近日,“老祖宗的教誨”系列火出了圈,早先傳統(tǒng)文化里輸出的淺顯易懂且實用的道理,多少年鮮有人留意和傾聽。而今,借助AI技術(shù)“復(fù)活”老祖宗來重新復(fù)述和講解,聽上去確實有一番道理,有種溫故而知新的感覺。
(圖片源自網(wǎng)絡(luò))
儀器維護之道,亦如先賢智慧,貴在知行合一。實驗室小伙伴們是不是通常會忽略一些簡單卻關(guān)鍵的注意事項?縱使使用手冊事無巨細(xì),若使用者未給予足夠重視,或交接時疏于詳盡溝通,久而久之,儀器的損耗便如暗流積聚,終有一日徹底“抱恙”——實驗停滯、項目受阻,更需承擔(dān)高昂的維修代價,屆時追悔莫及。
這里就以英賽斯公司AutoPure蛋白純化系統(tǒng)為例,簡要敘述儀器的日常維護和啟停注意事項(其它品牌蛋白純化系統(tǒng)亦可借鑒),愿諸君防患于未然,使儀器歷久彌新。
01 日常維護
每天
整機流路部分
◇ 清潔擦拭外表,防止溶液結(jié)晶鹽腐蝕設(shè)備外表面以及元器件;
(Ps:一些嚴(yán)重的儀器外觀腐蝕生銹,往往從日常濺液滯留開始的。)
◇ 溶液和樣品需過膜,推薦使用孔徑0.45μm或相當(dāng)?shù)臑V膜過濾,此操作可有效防止流路堵塞、層析柱填料及檢測器臟污損壞。
◇ 檢查系統(tǒng)管路和接頭是否存在破損,特別注意Peek管是否有壓折(內(nèi)徑大的peek管更易彎折,如1mm白管);防止?jié)B漏,超壓,樣品損失,層析柱損壞。
◇ 系統(tǒng)使用完畢后,需用純水將系統(tǒng)沖洗干凈至各基線平穩(wěn),隨后使用20%乙醇清洗系并保存所有流路,防止流路長菌及性能下降。在使用含鹽緩沖液和20%乙醇保存液中間需間隔純水的沖洗,防止混合產(chǎn)生的微氣泡滯留系統(tǒng)。
pH計
◇ 使用前校正pH計(一定要先校正接近7的點)
◇ 使用后將pH計拆下,使用純水沖洗并擦拭干凈,浸入保護液(pH4.0飽和KCl溶液)保存
◇ pH 電極前端由一個薄玻璃膜組成,避免磕碰、污染或干燥,否則會導(dǎo)致電極損壞。
系統(tǒng)泵
◇ 每次使用前或更換緩沖液時,需從排空閥排出泵腔和管路里殘留的氣泡(使用大注射器緩慢抽出至少5ml液體),否則會影響流速的準(zhǔn)確性,甚至導(dǎo)致泵無法正常出液。
每周
整機流路部分
◇ 緩沖液入口濾網(wǎng)的檢查和清潔,如果臟污較明顯,可拆下濾網(wǎng)進行超聲清洗。
◇ 檢查泵后潤洗液,確認(rèn)是否存在顯著增加或減少,同時觀察是否渾濁,如有異常,需更換潤洗試劑(20%乙醇),并重新做好液位標(biāo)記。
每月
整機部分
◇ 使用1M NaOH溶液,AB泵各50%,以系統(tǒng)最大流速的10%沖洗約20分鐘,隨后立即用純水將NaOH沖洗干凈(電導(dǎo)值趨向于0)。
◇ 使用75%乙醇溶液,AB泵各50%,以系統(tǒng)最大流速的10%沖洗約2分鐘,隨后用純水將乙醇溶液沖洗干凈。
◇ 在線濾膜拆卸后用0.5M NaOH超聲清洗10分鐘。
背壓閥
◇ 通過在線/拆除對比的方式,檢查背壓閥壓力參數(shù)(5ml/min流速下0.14MPa±0.05MPa),如有高于設(shè)置值情況,可超聲清洗、調(diào)節(jié)或者更換。如有疑問,建議咨詢當(dāng)?shù)厥酆蠊こ處煛?/span>
每半年
壓力檢測器
