1
樣品濃度過(guò)低
可能原因:樣品稀釋過(guò)度或原始濃度不足。
解決方案:提高進(jìn)樣量或濃縮樣品;確認(rèn)檢測(cè)器的靈敏度設(shè)置(如UV檢測(cè)器的AUFS值)。
樣品未溶解或穩(wěn)定性差
可能原因:溶劑選擇不當(dāng)(如流動(dòng)相與樣品溶劑不兼容),或樣品在流動(dòng)相中析出/降解。
解決方案:更換溶劑(如用流動(dòng)相溶解樣品);檢查樣品穩(wěn)定性(避光、低溫保存等)。
溶劑干擾(UV檢測(cè)器常見(jiàn))
可能原因:樣品溶劑在檢測(cè)波長(zhǎng)下有強(qiáng)吸收(如THF在低波長(zhǎng)下吸收強(qiáng)),導(dǎo)致基線(xiàn)抬高掩蓋峰。
解決方案:更換溶劑(如用甲醇、乙腈替代);調(diào)整檢測(cè)波長(zhǎng)避開(kāi)溶劑吸收峰。
2
未成功進(jìn)樣
可能原因:手動(dòng)進(jìn)樣時(shí)未推到底;自動(dòng)進(jìn)樣器針頭堵塞或程序錯(cuò)誤。
解決方案:檢查進(jìn)樣針是否堵塞;確認(rèn)自動(dòng)進(jìn)樣器程序(如吸取體積、進(jìn)樣位置)。
樣品瓶問(wèn)題
可能原因:樣品瓶墊片穿刺過(guò)多次導(dǎo)致漏液;瓶?jī)?nèi)樣品量不足。
3
流動(dòng)相配制錯(cuò)誤
可能原因:比例錯(cuò)誤(如有機(jī)相與水相顛倒)、pH值偏差。
解決方案:重新配制流動(dòng)相,核對(duì)比例和pH值。
泵流速異?;蛲A?/span>
可能原因:泵頭內(nèi)有氣泡、密封墊磨損、單向閥堵塞。
解決方案:用高流速(5 mL/min)沖洗泵;超聲清洗單向閥;更換密封墊。
流動(dòng)相未脫氣
可能原因:氣泡進(jìn)入檢測(cè)器,導(dǎo)致信號(hào)噪聲大或基線(xiàn)不穩(wěn)定。
解決方案:超聲脫氣或使用在線(xiàn)脫氣機(jī)。
4
柱效喪失或污染
可能原因:長(zhǎng)期使用導(dǎo)致柱床塌陷或填料污染。
解決方案:用強(qiáng)溶劑沖洗(如95%乙腈);必要時(shí)更換新色譜柱。
色譜柱與樣品不匹配
可能原因:反相柱用于強(qiáng)極性化合物,或正相柱用于疏水性物質(zhì)。
解決方案:根據(jù)樣品性質(zhì)選擇合適色譜柱(如C18、HILIC等)。
柱溫異常
可能原因:柱溫箱溫度設(shè)置錯(cuò)誤(如高溫導(dǎo)致熱不穩(wěn)定化合物降解)。
解決方案:確認(rèn)柱溫設(shè)置,必要時(shí)降低溫度。
5
檢測(cè)波長(zhǎng)錯(cuò)誤(UV檢測(cè)器)
可能原因:未設(shè)置在樣品的最大吸收波長(zhǎng)。
解決方案:通過(guò)紫外掃描確定最佳波長(zhǎng),或使用多波長(zhǎng)檢測(cè)(如DAD檢測(cè)器)。
檢測(cè)器光源故障
可能原因:氘燈或鎢燈壽命耗盡。
解決方案:檢查燈能量,必要時(shí)更換光源。
流通池污染或氣泡
可能原因:池內(nèi)殘留顆?;驓馀菡趽豕饴?。
解決方案:用異丙醇或硝酸溶液沖洗流通池;輕敲流通池排出氣泡。
6
管路泄漏
可能原因:接頭未擰緊或色譜柱安裝不當(dāng),導(dǎo)致樣品未進(jìn)入檢測(cè)器。
解決方案:用紙巾檢查各接口是否滲液;重新安裝色譜柱。
保護(hù)柱或在線(xiàn)過(guò)濾器堵塞
可能原因:顆粒物積累導(dǎo)致背壓升高、流速降低。
解決方案:更換保護(hù)柱或清洗過(guò)濾器。
7
運(yùn)行時(shí)間過(guò)短
可能原因:峰保留時(shí)間超出預(yù)設(shè)的運(yùn)行時(shí)間。
解決方案:延長(zhǎng)分析時(shí)間,或通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定保留時(shí)間范圍。
積分參數(shù)不當(dāng)
可能原因:峰閾值(Threshold)設(shè)置過(guò)高,忽略小峰。
解決方案:降低積分閾值或手動(dòng)積分。
8
具體排查流程
確認(rèn)樣品:用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣,若出峰則問(wèn)題在樣品。
檢查流動(dòng)相:更換新配制的流動(dòng)相,排除污染或比例錯(cuò)誤。
測(cè)試泵流速:用量筒測(cè)量泵的實(shí)際輸出流速。
旁路色譜柱:將色譜柱替換為兩通,觀察檢測(cè)器基線(xiàn)是否正常。
檢測(cè)器自檢:運(yùn)行燈能量測(cè)試或查看流通池透光率。
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