- 2025-01-10 17:03:03高通量的分析技術
- 高通量的分析技術是一種能夠同時處理大量樣本并快速獲取數(shù)據(jù)的分析手段。它主要基于先進的儀器設備和自動化流程,實現(xiàn)樣本的高效處理和數(shù)據(jù)的精確分析。高通量分析技術廣泛應用于生物技術、分子生物學、藥物研發(fā)及臨床診斷等領域,具有處理速度快、數(shù)據(jù)準確度高、通量大等技術優(yōu)勢,為科學研究和技術開發(fā)提供了強有力的支持。
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高通量的分析技術問答
- 2023-03-07 22:09:15高通量單細胞力譜測定!多功能單細胞顯微操作技術助力單細胞力學研究
- 單程細胞具有復雜生物學性質(zhì),它們通過細胞外基質(zhì)ECM形成緊密的細胞與基質(zhì)細胞與細胞連接,諸如上皮細胞通過這種特殊的鏈接方式構(gòu)成了屏障層保護人體免受外界損傷。因此細胞之間以及細胞基底的粘附力測定對于研究細胞粘附蛋白的機制有著重要意義。使用力學工具測量細胞間以及細胞與基質(zhì)之間的粘附力始終不是一件容易的事情。首先,由于細胞與基質(zhì)的作用力僅為nN級別,因此需要力學精度較高的設備才能夠測量,而且在這其中較為適合的工具為原子力顯微鏡(AFM)。原子力顯微鏡能夠提供納米級別的操作精度并可測量從pN~nN范圍的力譜。但是受制于AFM探針本身的限制,需要借助修飾手段才能夠讓細胞與探針固定到一起,這個過程十分繁瑣,并且由于需要大量手工操作很難實現(xiàn)高通量的測量。而不同的細胞由于細胞異質(zhì)性使得要想確定粘附力需要較多樣本才能獲得相對準確的值,無法實現(xiàn)高通量測量直接限制了原子力探針在細胞粘附力上的應用。而多功能單細胞顯微操作FluidFM技術的出現(xiàn)改變了這一現(xiàn)狀,它使用特殊的中空探針能夠輕松地通過負壓抓取細胞,取得和AFM近似精度的數(shù)據(jù),無需在探針上進行任何修飾,不會改變細胞表面的任何通路,從而能夠得到接近細胞原生的數(shù)據(jù)。在實驗結(jié)束后能夠通過正壓快速丟棄用過的細胞,具備很高的自動化,能夠快速測量細胞粘附力。使用FluidFM對細胞操作的基本流程 FluidFM在粘附力測量上具備顯著優(yōu)勢。如圖所示,F(xiàn)luidFM能夠通過負壓將細胞吸附到原子力探針的末端,通過高精度位移臺的控制將細胞從基底上分離,并且同時記錄FD曲線。通過FD曲線能夠獲得最大粘附力Fmax和粘附能量Emax。通過高度自動化的控制系統(tǒng)能夠在短時間內(nèi)測量大量細胞粘附力,評估細胞群體分布以及細胞間差異,并且可有效避免傳統(tǒng)粘附力測量因準備時間過長而錯過最佳測量時間導致的細胞粘附力改變,得到更為精準的結(jié)果。近期,Agoston等人使用多功能單細胞顯微操作系統(tǒng)FluidFM實現(xiàn)了高通量細胞粘附力測量,對同種細胞不同區(qū)以及不同細胞之間的粘附力進行測量和比較。作者首先對Vero和Hela細胞在不同狀態(tài)下的粘附力進行了測量和比較,總共測量了214個細胞。通過比較明膠涂層上處于單個細胞、孤島狀細胞、致密連接細胞以及單層細胞上游離細胞之間的粘附力,能夠明顯觀測到Vero細胞處于致密連接的細胞粘附力最大,大概在750 nN左右,隨著細胞單細胞層的稀疏,細胞粘附力有所下降,而處于細胞層頂部的細胞粘附力最低僅為50 nN左右。這一點充分說明上皮細胞能夠在細胞之間形成緊密的連接,而處于細胞層外的細胞則幾乎沒有粘附力。而對于HeLa這樣的腫瘤細胞測量的結(jié)果卻顯示出了截然不同的結(jié)果,處于不同狀態(tài)的細胞有著近似的粘附力,基本都在200 nN左右,這與處于單個游離上皮細胞的粘附力十分接近,表明HeLa細胞在不同環(huán)境下仍然具有較高遷徙能力。使用FluidFM對不同區(qū)域細胞的FD曲線測定結(jié)果和對比 通過對這兩種細胞的最大粘附力、最大粘附能量、最大拉伸距離和細胞接觸面積進行統(tǒng)計分析可以發(fā)現(xiàn),HeLa腫瘤細胞在粘附力和粘附能量上均有所降低,但是當HeLa細胞形成了單層后,兩者區(qū)別不大。對比Hela和Vero在不同生長狀態(tài)下的最大粘附力、最大粘附能量、粘附拉伸距離和粘附面積。