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2025-01-10 10:50:40細(xì)胞代謝檢測儀器: 細(xì)胞代謝檢測儀器是專門用于監(jiān)測和分析細(xì)胞代謝活動的設(shè)備。它能夠測量細(xì)胞在特定條件下的氧氣消耗率、二氧化碳產(chǎn)生率及酸堿度變化等關(guān)鍵參數(shù)，從而評估細(xì)胞的代謝狀態(tài)。這些儀器廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選及細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域，對于理解細(xì)胞功能、疾病機(jī)制及藥物作用機(jī)制具有重要意義。

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細(xì)胞代謝檢測儀器問答

2024-10-31 11:22:21中壓制備色譜儀用什么檢測儀器，中壓制備色譜儀用什么檢測儀器好: 中壓制備色譜儀是一種在化學(xué)、生物制藥等領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用的分離設(shè)備，主要用于從混合物中高效分離和純化目標(biāo)物質(zhì)。為了確保分離過程的準(zhǔn)確性與效率，檢測儀器在色譜系統(tǒng)中起到了關(guān)鍵作用。本文將深入分析在中壓制備色譜儀中常用的檢測儀器類型及其適用場景，幫助用戶選擇合適的檢測方案，從而優(yōu)化實驗結(jié)果。一、紫外-可見光檢測器（UV-Vis）紫外-可見光檢測器是中壓制備色譜系統(tǒng)中常見的檢測器之一，特別適用于檢測具有紫外吸收特性的化合物，如芳香族化合物或含共軛雙鍵的分子。UV-Vis檢測器不僅靈敏度高，而且結(jié)構(gòu)簡單，易于操作。它通常支持多波長檢測，能夠在制備過程中實時監(jiān)控不同化合物的分離情況。用戶可以通過選擇特定波長，針對目標(biāo)物質(zhì)實現(xiàn)高效分離。二、示差折光檢測器（RID）對于沒有明顯紫外吸收特性的化合物，如糖類、多糖及某些脂質(zhì)，示差折光檢測器（RID）是理想選擇。RID通過檢測樣品和流動相的折光指數(shù)差異實現(xiàn)檢測。這種檢測器雖然靈敏度相對UV-Vis較低，但在非吸光性化合物的分析中表現(xiàn)出色。其應(yīng)用領(lǐng)域包括食品分析及多糖純化過程。由于RID對流動相成分的變化較為敏感。三、蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）適用于檢測難以用UV-Vis和RID監(jiān)測的化合物，如脂類、聚合物和部分碳水化合物。其工作原理是將樣品中的流動相蒸發(fā)，然后通過光散射檢測樣品殘留的非揮發(fā)性物質(zhì)。ELSD具備較寬的檢測范圍，且對大多數(shù)化合物表現(xiàn)出良好的通用性，因此在天然產(chǎn)物的分離和藥物分析領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。不過，ELSD的操作要求較高，需優(yōu)化氣流、溫度等參數(shù)才能獲得理想的檢測效果。四、質(zhì)譜檢測器（MS）質(zhì)譜檢測器（MS）是一種靈敏度極高的檢測工具，能夠提供目標(biāo)分子的分子量及結(jié)構(gòu)信息。在復(fù)雜樣品的分離過程中，MS可結(jié)合色譜儀用于追蹤目標(biāo)化合物并進(jìn)行定性和定量分析。