分子診斷實(shí)驗(yàn)的第一步：磁珠法提取核酸

       分子診斷是以核酸作為檢測(cè)對(duì)象，主要應(yīng)用于臨床各科的診斷中，如腫瘤、感染、遺傳等各方面，而核酸提取是分子診斷實(shí)驗(yàn)的“Di一步”。

       通過對(duì)磁珠進(jìn)行一定的包被（如硅基、氨基、羧基等），從而可以實(shí)現(xiàn)對(duì)核酸的高通量、自動(dòng)化提取，這一技術(shù)產(chǎn)生于20世紀(jì)80年代，已經(jīng)有了成熟的試劑盒并形成為產(chǎn)業(yè)。

傳統(tǒng)核酸提取法與磁珠法比較

       隨著基因檢測(cè)、個(gè)性化給藥、產(chǎn)前診斷等的普及，在生物行業(yè)各領(lǐng)域都追求高通量、自動(dòng)化的今天，傳統(tǒng)DNA提取方法的局限愈來愈明顯，而磁珠法DNA提取的優(yōu)勢(shì)則愈來愈明顯：能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作；操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短；不使用傳統(tǒng)方法中的苯、氯仿等有毒試劑，安全無毒完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念；與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。

       磁珠法提取DNA試劑盒要比傳統(tǒng)的方法（Chelex100 法、有機(jī)法、二氧化硅法、鹽析法等）更為簡(jiǎn)單、方便，轉(zhuǎn)移離心管的次數(shù)較少，不易污染等。

磁珠法提取核酸的應(yīng)用范圍

       磁珠法提取DNA試劑盒是納米技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、生物醫(yī)學(xué)技術(shù)和法醫(yī)學(xué)技術(shù)的綜合高科技產(chǎn)品。

       可廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)中的基因組研究、分子進(jìn)化研究、醫(yī)學(xué)中遺傳病的研究、突變基因的檢測(cè)、腫瘤的篩查、HPV等的檢測(cè)、HLA分型、移植配型等、法醫(yī)學(xué)生物樣本血斑、精斑、頭發(fā)、煙蒂等現(xiàn)場(chǎng)證物的檢測(cè)、和司法上的親子鑒定、血緣關(guān)系的鑒定等提供證據(jù)、考古學(xué)、大中小學(xué)的生物試驗(yàn)等許多領(lǐng)域。

免疫磁珠引領(lǐng)分離技術(shù)的一次革命

       免疫磁珠，（ImpetiCbead，IMB簡(jiǎn)稱磁珠），是發(fā)展起來的一項(xiàng)新的免疫學(xué)技術(shù)，它將固化試劑特有的優(yōu)點(diǎn)與免疫學(xué)反應(yīng)的高度特異性結(jié)合于一體，以免疫學(xué)為基礎(chǔ)，滲透到病理、生理、藥理、微生物、生化以及分子遺傳學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域，其在免疫檢測(cè)、細(xì)胞分離、生物大分子純化和分子生物學(xué)等方面得到了越來越廣泛的應(yīng)用。

免疫磁珠原理

       利用人工合成的內(nèi)含鐵成分，可被磁鐵磁力所吸引，外有功能基團(tuán)，可結(jié)合活性蛋白質(zhì)(抗體)的磁珠，作為抗體的載體。當(dāng)吸附在磁珠上的抗體與相應(yīng)的微生物或特異性抗原物質(zhì)結(jié)合后，則形成“抗原-抗體-磁珠免疫復(fù)合物”，這種復(fù)合物具有較高的磁響應(yīng)性，在磁鐵磁力的作用下定向移動(dòng)，使復(fù)合物與其他物質(zhì)分離，而達(dá)到分離、濃縮、純化微生物或特異性抗原物質(zhì)的目的。

免疫磁珠純化與抗體層析純化比較

       應(yīng)用抗體（蛋白）包被的免疫磁珠純化技術(shù)無需復(fù)雜的層析設(shè)備，對(duì)樣品的澄清度無限制，只需要簡(jiǎn)單的磁性吸附步驟即可很方便地從單抗表達(dá)產(chǎn)物中分離單抗，有效解決了傳統(tǒng)層析技術(shù)的不足之處。