再進一步對Vero與HeLa細胞最大粘附力與距離和接觸面積進行對比,依然可以得到與單獨比較粘附力相同的結(jié)果,并且最大能量與細胞接觸面積的比值中也存在著類似的結(jié)果。由此可見腫瘤細胞通過降低自身粘附力從而獲得了更好的遷移能力。對不同狀態(tài)Vero和A549之間的粘附力/粘附距離、粘附力/粘附面積、粘附能量/粘附面積 總結(jié) 細胞粘附力測定在細胞生命科學研究中起著至關重要的作用,然而傳統(tǒng)手段中有著各種各樣的局限性,主要原因是缺乏一種有效抓取細胞并進行力學測定的手段?,F(xiàn)如今FluidFM技術在細胞粘附力測定中的應用,使得研究者們有了一種能夠有效、低損的方式抓取細胞,配合原子力顯微鏡精確測量的特性,真正意義上做到精準、無損、快速的測量單細胞粘附力,幫助研究者尋找細胞粘附力與細胞生命發(fā)展、腫瘤細胞轉(zhuǎn)移之間的關系。 【參考文獻】[1] A. Sancho, M. B. Taskin, L. Wistlich, P. Stahlhut, K. Wittmann, A. Rossi & J. Groll. Cell Adhesion Assessment Reveals a Higher Force per Contact Area on Fibrous Structures Compared to Flat Surfaces. ACS Biomater. Sci. Eng. 2022, 8, 2, 649–658.[2] P.W. Doll, K. Doll, A. Winkel, R. Thelen, R. Ahrens, M. Stiesch & A.E. Guber. Influence of the Available Surface Area and Cell Elasticity on Bacterial Adhesion Forces on Highly Ordered Silicon Nanopillars. ACS Omega. 2022, 7, 21, 17620–17631.[3] Sankaran, S. Jaatinen, L. Brinkmann, J. Zambelli, T. V?r?s, J. Jonkheijm, P. Cell adhesion on dynamic supramolecular surfaces probed by fluid force microscopy-based single-cell force spectroscopy. ACS Nano 2017, 11, 3867–3874.[4] Sancho, A. Vandersmissen, I. Craps, S. Luttun, A. Groll, J. A new strategy to measure intercellular adhesion forces in mature cell-cell contacts. Sci. Rep. 2017, 7, 46152.[5] Ines, Lüchtefeld. Alice, Bartolozzi. Julián M. M. Oana, Dobre. Michele, Basso. Tomaso, Zambelli. Massimo, Vassalli. Elasticity spectra as a tool to investigate actin cortex mechanics. J Nanobiotechnol. 2020, 18, 147.[6] Dehullu, J. Valotteau, C. Herman-Bausier, P. Garcia-Sherman, M. Mittelviefhaus, M. Vorholt, J. A. Lipke, P. N. Dufrene, Y. F. Fluidic force microscopy demonstrates that homophilic adhesion by Candida albicans Als proteins is mediated by amyloid bonds between cells. Nano Lett. 2019, 19, 3846–3853.[7] Mittelviefhaus, M. Müller, D. B. Zambelli, T. Vorholt, J. A. A modular atomic force microscopy approach reveals a large range of hydrophobic adhesion forces among bacterial members of the leaf microbiota. ISME J. 2019, 13, 1878–1882.