雖然MS的操作較為復(fù)雜，且需要專業(yè)人員維護(hù)，但其強(qiáng)大的檢測能力使其在高端制藥和科學(xué)研究領(lǐng)域中得到了廣泛使用。質(zhì)譜檢測器還可用于鑒定未知物質(zhì)，在分離純化中的應(yīng)用前景十分廣闊。五、熒光檢測器（FLD）熒光檢測器（FLD）利用熒光分子在特定波長下發(fā)射熒光信號的特性進(jìn)行檢測。這類檢測器的靈敏度極高，適用于檢測微量且具有熒光特性的化合物，如多環(huán)芳烴或蛋白質(zhì)標(biāo)記物。FLD檢測范圍的限制較大，但在環(huán)境監(jiān)測、食品分析及生物制藥領(lǐng)域中，對于某些特殊化合物的檢測不可或缺。

2022-12-06 13:14:13應(yīng)用簡報：直接測量細(xì)胞代謝以識別線粒體藥物靶點: 前言藥物靶點識別在藥物發(fā)現(xiàn)價值鏈中起到關(guān)鍵作用。藥物開發(fā)的關(guān)鍵步驟是識別潛在候選藥物的直接靶點并區(qū)分任何繼發(fā)或脫靶效應(yīng)。藥物靶點識別的方法之一是表型篩選，涉及向細(xì)胞（或較小的模型生物）中添加化合物并測量對目標(biāo)表型或細(xì)胞活性的影響1。對于對表型或細(xì)胞功能具有所期望的影響的化合物，必須識別活性化合物直接擾亂的基因或基因產(chǎn)物（即，靶點）。因此，藥物開發(fā)的關(guān)鍵步驟是識別活性化合物的直接靶點以及該化合物可能影響進(jìn)一步開發(fā)的任何繼發(fā)或脫靶效應(yīng)。圖 1. 按年份繪制的 PubMed 中包括關(guān)鍵詞“線粒體”、“藥物”和“靶點”的出版物的數(shù)量近年來，已經(jīng)確定線粒體和細(xì)胞代謝過程除具有眾所周知的底物氧化和 ATP 生成作用以外，還是細(xì)胞分化、細(xì)胞增殖、免疫細(xì)胞應(yīng)答、缺氧感受和細(xì)胞凋亡的核心2-4。實際上，線粒體和代謝功能障礙越來越多地與眾多病理聯(lián)系在一起，其中包括癌癥、免疫細(xì)胞和系統(tǒng)疾病、神經(jīng)退化、心臟病、肥胖和糖尿病以及衰老過程5-7。于是，人們對線粒體和代謝藥物靶點的關(guān)注大幅增加（圖 1）。因此，相應(yīng)地需要對代謝通路功能進(jìn)行高靈敏度直接測量，以闡明潛在候選藥物的特異性（及任何可能的非特異性）靶點。安捷倫 Seahorse XF Pro 分析儀以多孔板形式直接測量活細(xì)胞中的線粒體呼吸和細(xì)胞代謝。因此，該系統(tǒng)是用于檢測以線粒體和其他代謝通路（如糖酵解）為靶標(biāo)的藥物的功能效應(yīng)的理想選擇。本應(yīng)用簡報提供了可用于代謝靶點識別研究的Seahorse XF 應(yīng)用和工作流程的總體概述。未來，本系列應(yīng)用簡報將探討如何使用這些分析來闡明藥物化合物的特異性和非特異性靶點的有趣案例。用于線粒體和代謝藥物靶點識別的 Seahorse XF 工作流程本工作流程分為一系列分析，旨在解答以下主要問題：1. 化合物是否影響線粒體或代謝功能？2. 化合物的特異性靶點是什么？3. 是否存在任何非特異性或脫靶效應(yīng)？對于在表型篩選中表現(xiàn)為有效的化合物（例如，藥物 X），執(zhí)行安捷倫 Seahorse XF 細(xì)胞線粒體壓力測試 (MST) 以確定化合物是否影響線粒體功能8, 9。該分析通過測定耗氧率（圖 2，左圖），對線粒體呼吸的幾個關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行了檢測。