小明做實(shí)驗(yàn)有兩把刷子
......
一把刷試管
一把刷眼淚
實(shí)驗(yàn)嘛,哪有順利的(抹淚
葡聚糖硫酸鈉(Dextran Sulfate Sodium Salt,DSS) 是一種聚陰離子衍生物,常用于誘導(dǎo)建立動(dòng)物潰瘍性結(jié)腸炎模型,是目前腸炎造模研究領(lǐng)域金標(biāo)準(zhǔn)。MP Biomedicals 生產(chǎn)的DSS具有高質(zhì)量、高純度、高重復(fù)性的特點(diǎn)。迄今為止,有超過10,000篇科學(xué)文獻(xiàn)引用,有效性得到了業(yè)界廣泛認(rèn)可。
使用DSS的客戶群體越龐大,所產(chǎn)生的問題自然也越多。以下是MP Bio DSS誘導(dǎo)腸炎技巧及常見問題解答講座視頻,主要內(nèi)容如下:
潰瘍性結(jié)腸炎造模方法簡(jiǎn)介;
DSS誘導(dǎo)腸炎造模過程、成模指標(biāo)、注意事項(xiàng)及影響因素;
DSS誘導(dǎo)腸炎模型的應(yīng)用及研究進(jìn)展;
DSS誘導(dǎo)腸炎模型客戶案例及常見問題解答;
MP Biomedicals 其他相關(guān)產(chǎn)品介紹。
DSS溶解之后發(fā)黃是正常現(xiàn)象嗎?
DSS溶液透明-淡黃色都是正常的。
Q2:
用DSS處理腸癌細(xì)胞,請(qǐng)問DSS也是無(wú)菌水溶解嗎?
建議用無(wú)菌水配成母液,0.22 μm濾膜過濾后加到培養(yǎng)基中或者用培養(yǎng)基直接溶解,再經(jīng)0.22 μm濾膜過濾。
Q3:
體重和腹瀉情況比較符合DSS造模預(yù)期,結(jié)腸長(zhǎng)度卻沒有縮短,請(qǐng)問可能的原因是什么呢?
具體需要依據(jù)病理切片來判斷造模是否成功。有可能會(huì)出現(xiàn)體重不下降、結(jié)腸長(zhǎng)度沒縮短,但是造模成功的情況。
Q4 :
慢性腸炎造?;蛘逜OM/DSS造模中幾個(gè)循環(huán)的DSS濃度是必須要保持一致嗎?因?yàn)榭吹接邢嚓P(guān)文獻(xiàn)里有說小鼠對(duì)這個(gè)DSS有耐受性,如果到了第二輪或者第三輪效果不明顯的話,可以調(diào)整DSS的濃度嗎?
可以調(diào)整,先看第一輪什么反應(yīng)以及第二輪開始的反應(yīng)。
Q5:
UC患者一般為連續(xù)病灶,在小鼠DSS模型中是否也是連續(xù)的呢?
不是連續(xù)的。
Q6:
C57小鼠,3% DSS喂食7天后,體重只下降了1 g,無(wú)便血等其他癥狀。原因是什么?
首先,體重下降程度只是造模成功與否的參考因素之一。小鼠體重下降不明顯,但也有可能造模成功,需依據(jù)病理切片來判斷。DSS有批間差,并且小鼠具有個(gè)體差異,文獻(xiàn)中DSS濃度1-5%都是存在的,是要看造模成功與否而不是使用的DSS的濃度。建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)來選擇合適的DSS濃度。
Q7:
用2.5%濃度同時(shí)做了C57和BALB/c小鼠,僅一周都出現(xiàn)了便血,BALB/c的便血特別嚴(yán)重,感覺像是急性腸炎的癥狀而非慢性。這種情況需要調(diào)整濃度嗎?
慢性腸炎通常需要2-3個(gè)循環(huán),但也跟動(dòng)物品系有關(guān),DSS誘導(dǎo)的時(shí)候?qū)儆诩毙园l(fā)作,出現(xiàn)便血屬于正常現(xiàn)象,可以隨時(shí)觀察,如果死亡現(xiàn)象比較多可調(diào)整濃度。死亡小鼠可做病理切片。
Q8:
慢性結(jié)腸炎模型和急性結(jié)腸炎相比,看病理切片和癥狀有什么不同?
慢性腸炎是慢性反復(fù)發(fā)作,也就是說用藥癥狀就減輕,但是隔一段時(shí)間又會(huì)出現(xiàn)癥狀。慢性腸炎時(shí)間長(zhǎng)了會(huì)有修復(fù)的病理,比如crypt可以看到有修復(fù)的現(xiàn)象,但是慢性腸炎急性發(fā)作的時(shí)候也要出現(xiàn)急性腸炎的病理,比如炎性細(xì)胞浸潤(rùn),囊腫,出血等。
Q9:
急性腸炎 DSS 3% 6周小鼠喂食7天。體重預(yù)估降低10%,結(jié)腸縮短不明顯,便血也不明顯 PCR沒有檢測(cè)到炎癥因子,未做病理切片,停喂DSS后小鼠體重恢復(fù)。這種情況是否算造模不成功,應(yīng)該如何更改呢?
建議選用8-12周小鼠,造模相對(duì)比較穩(wěn)定,6周的還處于不成熟期,可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響。DSS會(huì)抑制PCR反應(yīng),建議DSS腸炎模型在做PCR反應(yīng)的時(shí)候加入陽(yáng)性對(duì)照,排除DSS對(duì)PCR的抑制。陽(yáng)性對(duì)照采用相同的模版,用gapdh的引物來做PCR。
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