[8] F. Weigl, C. Blum, A. Sancho & J. Groll. Correlative Analysis of Intra- versus Extracellular Cell Detachment Events vis the Alignment of Optical Imaging and Detachment Force Quantification. Adv. Mater. Technol. 2022, 2200195.【相關產(chǎn)品】 多功能單細胞顯微操作系統(tǒng)- FluidFM OMNIUM:http://m.sdczts.cn/zt2203/product_386418.html
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- 2023-02-24 11:28:18高通量、自動化單細胞力譜測定!多功能單細胞顯微操作全新技術助力單細胞力學研究
- 研究現(xiàn)狀單程細胞具有復雜生物學性質(zhì),它們通過細胞外基質(zhì)ECM形成緊密的細胞與基質(zhì)細胞與細胞連接,諸如上皮細胞通過這種特殊的鏈接方式構(gòu)成了屏障層保護人體免受外界損傷。因此細胞之間以及細胞基底的粘附力測定對于研究細胞粘附蛋白的機制有著重要意義。使用力學工具測量細胞間以及細胞與基質(zhì)之間的粘附力始終不是一件容易的事情。首先,由于細胞與基質(zhì)的作用力僅為nN級別,因此需要力學精度較高的設備才能夠測量,而且在這其中較為適合的工具為原子力顯微鏡(AFM)。原子力顯微鏡能夠提供納米級別的操作精度并可測量從pN~nN范圍的力譜。但是受制于AFM探針本身的限制,需要借助修飾手段才能夠讓細胞與探針固定到一起,這個過程十分繁瑣,并且由于需要大量手工操作很難實現(xiàn)高通量的測量。而不同的細胞由于細胞異質(zhì)性使得要想確定粘附力需要較多樣本才能獲得相對準確的值,無法實現(xiàn)高通量測量直接限制了原子力探針在細胞粘附力上的應用。多功能單細胞顯微操作FluidFM技術多功能單細胞顯微操作FluidFM技術的出現(xiàn)改變了這一現(xiàn)狀,它使用特殊的中空探針能夠輕松地通過負壓抓取細胞,取得和AFM近似精度的數(shù)據(jù),無需在探針上進行任何修飾,不會改變細胞表面的任何通路,從而能夠得到接近細胞原生的數(shù)據(jù)。在實驗結(jié)束后能夠通過正壓快速丟棄用過的細胞,具備很高的自動化,能夠快速測量細胞粘附力。使用FluidFM對細胞操作的基本流程FluidFM在粘附力測量上具備顯著優(yōu)勢。如圖所示,F(xiàn)luidFM能夠通過負壓將細胞吸附到原子力探針的末端,通過高精度位移臺的控制將細胞從基底上分離,并且同時記錄FD曲線。通過FD曲線能夠獲得最 大粘附力Fmax和粘附能量Emax。通過高度自動化的控制系統(tǒng)能夠在短時間內(nèi)測量大量細胞粘附力,評估細胞群體分布以及細胞間差異,并且可有效避免傳統(tǒng)粘附力測量因準備時間過長而錯過最 佳測量時間導致的細胞粘附力改變,得到更為精 準的結(jié)果。
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- 2023-03-13 13:22:47電子鼻結(jié)合電子舌技術對白酒大曲風味的分析
- “貴州大學釀酒與食品工程學院"利用日本INSENT電子舌、德國AIRSENSE電子鼻技術分析貴州仁懷地區(qū) 5 種醬香型白酒大曲的風味差異。對比 95 %乙醇溶液與去離子水萃取大曲滋味化合物發(fā)現(xiàn)95%乙醇溶液能萃取出更多大曲中與酸味、苦味相關的化合物,與酸味相關的化合物增加明顯;5 種酒曲除對CAO酸味傳感器的負響應值差異顯著(P<0.05)之外,風味輪廓基本相似;5 種大曲中與咸味、鮮味相關的化合物含量較高;5 種酒曲粉末與 95 %乙醇溶液萃取電子鼻分析結(jié)果顯示,除響應值高的氮氧化合物含量差異較大之外,其余傳感器對大曲響應的風味輪廓相似,且95 %乙醇溶液能萃取出大曲中更多的氮氧化合物、硫化物以及有機硫化物;5 種酒曲中 1 號、2號、3 號酒曲粉末氣味相似,1 號、3 號、4號、5 號酒曲 95 %乙醇提取液氣味相似。
