
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圖4. PPL蛋白結(jié)構(gòu)示意圖
 
重組蛋白Protein A由大腸桿菌表達(dá)體系獲得，功能與SPA 基本相同，由5個(gè) IgG 結(jié)合結(jié)構(gòu)域 E-D-A-B-C 串聯(lián)排列組成，對(duì) IgG 的 Fc 片段具有很強(qiáng)的特異性親和力。重組蛋白Protein A 作為親和配基被偶聯(lián)到基質(zhì)上，可以特異性的和樣品中的抗體分子結(jié)合，而使其他雜蛋白流穿，具有極高的選擇性。
 
重組蛋白Protein G從大腸桿菌表達(dá)體系中獲得，含有SPG 的 3 個(gè) IgG 結(jié)合區(qū)。為確保 IgG 的最大特異性結(jié)合，重組蛋白Protein G 中細(xì)胞壁結(jié)合區(qū)、細(xì)胞膜結(jié)合區(qū)和白蛋白結(jié)合區(qū)已被去除，減少了交叉反應(yīng)和非特異性結(jié)合。重組蛋白Protein G 被廣泛與樹脂偶聯(lián)的配體，用作純化多克隆或單克隆 IgG 抗體。
 
重組蛋白Protein L 類似于PPL包含 5 個(gè) kappa 結(jié)合結(jié)構(gòu)域。具有獨(dú)特的通過 kappa 輕鏈相互作用結(jié)合而不干擾抗體-抗原結(jié)合位點(diǎn)。重組蛋白 Protein L 中去除了細(xì)胞壁結(jié)合區(qū)、細(xì)胞膜結(jié)合區(qū)和白蛋白結(jié)合區(qū)，以確保最大程度 IgG 的特異性結(jié)合。
 
重組蛋白Protein A/G在大腸桿菌中產(chǎn)生，由 7 個(gè) IgG 結(jié)合結(jié)構(gòu)域 EDABC-C1C3 組成，對(duì)應(yīng)于 5 個(gè)Protein A 的 IgG 結(jié)合區(qū)和 2 個(gè)Protein G 的 IgG 結(jié)構(gòu)域。重組蛋白Protein A/G 的結(jié)合能力比單獨(dú)的蛋白 A 或蛋白 G 更廣。
 

產(chǎn)品應(yīng)用

1. 作為純化配基，親和層析介質(zhì)制備原料；
2. 作為抗原，應(yīng)用于生產(chǎn)高質(zhì)量抗體；
3. ELISA和其他分析方法中作為標(biāo)準(zhǔn)品使用；
4. 免疫沉淀與免疫共沉淀應(yīng)用。

 

表1. Protein A、G 和 L 對(duì)不同物種 Ig 的結(jié)合能力總表

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產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 低內(nèi)毒素：經(jīng)LAL法檢測(cè)，均< 0.1EU/μg。
2. 高純度：均>96%，經(jīng)SDS-PAGE和HPLC雙重檢測(cè)。
3. 產(chǎn)品形態(tài)：凍干粉，相比于液體，凍干粉產(chǎn)品穩(wěn)定性更好，更易長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。
4. Carrier Free：不含載運(yùn)蛋白。
5. 現(xiàn)貨供應(yīng)，多種規(guī)格可選。
 

產(chǎn)品質(zhì)檢數(shù)據(jù)

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圖5. Protein A蛋白質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)
 
重組蛋白Protein A 經(jīng) SDS-PAGE 和 HPLC 雙重檢測(cè)，純度>97%
 
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圖6. Protein G蛋白質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)
 
重組蛋白Protein G 經(jīng) SDS-PAGE 和 HPLC 雙重檢測(cè)，純度>96%
 
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圖7. Protein L蛋白質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)
 
重組蛋白Protein L 經(jīng) SDS-PAGE 和 HPLC 雙重檢測(cè)，純度>97%
 
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圖8. Protein A/G蛋白質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)
 
重組蛋白Protein A/G 經(jīng) SDS-PAGE 和 HPLC 雙重檢測(cè)，純度>97%
 

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱
貨號(hào)
規(guī)格
Recombinant Protein A (Freeze-Dried)重組蛋白 A (凍干）
20543ES10
10 mg
20543ES60
100 mg
Recombinant Protein G (Freeze-Dried)重組蛋白 G (凍干）
20544ES08
5 mg
20544ES08
50 mg
Recombinant Protein L (Freeze-Dried)重組蛋白 L (凍干）
20546ES03
1 mg
20546ES25
25 mg
20546ES60
100 mg
Recombinant Protein A/ G (Freeze-Dried) 重組蛋白 A/G（凍干）
20545ES03
1 mg
20545ES25
25 mg
20545ES60
100 mg
 

 

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