- 2025-01-10 17:04:57實時能譜分析
- 實時能譜分析是一種先進的材料分析技術(shù),通過快速采集樣品發(fā)射或吸收的X射線能量分布,實現(xiàn)對樣品元素組成的實時監(jiān)測。它廣泛應(yīng)用于材料科學、地質(zhì)勘探、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域,具有分析速度快、靈敏度高、元素分辨率好等優(yōu)點。該技術(shù)能夠?qū)崟r反映樣品中元素的動態(tài)變化,為科研和工業(yè)生產(chǎn)提供有力的分析手段。
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實時能譜分析資訊
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實時能譜分析問答
- 2022-12-19 22:02:10課程回放 | 電鏡和能譜分析應(yīng)用中的部分問題解析
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- 2022-12-26 13:08:45課程回放 | 電鏡和能譜分析應(yīng)用中的部分問題解析(第二講)
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- 2023-01-12 17:17:57Ramina 應(yīng)用實例|實時監(jiān)測細胞培養(yǎng)性能測試
- 前言拉曼光譜在復(fù)雜水體系中反映組分微小變化的能力深化了該技術(shù)在生物制藥過程分析(如生物反應(yīng)器中的細胞生長)方面的應(yīng)用。拉曼光譜儀技術(shù)可以實時、原位和無損地監(jiān)測生物制藥生產(chǎn)過程,可用于復(fù)雜化學體系的連續(xù)過程監(jiān)測。拉曼光譜技術(shù)在生物反應(yīng)過程中可檢測大量代謝物變化的能力已將該技術(shù)提升為強大的過程分析工具。實驗概述拉曼光譜分析光學探頭具有可重復(fù)使用的特點,通過減少運行間的可變性來提高過程監(jiān)測的可重復(fù)性和可靠性。Thermo Scientific? Ramina? 過程分析儀可匹配多個光纖探頭。MarqMetrix 生物反應(yīng)器球形探頭是專為滿足生物工藝工業(yè)的要求而設(shè)計的,可以搭載到 Ramina 過程分析儀上使用。這些探頭具有快速、易于更換和連接以及耐用等特點,可以進行無菌處理,比如離線的高壓滅菌。DynaDrive 一次性生物反應(yīng)器(S.U.B.)是 S.U.B. 技術(shù)的最 新產(chǎn)品,為大規(guī)模生物生產(chǎn)提供了更好的性能,并具備可擴展性。與傳統(tǒng)的 S.U.B. 設(shè)計相比,長方體的罐體具有幾個關(guān)鍵優(yōu)勢,包括優(yōu)越的混合和傳質(zhì)能力以及更好的可擴展性。本應(yīng)用介紹了Ramina過程分析儀系統(tǒng)與 500L HyPerforma DynaDrive 生物反應(yīng)器的集成,并實現(xiàn)關(guān)鍵過程參數(shù)(CPPs)的在線測量,通過采集整個細胞生長培養(yǎng)過程中連續(xù)生成的光譜數(shù)據(jù)建立起若干參數(shù)和代謝物的精確預(yù)測模型。材料與方法細胞培養(yǎng)和喂養(yǎng)策略細胞培養(yǎng)在500L HyPerforma DynaDrive S.U.B 中進行(見下圖1),其中包含體積約為320L細胞培養(yǎng)基,在36.5℃,pH=6.9+/-0.3, DO=50%的條件下接種0.5x106個細胞/mL。體系的 pH 值通過添加二氧化碳氣體和碳酸鈉來控制。細胞在化學定義的培養(yǎng)基中生長,從第3天開始每天進行兩步喂養(yǎng)過程。第 一種喂養(yǎng)介質(zhì)以起始體積的重量為4%添加,第二種喂養(yǎng)介質(zhì)以0.4%添加。第6天體系溫度轉(zhuǎn)為33°C。試驗在14天后終止。生物反應(yīng)器避光處理以防止雜散光干擾。在高壓滅菌后,將 Ramina 過程分析儀生物反應(yīng)器球形探頭插入HyPerforma DynaDrive S.U.B. 中,進行在線實時拉曼光譜數(shù)據(jù)采集。圖1.500L Thermo Scientific HyPerforma DynaDrive S.U.B. 細胞培養(yǎng)罐Ramina 過程分析儀測試使用 Ramina 過程分析儀進行數(shù)據(jù)采集(見下圖2), Ramina 過程分析儀的生物反應(yīng)器球形探頭直接浸入在生物反應(yīng)器(500L) 中,每平均20次測量獲取一張拉曼光譜數(shù)據(jù),積分/曝光時間為3秒,激光功率設(shè)置為450mW。