糖蛋白是由蛋白質(zhì)和糖鏈經(jīng)共價(jià)結(jié)合形成的復(fù)雜分子。它們結(jié)構(gòu)多樣，合成過程復(fù)雜（涉及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體），功能極其廣泛，在細(xì)胞識(shí)別、信號(hào)傳導(dǎo)、結(jié)構(gòu)支撐、免疫保護(hù)、激素調(diào)節(jié)等方面扮演著不可或缺的角色。糖鏈的“糖密碼”是生物信息的重要載體。

在糖蛋白的制備過程中常伴隨種類繁多的小分子雜質(zhì)，主要來源于生產(chǎn)過程中使用的宿主細(xì)胞、培養(yǎng)基、純化工藝添加劑以及產(chǎn)品自身的降解。這些雜質(zhì)在生產(chǎn)的各個(gè)環(huán)節(jié)（細(xì)胞培養(yǎng)、收獲、純化、制劑、儲(chǔ)存）都有可能產(chǎn)生或殘留。

糖蛋白（如單抗、融合蛋白、酶等）在生物制藥和研究中具有重要的價(jià)值，但其純化、濃縮、及換液過程極易“踩雷”：

如何破局？

英賽斯解決方案：

AutoTFF075 + 中空纖維柱

溫和高效的破局之道！

面對(duì)客戶糖蛋白樣品中小分子雜質(zhì)去除和活性保持的雙重需求，我們推薦并成功應(yīng)用了基于切向流過濾 (TFF) 的核心技術(shù)方案，采用英賽斯 AutoTFF075切向流過濾系統(tǒng)和低吸附、高兼容性的中空纖維柱。

方案優(yōu)勢(shì)

1

 溫和低剪切

中空纖維柱獨(dú)特的流道設(shè)計(jì)可顯著降低流體剪切力，最大限度維持糖蛋白的天然結(jié)構(gòu)和生物活性。

2

 超低吸附表面

采用精選膜材與優(yōu)化組件設(shè)計(jì)，有效減少糖蛋白在膜面的非特異性吸附，提高回收率。

3

一步到位

濃縮 + 緩沖液置換 (透析過濾) 可在同一系統(tǒng)中連續(xù)完成，高效便捷。

4

精準(zhǔn)可控

AutoTFF075切向流過濾系統(tǒng)提供精確的跨膜壓 (TMP) 和切向流速 (CFV) 控制，確保工藝參數(shù)可精準(zhǔn)優(yōu)化。

5

高效去除小分子

通過透析過濾 (DF) 階段，徹底清除小分子雜質(zhì)。

實(shí)戰(zhàn)工藝步驟（核心流程）：

圖1：糖蛋白濃縮與緩沖液置換工藝流程圖

系統(tǒng)準(zhǔn)備：使用AutoTFF075切向流過濾系統(tǒng)，連接中空纖維柱（3KD，100cm2），進(jìn)行預(yù)處理和緩沖液平衡。

溫和濃縮：嚴(yán)格控制TMP和CFV在較低水平，優(yōu)先確保蛋白活性，濃縮至目標(biāo)體積。

圖2：AutoTFF075 切向流過濾系統(tǒng)上溫和的濃縮過程

高效透析過濾 (換液)：AutoTFF075可以進(jìn)行等體積洗濾，持續(xù)穩(wěn)定的加入目標(biāo)緩沖液，同步濾出小分子雜質(zhì)，并可精確控制洗濾倍數(shù)。關(guān)鍵點(diǎn)：確保換液倍數(shù)達(dá)標(biāo) (本案例 >10倍體積)。AutoTFF075通過自動(dòng)化的方法進(jìn)行超濾濃縮，大大減少了人工操作步驟和時(shí)間，提高了實(shí)驗(yàn)效率，并降低了操作誤差，使結(jié)果更可靠、可重復(fù)。整個(gè)過程溫和、高效、自動(dòng)化程度高，能有效保持目標(biāo)分子的生物活性。

圖3：高效的透析過濾(換液)過程，小分子持續(xù)被洗脫

終點(diǎn)判定：通過濾出液電導(dǎo)率穩(wěn)定及目標(biāo)小分子的 HPLC 檢測(cè)，確認(rèn)雜質(zhì)有效清除。AutoTFF075可實(shí)現(xiàn)洗濾體積或電導(dǎo)作為終點(diǎn)。

效果驗(yàn)證：HPLC 數(shù)據(jù)說話！

超濾前： 明顯可見小分子雜質(zhì)峰。

圖4：AutoTFF075切向流過濾系統(tǒng)純化前HPLC-SEC檢測(cè)結(jié)果

超濾后：小分子雜質(zhì)峰顯著降低，糖蛋白主峰清晰，回收率高。

圖5：純化后所得目標(biāo)物的HPLC-SEC檢測(cè)結(jié)果

圖6：濾液中的小分子雜質(zhì)HPLC-SEC檢測(cè)圖譜

產(chǎn)品系列

AutoTFF系列切向流過濾系統(tǒng)：靈活、穩(wěn)定、易用，全面覆蓋從研發(fā)到生產(chǎn)的不同規(guī)模需求。

Hicient L-2000Bio高效液相色譜儀：系統(tǒng)經(jīng)過專門設(shè)計(jì)，能夠滿足嚴(yán)格的方法重現(xiàn)性、線性和準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)。

選擇英賽斯，選擇專業(yè)可靠的純化工具！

專注于制藥與生物技術(shù)領(lǐng)域的儀器研發(fā)與制造。

提供從方法開發(fā)到工藝放大的全方位技術(shù)支持。

為您下一個(gè)生物大分子純化挑戰(zhàn)，提供更優(yōu)解！