◇ 零點檢查:斷開壓力傳感器前端及后端接頭,檢查顯示的壓力數(shù)值,如果不在零點且誤差超過±0.02MPa,聯(lián)系售后工程師進行上門校準(zhǔn)。
紫外檢測器
◇使用注射器將10%的表面活性劑(如Decon90 , SDS等)注入紫外流動池,來回抽吸若干次,停留20分鐘后,用純水沖洗干凈。
◇使用注射器注入乙醇或1M NaOH注入紫外流動池,來回抽吸若干次,停留20分鐘后,用純水沖洗。
pH/電導(dǎo)檢測器
◇清洗流通池:拆下pH電極,安裝盲堵,用1M NaOH清洗pH流通池30分鐘,然后用純水沖洗。
◇清洗pH電極(響應(yīng)慢,頻發(fā)不準(zhǔn)確時):
1.鹽沉積:0.1M HCl/ 0.1M NaOH/ 0.1M HCl交替洗數(shù)次,間隔5分鐘,中間使用水清洗電極;
2.油脂沉積:1%SDS清洗后進行水洗;
3.蛋白沉積:1%蛋白酶于0.1M HCl 溶液中清洗后進行水洗。
預(yù)防性保養(yǎng)
? 對整個系統(tǒng)做一次全面細(xì)致的維護
? 降低故障風(fēng)險,提高儀器性能
? 延長儀器使用壽命
? 保養(yǎng)間隔:每年
02 長時間停機注意事項
對于室溫實驗室環(huán)境的設(shè)備:
◇ 進行整機表面擦拭清潔,尤其是鹽漬。
◇ 使用1M NaOH溶液,AB泵各50%,以系統(tǒng)最大流速的10%沖洗約20分鐘,隨后立即使用純水將NaOH沖洗干凈(電導(dǎo)值趨向于0)。
◇ 使用75%乙醇溶液,AB泵各50%,以系統(tǒng)最大流速的10%沖洗約20分鐘,隨后使用純水將乙醇溶液沖洗干凈。
◇ 使用20%乙醇溶液,執(zhí)行systemwash或手動命令方式填滿系統(tǒng)流路;同時使用封口膜將試劑瓶封口,切斷電源并拔掉插頭,整機遮蓋防灰。
對于層析柜低溫環(huán)境的設(shè)備:
◇ 進行整機表面擦拭清潔,尤其是鹽漬。
◇ 使用1M NaOH溶液,AB泵各50%,以系統(tǒng)最大流速的10%沖洗約20分鐘,隨后立即使用純水將NaOH沖洗干凈(電導(dǎo)值趨向于0)。
◇ 使用75%乙醇溶液,AB泵各50%,以系統(tǒng)最大流速的10%沖洗約20分鐘,隨后使用純水將乙醇溶液沖洗干凈。
◇ 使用20%乙醇溶液,執(zhí)行systemwash或手動命令方式填滿系統(tǒng)流路;同時使用封口膜將試劑瓶封口;
◇ 保持儀器開機狀態(tài),控制層析柜階梯式升溫,逐漸將層析柜溫度升至室溫(該過程至少需要30分鐘,期間除濕功能一直開啟),打開層析柜門,使柜內(nèi)與外界空氣流動,確保溫濕度一致,隨后斷電,設(shè)備取出(如果層析柜要繼續(xù)低溫使用)或繼續(xù)放在關(guān)機的層析柜中,整機遮蓋防灰。
03 蛋白純化系統(tǒng)常見故障
原因分析和解決方案
①系統(tǒng)超壓:
1)通過分段斷開的方式監(jiān)視壓力變化,逐一排查系統(tǒng)堵塞點,優(yōu)先檢查在線濾膜、背壓閥等易堵組件;若發(fā)現(xiàn)在線濾膜堵塞,可采用超聲清洗方式處理。若清洗無效,則需要更換濾膜;
2)若背壓閥堵塞,可將閥整體進行超聲清洗。若清洗無效,則可以聯(lián)系設(shè)備售后上門拆卸清理或整體更換;
3)若其它組件檢測到堵塞,可根據(jù)實際情況拆卸清理或者直接更換。
