熒光顯微鏡濾光片波長與顏色的關(guān)系,熒光顯微鏡的熒光染料所需的激發(fā)光和釋放的熒光都是特定波長的,利用各種濾色片來選擇性的透過某種特定波長的光來實現(xiàn)熒光觀察。通過廣州明慧體視熒光激發(fā)模塊BGU-LED-ZMH的參數(shù)就可以大概清楚其中原理:
品名 | 紫外激發(fā)組 | 藍色激發(fā)組 | CFP激發(fā)組 | YFP激發(fā)組 | 綠色激發(fā)組 | TexasRed激發(fā)組 |
激發(fā)片 | 360/50nm | 475/35nm | 442/20nm | 490/20nm | 530/40nm | 560/30nm |
分光片 | 400nm | 500nm | 460nm | 510nm | 560nm | 590nm |
發(fā)射片 | 450/60nm | 530/50nm | 480/30nm | 530/25nm | 605/60nm | 630/70nm |
以轉(zhuǎn)基因生物觀察熒光光源為例,激發(fā)光源照射含綠色熒光蛋白(GFP)生物,可激發(fā)出綠色熒光,濾光鏡擋住所有反射光,只允許綠色熒光通過;激發(fā)光源激發(fā)紅色熒光時,用紅色濾光鏡觀測,可檢測含紅色熒光蛋白(DsRed)的生物。
熒光顯微鏡濾光片波長與顏色,可以根據(jù)實驗要求與目的,基本的條件就是根據(jù)所使用的熒光染料正確設(shè)置激發(fā)和發(fā)射波長。否則就會出現(xiàn)激發(fā)不了,或者激發(fā)了卻看不到或串色的現(xiàn)象。
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