分析方法質(zhì)量源于設(shè)計(jì)（AQbD）是采用一種更完善、系統(tǒng)化并且基于風(fēng)險(xiǎn)管理的策略，從預(yù)定義目的開(kāi)始，來(lái)進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)?；贏QbD理念進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)可以獲得?種適宜、經(jīng)過(guò)精?設(shè)計(jì)、易于理解且穩(wěn)定的?法，使?法能夠在其整個(gè)?命周期內(nèi)可靠地提供預(yù)期性能。

應(yīng)用軟件輔助的AQbD建立福莫特羅/布地奈德及有關(guān)物質(zhì)分析方法。

使用Fusion QbD的"General Screening"模板創(chuàng)建小型篩選實(shí)驗(yàn)，找出可用作分析方法篩選步驟起點(diǎn)的初始色譜條件。

對(duì)方法性能影響最大的分析方法參數(shù)執(zhí)行綜合篩選。本實(shí)驗(yàn)中，分別選擇了色譜柱類型和pH作為篩選條件。

• pH值范圍：2.0~4.2

• 色譜柱固定相填料：選擇具有廣泛選擇性的色譜柱

  

• 梯度時(shí)間：5~12 min

• 固定色譜條件：進(jìn)樣量、柱溫、流速

  

  圖1. Fusion QbD軟件中進(jìn)行第一次篩選實(shí)驗(yàn)中設(shè)定pH范圍、梯度時(shí)間。

Fusion QbD軟件基于選擇的變量，進(jìn)行排列組合后，自動(dòng)創(chuàng)建實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，將其導(dǎo)出至Empower軟件，生成方法和方法組。通過(guò)消除為大量實(shí)驗(yàn)手動(dòng)生成方法和方法組所需的時(shí)間，從而大大縮短方法開(kāi)發(fā)時(shí)間。

本實(shí)驗(yàn)中，軟件為此實(shí)驗(yàn)創(chuàng)建的運(yùn)行總次數(shù)為44次，DOE設(shè)計(jì)非常高效，因?yàn)檎粚?shí)驗(yàn)的組合將需要125種方法（5個(gè)水平tG×5種pH×5種色譜柱）。

圖2. 篩選實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可接受性能區(qū)域（APR）的創(chuàng)建。*陰影區(qū)域表示pH和梯度時(shí)間組合未能達(dá)成性能目標(biāo)，達(dá)到或超過(guò)篩選性能目標(biāo)的區(qū)域是無(wú)陰影區(qū)，稱為可接受性能區(qū)域（APR）。

福莫特/羅布地奈德及有關(guān)物質(zhì)分析的最佳譜圖如下。但我們發(fā)現(xiàn)，福莫特羅的拖尾因子非常高，達(dá)到了2.10；布地奈德有關(guān)物質(zhì)未全部達(dá)到基線分離。因此，有必要實(shí)施第二次篩選實(shí)驗(yàn)，探討在不同色譜條件下能否獲得進(jìn)一步改善。

圖3. 福莫特/羅布地奈德及有關(guān)物質(zhì)分析譜圖。

繼續(xù)優(yōu)化色譜參數(shù)，以達(dá)到期望的性能。

• 篩選高pH值條件：6.7~10.7

• 固定色譜條件：色譜柱采用BEH C18、流動(dòng)相采用乙腈、運(yùn)行時(shí)間12 min（第一輪篩出的結(jié)果）

• 福莫特羅拖尾因子不超過(guò)1.2

• 至少4個(gè)峰得到基線分離

  

  圖4. 篩選實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可接受性能區(qū)域（APR）的創(chuàng)建。

本輪實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，使??pH流動(dòng)相時(shí)，福莫特羅的峰形得到了顯著改善。實(shí)現(xiàn)性能的最佳條件組合是：使用BEH C18色譜柱，pH為8.76，梯度時(shí)間12 min。

基于色譜條件系統(tǒng)化篩選得到的最佳實(shí)驗(yàn)條件，探討流速和溫度等其他固定參數(shù)對(duì)分離性能目標(biāo)的影響。

進(jìn)行多次驗(yàn)證分析，對(duì)Fusion QbD過(guò)得的結(jié)果與實(shí)際運(yùn)行的結(jié)果比較。結(jié)果表明，預(yù)測(cè)性能與實(shí)際性能吻合。

圖5. BOA條件下四次重復(fù)進(jìn)樣的色譜圖。

Fusion QbD是一款基于AQbD理念進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)的液相色譜方法的軟件，通過(guò)數(shù)學(xué)建模來(lái)識(shí)別最優(yōu)、最穩(wěn)健的方法。

使用Empower軟件，與Fusion QbD結(jié)合，可以快速高效的開(kāi)發(fā)穩(wěn)定且可重現(xiàn)的方法，從而提高方法驗(yàn)證和方法轉(zhuǎn)移的成功率。

S-Matrix和Fuison QbD是S-Matrix Corporation的商標(biāo)。