4)使用層析柱時注意檢查柱下端濾膜,因柱篩網(wǎng)破損泄漏填料導(dǎo)致系統(tǒng)堵塞也時有發(fā)生。
系統(tǒng)流路超壓問題概率分析:
②流速脈沖/不準(zhǔn)確:
1)進行柱塞泵問題排查與處理,先檢查入口流路是否存在走空現(xiàn)象。若發(fā)現(xiàn)走空,通過排空閥抽液填充泵腔;斷開雙邊泵頭上的接頭,觀察出液情況,若發(fā)現(xiàn)一邊不出液,需拆卸上下單向閥并超聲清洗。若上述操作都未能解決,則需要進一步拆卸泵頭,檢查內(nèi)部柱塞桿和凸輪運轉(zhuǎn)情況;
2)進行阻尼器問題排查與處理,阻尼器漏液或破損都可能導(dǎo)致脈沖或流速異常,若發(fā)現(xiàn)設(shè)備下方桌面有漏液,應(yīng)及時聯(lián)系工程師上門檢查;
3)進行流路漏液問題的排查與處理,若發(fā)現(xiàn)流速不準(zhǔn)確,可能是某處存在漏液,沿流路檢查漏點,并及時進行處理。
③紫外波動或漂移:
1)優(yōu)先考察泵流速或脈沖問題,通過調(diào)出壓力曲線,觀察是否跟隨UV一起波動,若波動趨勢一致,則說明是泵流速或脈沖帶來的問題,參考上一條;
2)UV流通池問題,臟污、雜質(zhì)或微氣泡,參考上文“每半年/紫外檢測器”清理方法,對流動池進行清洗;
3)溫度或濕度波動及異常震動:由設(shè)備所處環(huán)境的造成影響,例如置于層析柜的系統(tǒng),層析柜控穩(wěn)控濕出現(xiàn)問題,波動較大,同樣會造成紫外的異常波動或漂移,此時需檢修層析柜,去除干擾;同樣,純化系統(tǒng)周邊的其它設(shè)備,如離心機,振蕩器,層析柜壓縮機等,帶來的震動也會造成紫外波動,需排查,必要時改變系統(tǒng)位置,避開震動源。
4)供電或靜電因素:系統(tǒng)供電電源的問題(如電壓不穩(wěn)、地線失靈)可能會導(dǎo)致紫外波動,需檢查設(shè)備供電是否正常,電壓應(yīng)在220-240VAC,無電浪涌,地線正常,零地電壓≤2V。
5)光纖或紫外模塊損壞:在日常設(shè)備操作或搬遷時,紫外流通池突起區(qū)域的碰撞或震動,會造成光纖頭部的損壞,1.2兩種原因排除后,若問題尚未解決,則為光纖損壞的可能性較大,此時需聯(lián)系官方售后人員上門檢查處理。
④收集體積不準(zhǔn)確:
1)優(yōu)先考察是否為泵流速不準(zhǔn)確或脈沖問題,處理辦法詳見第②條;
2)收集器滴頭不準(zhǔn),液體濺出,可觀察收集過程是否有這種情況,若有則重新調(diào)整滴頭管,校準(zhǔn)收集器;
3)其它原因,如切換電磁閥或收集器控制板原因,如果確認(rèn)沒有上述兩條問題,則需報修由原廠工程師檢查電磁閥和控制板,必要時進行更換。
以上內(nèi)容僅供參考,旨在幫助各位純化小伙伴們確保設(shè)備能夠常用常新,保持性能穩(wěn)定,從而更好地助力實驗,請對日常保養(yǎng)留個心,同時在出現(xiàn)問題時也不必慌張。大多數(shù)常見問題并非由設(shè)備故障引起,而是通過仔細(xì)排查和思考來解決的。很多時候,無需等待工程師到場,大家完全可以自己解決問題。
在此,祝愿大家在純化實驗的時光里,每一步操作都順利流暢,每一組數(shù)據(jù)都精準(zhǔn)可靠,項目進展順利,收獲滿滿。
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