摘要：

本實(shí)驗(yàn)采用固相萃取結(jié)合高效液相色譜建立了辣椒粉中蘇丹紅的前處理方法。辣椒粉樣品復(fù)雜，使用國標(biāo)法或市面蘇丹紅專用小柱方法，會(huì)出現(xiàn)譜圖雜質(zhì)多，影響蘇丹紅定量現(xiàn)象。本實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了蘇丹紅專用小柱的方法，在專用柱基礎(chǔ)上添加了預(yù)處理柱，可大量吸附辣椒粉中干擾測(cè)定的雜質(zhì)，再經(jīng)過 SDR-2 小柱對(duì)蘇丹紅進(jìn)行富集，可解決辣椒粉雜質(zhì)干擾蘇丹紅出峰的問題。樣品經(jīng)乙酸乙酯提取，預(yù)處理柱結(jié)合 SDR-2 固相萃取柱凈化，高效液相色譜檢測(cè)，外標(biāo)法進(jìn)行定量。結(jié)果表明，蘇丹紅為 1 mg/kg 時(shí)，四種蘇丹紅的回收率均在 90% ~ 105%，能夠滿足檢測(cè)要求。 

關(guān)鍵詞：蘇丹紅；預(yù)處理柱；SDR-2固相萃取小柱；辣椒粉。

儀器、試劑與材料

高效液相色譜儀-PDA檢測(cè)器（HPLC-PDA）。

樣品制備

稱取 2 g 樣品置于 50 mL 離心管中，加入 20 mL 乙酸乙酯，渦旋混合 3 min，超聲提取 10 min，8000 rpm 離心 5 min，轉(zhuǎn)移上清液至 15 mL 離心管中，殘?jiān)屑尤?20 mL 乙酸乙酯重復(fù)提取一次，合并兩次提取液，用乙酸乙酯定容至 40 mL，搖勻。準(zhǔn)確移取 10 mL 提取液于 40℃ 氮吹干，加入 5 mL 正己烷復(fù)溶，渦旋混勻，待凈化。

將預(yù)處理柱和 SDR-2 小柱用 5 mL 正己烷活化，然后將預(yù)處理柱串聯(lián)在 SDR-2 小柱上方，將待凈化液全部上樣于小柱中，并棄去流出液，用 5 mL 正己烷清洗樣品管，并將清洗液一并上到小柱上，棄去流出液。將預(yù)處理柱棄去，用10 mL 30%乙酸乙酯/正己烷溶液（V/V）洗脫 SDR-2 小柱，收集流出液于40 攝氏度氮吹干，用 1 mL 乙腈復(fù)溶，渦旋混勻，過 0.45 μm 親水PTFE 針式過濾器（P/N：MZ081345）過濾，待檢測(cè)。

注：上樣時(shí)需要控制預(yù)處理柱流速在 2 - 3 s/滴，流速過快會(huì)導(dǎo)致回收率偏低。

注：辣椒粉基質(zhì)比較復(fù)雜，雜質(zhì)容易在色譜柱上堆積，測(cè)試大批量樣品后，易造成保留時(shí)間漂移，建議定期用異丙醇沖洗色譜柱，以延長(zhǎng)色譜柱壽命。

由表 1、圖 2 可知，使用 PuriTest SDR-2 結(jié)合預(yù)處理小柱凈化辣椒粉樣品，凈化效果良好，且加標(biāo)回收率均在 80% ~ 120%之間，能夠滿足檢測(cè)要求。有圖 1 ~ 圖 3 可知，使用 Robussil C18 色譜柱分離蘇丹紅，分離度良好，且保留時(shí)間穩(wěn)定。能夠解決雜質(zhì)峰過多導(dǎo)致的蘇丹紅無法定量或定量不準(zhǔn)確的問題。

本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)前處理方法的優(yōu)化，建立了辣椒粉中蘇丹紅的前處理方法。使用 PuriTest  SDR-2 產(chǎn)品串聯(lián)預(yù)處理柱并結(jié)合高效液相色譜對(duì) 1 mg/kg 添加水平的辣椒粉樣品進(jìn)行了檢測(cè)，回收率在90% ~ 110%之間，RSD 小于 10%，能夠滿足檢測(cè)要求。增加了預(yù)處理柱后，能夠?qū)⒗苯贩蹣悠分械碾s質(zhì)吸附干凈，不再對(duì)蘇丹紅的出峰造成干擾。說明 PuriTest SDR 串聯(lián)預(yù)處理柱能夠用于辣椒粉中蘇丹紅的檢測(cè)。