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- 2023-02-02 15:00:12溫濕度試驗箱制冷循環(huán)終端技術簡要分析
- 對于- 40°C型號能夠選用單極·致冷循環(huán)系統(tǒng),,還可以選用復疊式致冷呼吸系統(tǒng),但單極·致冷循環(huán)系統(tǒng)是靠調(diào)小制冷壓縮機的空調(diào)膨脹閥打開度,減少冷媒總流量制人數(shù)來降低揮發(fā)工作壓力(約0.7個大氣壓力),進而得到更低的揮發(fā)溫度的,那樣的設計構(gòu)思要以系統(tǒng)軟件的空調(diào)制冷量來超過的(空調(diào)制冷約只能規(guī)范的0.7~0.8),造成致冷高效率低并增加了制冷壓縮機的負荷,并且易造成制冷壓縮機電磁線圈超溫,影響了制冷壓縮機的使用壽命。冷藏控制系統(tǒng)設計:獲得-20°C下列的超低溫時均選用復疊式致冷呼吸系統(tǒng)。為皓天環(huán)境試驗箱獲得超低溫而選用二級縮小復疊致冷循環(huán)系統(tǒng)的緣故:(1)單極縮小蒸汽致冷循環(huán)系統(tǒng)壓比的限定單極蒸汽縮小式制冷機組的最之低揮發(fā)溫度,關鍵在于它的冷疑工作壓力及壓縮比冷媒的冷疑工作壓力由冷媒的類型和自然環(huán)境物質(zhì)(如氣體或水)的溫度決策,在一般來說,它處在0.7~1.8Mpa范圍之內(nèi)壓縮比與冷疑工作壓力和揮發(fā)工作壓力相關,當冷疑工作壓力必須時,隨之揮發(fā)溫度的減少,揮發(fā)工作壓力也相對降低,因此使壓縮比升高,它將造成制冷壓縮機排氣管溫度的上升,潤滑脂變稀,使?jié)櫥瘶藴驶瘔?,比較嚴重時乃至會出現(xiàn)結(jié)炭和拉缸狀況;與此同時,壓縮比的擴大將造成制冷壓縮機的輸氣指數(shù)減少,空調(diào)制冷量降低,具體縮小全過程偏移等熵全過程越來越遠制冷壓縮機功率提升,致冷指數(shù)降低合理性減少將出現(xiàn)下列某些危害。a.一切冷媒,揮發(fā)溫度越低,則揮發(fā)工作壓力也越多低過低的揮發(fā)工作壓力,有時候?qū)е轮评鋲嚎s機無法呼吸,或是使外部的氣體進到制冷機組。b.當揮發(fā)溫度過低時,一些常見冷媒已達凝結(jié)溫度,沒法保持冷媒的流動性,循環(huán)系統(tǒng)。c.揮發(fā)工作壓力減少,冷媒的比體積擴大冷媒的質(zhì)量流量降低空調(diào)制冷量大大的降低以便得到需要空調(diào)制冷量務必擴大呼吸容量,使制冷壓縮機容積過度巨大。(2)冷媒熱物理學特點的限定。如今溫濕度試驗箱中單極·致冷循環(huán)系統(tǒng)大部分選用的中溫冷媒是R404A,在一個大氣壓下其揮發(fā)溫度是46.59C(R22/-40.7°C),但蒸發(fā)冷卻式冷卻器熱傳導溫度差一般取10°C上下(在強制性排風熱管散熱循環(huán)系統(tǒng)下空調(diào)蒸發(fā)器和內(nèi)箱的溫度差),就是箱里只有制得-36.5°C的超低溫?;蛟S,根據(jù)降低制冷壓縮機的揮發(fā)工作壓力,能夠?qū)404A冷媒的最之低揮發(fā)溫度減少到-50°C;因此要獲得- 50°C及下列的超低溫時務必選用中溫冷媒與超低溫冷媒復疊式的致冷循環(huán)系統(tǒng),制得-50°C ~ -80°C的超低溫,超低溫冷媒通常采用R23它在一個大氣壓下的揮發(fā)溫度是-81.7°C。(3)制冷壓縮機電磁線圈熱管散熱的限定單極制冷壓縮機工作中時,在做-35°C上下,由于制冷壓縮機的電磁線圈是旋空在制冷壓縮機正中間的,這就造成1個難題。-35°C時,制冷壓縮機的底壓是為負標值,也就是說造成了1個真空值,那樣電磁線圈的頂部發(fā)熱量就沒有方法消散,那樣就制冷壓縮機表層是非常涼,但是事實上內(nèi)部,他的溫度是很高的(由于真空泵是最之好的隔熱保溫物質(zhì))!在掌握完為皓天環(huán)境試驗箱的致冷循環(huán)系統(tǒng)技術性以后,在接下去,東莞皓天設備將會就高溫試驗箱、熱冷沖擊性環(huán)境試驗箱等環(huán)境試驗設備的有關技術性逐一開展新研發(fā),讓顧客朋友們把握各類技術性步聚,為更強的搞好各類試驗服務項目。
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- 2024-10-22 15:29:54色譜儀分析泵的作用,色譜儀分析泵的作用有哪些 ?
