在懸浮陣列技術中構(gòu)建大容量光學條碼的一個嚴重障礙是能量轉(zhuǎn)移，這會導致不可預測的條碼信號、有限的條碼數(shù)量以及不可行的實驗迭代次數(shù)。這項工作報告了一種有效且簡單的方法來消除多色中的能量轉(zhuǎn)移

通過結(jié)合具有大斯托克斯位移（約 180 nm）的四足 CdSe/CdS QD 來構(gòu)建量子點 (QD) 編碼的微珠。利用這一獨特的功能，可以輕松實現(xiàn)理論上的 7×7-1 條碼矩陣，該矩陣結(jié)合了兩種顏色和七種強度級別。因此，含有四足體 CdSe/CdS QD 的微珠被證明具有強大的編碼能力，可以實現(xiàn)精確的條形碼設計。 Shirasu 多孔玻璃膜乳化方法能夠輕松控制微珠大小，有助于建立包含 144 個可區(qū)分條碼的 3D 條碼庫，顯示出實現(xiàn)大規(guī)模多重檢測的巨大潛力。此外，當應用于五種常見過敏原的多重檢測時，這些條形碼表現(xiàn)出優(yōu)異的檢測性能（檢測限：0.01–0.02 IU mL-1）

適用于加標和患者血清樣品。因此，這種新的編碼策略有助于擴大條碼容量，同時降低用于高通量復用檢測的微珠光學編碼的技術和經(jīng)濟障礙。

一、簡介

基于編碼微珠的懸浮陣列技術 (SAT) 在單個小樣本體積內(nèi)的分析物多重檢測中發(fā)揮著重要作用，使其廣泛用于單細胞分析、蛋白質(zhì)分析、基因分析和早期疾病診斷和編碼微珠是 SAT 的重要組成部分，因為它們具有用于檢測特定目標的可靠支持和跟蹤代碼。因此，實現(xiàn)高通量復用檢測需要足夠數(shù)量的條碼。 當前的光學編碼策略通常結(jié)合顏色和強度，以實現(xiàn)靈活編碼和高速解碼 是Z與其他許多編碼方法（例如圖形編碼、物理編碼、化學編碼和電子編碼）相比，這種編碼方法更為普遍。 光學編碼策略通常利用熒光團 [例如有機染料、量子點 (QD)]，它們發(fā)出兩種或更多顏色以實現(xiàn)更多條碼。

 然而，多色熒光團之間的光譜重疊不可避免地會產(chǎn)生難以處理的整體熒光現(xiàn)象，例如隨機 F?rster共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET) 和光子重吸收，導致非正交熒光響應。因此，這限制了條碼的數(shù)量，并使獲得的條碼信號難以預測或設計，即使在微珠中加入了準確比例的熒光團。因此，獲得足夠數(shù)量的可區(qū)分條碼需要大量的實驗迭代，由于構(gòu)建高容量多路復用檢測平臺的技術和經(jīng)濟進入壁壘，這是許多科學家無法實現(xiàn)的選擇。

總之，我們報告了一種有效且簡單的方法來消除多色 QD 編碼微珠中的能量轉(zhuǎn)移

通過結(jié)合具有大斯托克斯位移的四足體 CdSe/CdS QD。在這些四足體 CdSe/CdS QD 中執(zhí)行如此大的斯托克斯位移（約 180 nm），其發(fā)射峰位于 650 nm，能夠有效抑制 tQD650 的吸收光譜和 iQD525 的發(fā)射光譜之間的光譜重疊。因此，我們應用此策略通過 SPG 膜乳化方法通過結(jié)合特定比例的 iQD525 和 tQD650 來指導多色 QD 編碼的微珠的生成，它們沒有光譜重疊。這使我們能夠通過構(gòu)建結(jié)合兩種顏色和七種強度級別的理想 7×7-1 條碼矩陣來消除能量轉(zhuǎn)移并率先采用創(chuàng)新方法進行精確條碼設計。由于 SPG 膜乳化方法也可以控制微珠的大小，我們建立了一個結(jié)合顏色、強度和直徑作為編碼元素的 3D 條碼庫，產(chǎn)生了 144 個可區(qū)分的條碼，展示了我們編碼策略的強大編碼能力，并表明其在大規(guī)模多重檢測方面的潛力巨大。此外，QDs 編碼的條形碼在五種常見過敏原的多重檢測中表現(xiàn)出良好的性能。

gens (LOD: 0.01–0.02 IU mL-1)。我們的概念驗證工作為構(gòu)建高容量多路復用平臺提供了更大的可訪問性，迄今為止，該平臺的標志是減少了大量技術和經(jīng)濟障礙，例如不可預測的條碼信號、有限的條碼數(shù)量以及大量實驗迭代的需要.此外，我們希望本文提供的結(jié)果將有助于解決使用多色熒光團混合物的其他應用中的能量轉(zhuǎn)移問題的通用解決方案。還需要注意的是，如果我們能夠進一步提高非特異性生物污染抑制、生物分子的定向固定和開發(fā)“即時護理”診斷，基于編碼微球的懸浮陣列將更加強大和穩(wěn)健平臺。

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