激光共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點(diǎn)光源對(duì)標(biāo)本內(nèi)焦平面上的每一點(diǎn)掃描,標(biāo)本上的被照射點(diǎn),在探測(cè)針孔處成像,由探測(cè)針孔后的光電倍增管(PMT)或冷電耦器件(cCCD)逐點(diǎn)或逐線接收,迅速在計(jì)算機(jī)監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖象。照明針孔與探測(cè)針孔相對(duì)于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔,焦平面以外的點(diǎn)不會(huì)在探測(cè)針孔處成像,激光共聚焦顯微鏡這樣得到的共聚焦圖象是標(biāo)本的光學(xué)橫斷面,克服了普通顯微鏡圖象模糊的缺點(diǎn)。
激光共聚焦顯微鏡需要在高度方向上做掃描,得到一系列的切片圖,然后進(jìn)行圖像疊加并得到三維圖像,從而提高景深范圍。相對(duì)于傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡,激光共聚焦顯微鏡其橫向分辨率提高40%以上,可達(dá)120nm。激光共聚焦顯微鏡樣品適用性強(qiáng),非接觸測(cè)試,無(wú)需樣品制備和導(dǎo)電性處理,對(duì)樣品無(wú)損傷(粉末、軟性樣品以及透明樣品均可測(cè)試)。激光共聚焦顯微鏡豐富的測(cè)量結(jié)果,高分辨二維及三維成像、多種二維及三維顯示結(jié)果對(duì)比、大面積圖像拼接、非接粗糙度測(cè)量、膜厚測(cè)量、熒光分析等。簡(jiǎn)便的操作及維護(hù),激光共聚焦顯微鏡無(wú)昂貴的耗材、模塊化設(shè)計(jì)、人性化的操作軟件、自動(dòng)校正程序等。
激光共聚焦顯微鏡在提高有效信號(hào)的基礎(chǔ)上,大大降低噪音信號(hào),使得高質(zhì)量的熒光圖像成為可能。
1,靈敏度是關(guān)鍵
無(wú)論是在活細(xì)胞成像,單分子分析,或是像酵母、DNA的微觀結(jié)構(gòu)成像,激光共聚焦顯微鏡都可以呈現(xiàn)細(xì)節(jié)清晰、高襯度的圖像。增強(qiáng)靈敏度,減少背景噪音是激光共聚焦顯微鏡在高端應(yīng)用的先決條件。即使是一些致密的3D組織或直接生長(zhǎng)在金屬表面的細(xì)胞等不易處理的樣品,激光共聚焦顯微鏡zhuo越的靈敏度、杰出的降噪音技術(shù)和激發(fā)激光技術(shù),也能保證輸出較好的結(jié)果。
2、更加突出的靈活性
激光共聚焦顯微鏡保證用戶用更多的染料、看更深的細(xì)胞和組織,新的照明系統(tǒng)和檢測(cè)設(shè)計(jì)大大增加了熒光顯微鏡使用的靈活性。可支持十種熒光染料同時(shí)使用并進(jìn)行光譜檢測(cè),激光共聚焦顯微鏡能勝任各種實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用。另外,如果實(shí)驗(yàn)必須,用戶可以額外增加一個(gè)激光器。多色成像能夠讓新的熒光蛋白擺脫串色的干擾,讓圖像wan美的展現(xiàn)。分子學(xué),比如蛋白以及它們的相互作用都可以利用現(xiàn)有的成像方法進(jìn)行分析。
3、非比尋常的極ng確性和可重復(fù)性
激光共聚焦顯微鏡更少的機(jī)械運(yùn)動(dòng),尤其是在光譜成像時(shí),以及更穩(wěn)定的設(shè)計(jì),保證提供更快的、不間斷的令人信服的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。整合2、3或34個(gè)檢測(cè)器在共聚焦中,可以可靠而無(wú)偏離的重現(xiàn)用戶的光譜測(cè)量。平行光譜檢測(cè)可以在波長(zhǎng)模式下同時(shí)讀出34個(gè)通道的信號(hào)。另外,其序列采集模式可以將光譜分辨率提高到3nm。
(來(lái)源:上海西努光學(xué)科技有限公司)
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