- 色譜儀作為一種廣泛應用于化學分析的儀器,其核心組件之一便是分析泵。色譜儀分析泵的主要作用是提供并維持高效的液體流動,使待測樣品得以在色譜柱中分離并檢測。本文將深入探討色譜儀分析泵的具體功能、分類以及其對色譜分析結(jié)果的影響。色譜儀分析泵的基本功能色譜儀分析泵的首要任務是確保流動相——通常是液體,能夠穩(wěn)定且精確地流經(jīng)色譜系統(tǒng)。流動相的速度和穩(wěn)定性對分離效果和分析精度有著直接影響。如果泵的輸出不穩(wěn)定,可能導致樣品在色譜柱中不能被有效分離,進而影響的分析結(jié)果。因此,分析泵必須具備高精度的流速控制能力,確保在各種條件下維持穩(wěn)定的流動相。分析泵還需在高壓下工作。液相色譜(HPLC)中的分析泵通常要產(chǎn)生數(shù)百甚至上千個大氣壓的壓力,以便推動流動相穿過色譜柱并完成復雜的化學分離。泵的耐壓能力直接關系到系統(tǒng)的工作效率和樣品的分離效果。色譜儀分析泵的分類色譜儀分析泵主要分為兩大類:恒流泵和梯度泵。恒流泵用于保持流動相的恒定流速,適用于簡單的單動相系統(tǒng)。而梯度泵則能在實驗過程中根據(jù)需求改變流動相的組成和比例,適用于復雜樣品的分離和分析。梯度泵通常在需要逐步改變?nèi)軇姸然驑O性時使用,這種操作能夠顯著提高分離的分辨率和效率。在選擇色譜儀分析泵時,用戶需要根據(jù)分析的具體需求進行選擇。例如,恒流泵適用于大多數(shù)標準分析應用,而梯度泵則更適合復雜樣品或需要高分辨率的場合。現(xiàn)代分析泵還具有可編程功能,能夠根據(jù)預設的條件實現(xiàn)自動化操作,極大地提高了實驗的效率和準確性。色譜儀分析泵對色譜分離的影響分析泵的性能直接影響色譜分離的結(jié)果。泵的流速穩(wěn)定性是確保分離效果的關鍵因素之一。如果流速不穩(wěn),色譜柱內(nèi)的流動相速度會發(fā)生變化,導致樣品組分不能按預期的方式分離。這不僅會導致峰形不良,還可能導致峰重疊或拖尾現(xiàn)象,從而影響數(shù)據(jù)的準確性和可重復性。色譜儀分析泵的維護與保養(yǎng)為了確保分析泵的長期穩(wěn)定運行,定期的維護和保養(yǎng)是不可忽視的。常見的維護措施包括檢查并更換泵的密封件、柱塞和單向閥等關鍵部件。這些部件的磨損可能導致流動相泄漏或泵壓不穩(wěn),從而影響實驗結(jié)果。保持分析泵的清潔也十分重要,尤其是在分析復雜樣品時,應定期清洗泵頭及管路,防止流動相中的雜質(zhì)積累,導致流量不暢。
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