       另外，免疫磁珠技術(shù)區(qū)別于PCR技術(shù)和流式細(xì)胞技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于它可以保證被分離靶細(xì)胞的形態(tài)和功能的完整。免疫磁珠技術(shù)同時(shí)還具有靈敏度高、特異性高、檢測(cè)速度快、重復(fù)性好、操作簡(jiǎn)單和不需要昂貴的儀器設(shè)備等優(yōu)點(diǎn)。

免疫磁珠的應(yīng)用范圍

       免疫磁珠是由John Ugelstar等在1979年首先制備出，是磁珠免疫微球的一種，為包被有單克隆抗體的球型磁性微粒，可特異性地與靶物質(zhì)結(jié)合使之具有磁響應(yīng)性，從此被廣泛地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)衛(wèi)生領(lǐng)域的許多方面，并由此引發(fā)了生物分離技術(shù)上的一次革命。其主要被應(yīng)用在細(xì)胞分選（MACS）、免疫檢測(cè)和疾病診斷（細(xì)胞因子檢測(cè)、無創(chuàng)產(chǎn)前診斷）、癌癥治療、食品及環(huán)境中微生物檢測(cè)等方面。

       研究人員往往會(huì)基于特定的細(xì)胞因子選擇“多路復(fù)用試劑盒”，盡管許多公司出售的試劑盒提供的面板很大。但有些公司可以提供小面板試劑盒的定制工作，幫助研究人員縮小他們想了解的免疫反應(yīng)、疾病或治療相關(guān)的細(xì)胞因子范圍。

       磁珠助力高危孕婦外周血血漿中的游離DNA片段測(cè)序。

       自去年7月2日，CFDAS次批準(zhǔn)第二代基因測(cè)序診斷產(chǎn)品上市。因此磁珠產(chǎn)品在“孕周12周以上的高危孕婦外周血血漿中的游離基因片段進(jìn)行基因測(cè)序”過程中必不可少。

       我們知道，外周血游離 DNA, 片段長(zhǎng)度通常小于 1kb,如血液中的腫瘤胞外 DNA片段或母體外周血血漿或血清中的胎兒游離 DNA。游離DNA片段可以提供某些癌癥和疾病確診的生物學(xué)標(biāo)志物,在生物體液如血漿、血清、尿液中,游離DNA片段的濃度通常很低,且不同個(gè)體之間的差異很大。

外周血游離 DNA的檢測(cè)中如何使用磁珠？

       在這外周血游離 DNA的檢測(cè)過程中，UPure Circulating DNA Kit 是專門針對(duì) 200μl-5ml 血漿、血清或尿液樣本中游離 DNA的提取純化試劑盒，其含有專用的磁珠和特殊配方的緩沖體系,可以純化游離DNA 濃度低至50pg/ml的樣本.

磁珠法核酸提取純化儀的設(shè)備

       核酸提取純化儀是通過使用磁珠法試劑提取純化核酸的設(shè)備，具有自動(dòng)化程度高，提取速度快，結(jié)果穩(wěn)定，操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。使用Zhuan利設(shè)計(jì)的試劑盒，可同時(shí)純化1-20/1-32個(gè)樣品。搭配不同種類的磁珠核酸試劑，可以快速提取動(dòng)植物組織、血液、體液、刑事檢體等樣品中的DNA和RNA。廣泛應(yīng)用于科研、疾控系統(tǒng)、食品安全、法醫(yī)、臨床監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。

小結(jié)

       磁珠技術(shù)作為一種交叉學(xué)科匯聚研發(fā)而成的產(chǎn)品，其在生物學(xué)及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中作用巨大。借助于二代測(cè)序的飛速發(fā)展，二代測(cè)序多涉及的耗材也迎來了它的春天。

       無論是用于提取核酸的磁珠，還是作用于細(xì)胞分選、免疫檢測(cè)所用的免疫磁珠，其在分子生物學(xué)領(lǐng)域仍然屬于行業(yè)的細(xì)分領(lǐng)域，其中的技術(shù)仍然在不斷進(jìn)步發(fā)展中，隨著越來越多公司的加入，其研發(fā)的產(chǎn)品價(jià)格也將越來越便宜。

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