每個數(shù)據(jù)光譜的總采集時間為2分鐘,在 Ramina 過程分析儀用以建立模型數(shù)據(jù)與離線儀器分析通過匹配時間戳以確認。圖2.Thermo Scientific? Ramina? 在線拉曼分析儀化學計量學模型建立來自多臺 Ramina 過程分析儀、探頭和生物反應(yīng)器的數(shù)據(jù)被用于創(chuàng)建模型。訓練數(shù)據(jù)集從每個生物反應(yīng)器的45個樣本中收集,以創(chuàng)建每個化學計量學模型。對光譜數(shù)據(jù)進行了檢查,剔除了由宇宙射線引起的異常譜峰。選擇感興趣的光譜區(qū)域,并對光譜進行預(yù)處理,以去除基線干擾并優(yōu)化信噪比。建模過程中測試了許多預(yù)處理技術(shù),包括Savitzky Golay濾波、自動Whitaker平滑、多元散射校正、SNV和均值中心化。根據(jù)建模的關(guān)注點選擇優(yōu)化不同的預(yù)處理技術(shù)。為每個感興趣的組分創(chuàng)立偏最小二乘(PLS)模型并進行交叉驗證以測試每個模型的優(yōu)化的效果。這些組分包括葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺、谷氨酸、TCD、VCD和其他在生物反應(yīng)器培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的常見代謝物。結(jié)果在這項工作中,在線拉曼光譜儀應(yīng)用于連續(xù)分批補料 CHO 細胞培養(yǎng)過程。使用拉曼光譜監(jiān)測工藝參數(shù)首先需要使用外部校準數(shù)據(jù)集(獨立離線數(shù)據(jù))建立化學計量學模型,通過對感興趣的參數(shù)的離線分析數(shù)據(jù)和對應(yīng)的在線拉曼光譜數(shù)據(jù)的關(guān)聯(lián)關(guān)系建立模型。
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- 2022-06-06 14:14:13如何處理實時熒光定量PCR數(shù)據(jù)
- 實時熒光定量PCR數(shù)據(jù)中的基本概念:在整個擴增過程中會出現(xiàn)基線期,指數(shù)期,線性期和平臺期。其中在基線期和指數(shù)增長期,擴增產(chǎn)物都是以指數(shù)級增長,但是在基線期我們沒辦法檢測;而到了線性期和平臺期之后,由于不同基因,或者不同條件下其擴增效率差別很大,因此沒有辦法計算模板的含量。因此,在指數(shù)增長期的CT值就成了計算模板含量的關(guān)鍵值。▲ 圖一:線性圖譜▲ 圖二:對數(shù)圖譜為什么知道CT值就能夠得到最初的目標基因含量呢?如圖三,表示一個基因單次擴增曲線。N為擴增產(chǎn)物的分子數(shù),模板的分子數(shù)乘以1+擴增效率的n次方,n代表循環(huán)次數(shù)。也就是說,如果擴增效率為100%,產(chǎn)物的分子數(shù)就等于模板數(shù)乘以2的n次方。但是在線性增長期和平臺期,擴增效率不可能是100%,因此PCR理論方程只在指數(shù)期成立,也就是圖三綠色框的部分?!?圖三數(shù)據(jù)處理:以下三張圖分別表示我們在做熒光定量PCR時提到的三個名稱:擴增曲線、標準曲線、溶解曲線。1、juedui定量:使用一系列稀釋的已知濃度的標準品與未知樣本同時進行測定,根據(jù)系列濃度標準品的CT值與起始模板量之間的線性比例關(guān)系。注意事項:? 標準品必須來源可靠,濃度已知。? 標準品要和待測樣品同時在儀器中擴增。? 只能根據(jù)標準品覆蓋的濃度范圍進行待測樣本濃度的推測。2、相對定量:是用來確定經(jīng)過不同處理的樣品之間的表達差異或目標在不同時相差的表達差異,也就是倍數(shù)差異。Azure Cielo?實時熒光定量PCR系統(tǒng)來自美國Azure Biosystems公司,以創(chuàng)新服務(wù)于生命科學為愿景。Azure Cielo?實時熒光定量PCR系統(tǒng)融合了高品質(zhì)Peltier溫度模塊和基于光纖傳輸?shù)墓鈱W檢測系統(tǒng),為您的科學研究提供高精準、高靈敏的可靠結(jié)果。Azure Cielo 3/6檢測通道,可根據(jù)實驗需求靈活配置。同時配有10.3觸控系統(tǒng),主機本身可獨立運行、連接、遠程交互,讓您隨時隨地知悉實驗進程和及時獲得實驗結(jié)果。
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