在細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)、免疫檢測(cè)等研究中，熒光素的選擇往往直接影響實(shí)驗(yàn)成敗。信號(hào)弱、背景高、多色串?dāng)_……這些讓科研人頭疼的問(wèn)題，很多時(shí)候都可以通過(guò)科學(xué)的選型來(lái)規(guī)避。

激發(fā)/發(fā)射光譜：決定與儀器濾光片的匹配程度

亮度：影響弱信號(hào)靶標(biāo)的可檢出性

光穩(wěn)定性：決定長(zhǎng)時(shí)程成像的可用性

環(huán)境敏感性：pH、離子強(qiáng)度變化可能影響熒光強(qiáng)度

標(biāo)記化學(xué)：NHS酯、馬來(lái)酰亞胺等反應(yīng)體系的適配性

小分子有機(jī)染料：結(jié)構(gòu)可設(shè)計(jì)、標(biāo)記化學(xué)成熟，是免疫熒光、流式的主力。代表有熒光素、羅丹明、Cy3/Cy5。

熒光蛋白：通過(guò)基因融合實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，適合活細(xì)胞成像，無(wú)需外源標(biāo)記。

量子點(diǎn)：亮度高、抗漂白強(qiáng)、發(fā)射譜窄，適合多色成像與長(zhǎng)時(shí)程追蹤。

功能型探針：響應(yīng)Ca2?、pH、ROS等，通過(guò)強(qiáng)度或比值變化讀出。

藍(lán)光通道（405 nm）：香豆素類(lèi)、藍(lán)色熒光蛋白

綠光通道（488 nm）：熒光素/FITC（熒光素異硫氰酸酯）、綠色熒光蛋白

黃橙通道（561 nm）：羅丹明、Cy3

紅光通道（640 nm）：Cy5、遠(yuǎn)紅染料

近紅外通道（>700 nm）：適合活體成像

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