超微量技術(shù)如何測(cè)定核酸？

* 圖源來源于網(wǎng)絡(luò)

2020年還剩一個(gè)多月，今年大部分人的生活都因?yàn)樾鹿诓《疽咔槭艿接绊憽Ｏ胪耆謴?fù)過去的情況短期內(nèi)應(yīng)該不太可能，鐘南山院士也表示，今冬明春這個(gè)疫情不會(huì)消失，或者冬天到春天的時(shí)候疫情會(huì)反撲，都有這個(gè)可能。

知識(shí)卡片

什么是新型冠狀病毒？

2019新型冠狀病毒(2019-nCoV)屬于冠狀病毒，而冠狀病毒是一個(gè)大型病毒家族，直徑約80～120nm，呈球形或橢圓形，具有多形性，是目前已知RNA病毒中基因組ZD的病毒。該病毒引起的感染主要發(fā)生在冬季和早春，引起的人類疾病主要是呼吸系統(tǒng)感染。

核酸的濃度和純度

新冠疫情的爆發(fā)使得YL器械領(lǐng)域和生命科學(xué)領(lǐng)域獲得廣泛關(guān)注和重視。2019新型冠狀病毒本質(zhì)上是一種RNA病毒，那么可以采取紫外可見分光光度法測(cè)定核酸的濃度和純度。

紫外可見分光光度法是能夠根據(jù)260和280nm處的吸光度值確定核酸純度和濃度的shou選技術(shù)。核酸在260nm處顯示ZD吸光度，而蛋白質(zhì)的ZD吸光度在280nm處。

核苷酸組分的吸光度

DNA吸收光譜實(shí)際上是單個(gè)核苷酸吸光度的總和。雙環(huán)嘌呤如腺嘌呤和鳥嘌呤有著較高的吸光度，因此吸光系數(shù)要比單環(huán)嘧啶如胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶的高。

*單個(gè)核苷酸堿基A,T,G,C的吸光度

純度檢查

分離核酸后，盡管使用了額外的苯酚蛋白質(zhì)提取，但仍可能殘留微量蛋白質(zhì)。因此必須檢查核酸的純度?？梢酝ㄟ^確定在260nm和280nm處測(cè)得的吸光度的商來評(píng)估核酸純度，比值A(chǔ)260/A280在1.9至2.1之間。

通常測(cè)定以下波長(zhǎng)吸光度值可以很方便的檢測(cè)核苷酸的純度。

超微量測(cè)量核酸

在生命科學(xué)領(lǐng)域中，核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量樣本量很小，所以可以使用超微量平臺(tái)通過紫外可見分光光度法進(jìn)行DNA和RNA分析，減少此類貴重樣品的需要量。使用短光程時(shí)，可以在無需稀釋狀態(tài)條件下測(cè)量生物樣品。這樣可以保存樣品并將樣品回收用于紫外可見分光光度法測(cè)量。 

*UV5Nano超微量紫外可見分光光度計(jì)

UV5Nano超微量紫外可見分光光度計(jì)有效優(yōu)化了分光光度計(jì)在生命科學(xué)領(lǐng)域的工作流程，結(jié)合了超微量測(cè)量與比色皿測(cè)量，通過預(yù)設(shè)的梅特勒-托利多生命科學(xué)方法可快速分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。