其中發(fā)生變化的參數(shù)（以及變化幅度）提供了有關(guān)化合物是否改變線粒體功能的信息10, 11。該分析的結(jié)果還可以確定后續(xù)最適合采用哪種類型的 XF 分析設(shè)計來采集更具體的信息（包括藥物靶點識別）。例如對于藥物 X，該工作流程將應(yīng)用于眾所周知的線粒體丙酮酸載體抑制劑 UK509910。圖 2（右圖）顯示了在缺乏和存在 UK5099 時的 MST 結(jié)果。數(shù)據(jù)表明，UK5099 確實影響線粒體功能，表現(xiàn)在基礎(chǔ)呼吸速率和最大呼吸速率均有所下降。藥物 X 是否影響線粒體功能？圖 2. 左圖：安捷倫 Seahorse XF 細(xì)胞線粒體壓力測試分析設(shè)計和輸出參數(shù)；右圖：用 UK5099 對細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理后的 MST接下來，必須考慮代謝的哪些部分可能會驅(qū)動這種變化。UK5099 的 MST 圖譜表明，在底物氧化和/或電子傳遞鏈/氧化磷酸化通路中發(fā)生了功能障礙11。這些通路包括底物轉(zhuǎn)運(yùn)和速率控制蛋白質(zhì)和酶的活性，包括谷氨酰胺酶、CPT1a、丙酮酸脫氫酶 (PDH)、TCA 循環(huán)酶、電子傳遞和氧化磷酸化機(jī)制。為確定 UK5099 的效果，使用安捷倫 Seahorse XF 細(xì)胞膜通透劑 (PMP)。細(xì)胞膜透化使得提供的底物可直接進(jìn)入線粒體中，而無須將線粒體與細(xì)胞物理分離10, 12, 13。由于不同的可氧化底物參與不同的代謝通路，因此提供了特定底物的透性化細(xì)胞的呼吸速率可用于識別靶點，這些靶點在受到調(diào)節(jié)后引起可在完整細(xì)胞中觀察到的線粒體呼吸變化。圖 3 簡單概述了丙酮酸、谷氨酸和琥珀酸的底物依賴性通路，更多信息參見參考文獻(xiàn)10 的圖 S3。因此，工作流程中的下一步 XF 分析是在存在和缺乏候選藥物UK5099 的情況下將這三種底物分別提供給透性化細(xì)胞。如圖 4 所示，UK5099 僅在丙酮酸作為底物時阻止呼吸；向各種類型的透性化細(xì)胞（HskMM、NRVM 和原代皮層神經(jīng)元）提供谷氨酸或琥珀酸時無效?？偠灾@些結(jié)果表明：呼吸復(fù)合物 I 和復(fù)合物 II 都不是 UK5099 的靶點，并且 UK5099 對呼吸的抑制必定位于復(fù)合物 I 和 TCA 循環(huán)的上游，因為谷氨酸（復(fù)合物 I 底物）或琥珀酸（TCA/復(fù)合物 II 底物）氧化都不受影響。此外，這些結(jié)果還表明丙酮酸脫氫酶 (PDH) 或線粒體丙酮酸載體 (MPC) 可能是 UK5099 的靶點。然后可以進(jìn)一步分析透性化細(xì)胞和替代底物以區(qū)分 PDH 和 MPC，如同證明 MPC 是 UK5099 的特異性靶點一樣10。圖 3. 丙酮酸、谷氨酸和琥珀酸線粒體氧化通路的簡單示意圖。復(fù)合物 I 和復(fù)合物 II 底物和通路分別顯示為紅色和藍(lán)色。請注意：丙酮酸和谷氨酸都提供 NADH 給 CI，而琥珀酸提供FADH2 給 CII。MPC：線粒體丙酮酸載體；PDH：丙酮酸脫氫酶。為清楚起見，省略了復(fù)合物 V 及其他氧化磷酸化組分圖 4. 提供丙酮酸 (Pyr)/蘋果酸、谷氨酸 (Glu)/蘋果酸或琥珀酸 (Succ)/魚藤酮作為唯一底物的透化性細(xì)胞的呼吸；UK5099 僅抑制丙酮酸驅(qū)動的呼吸。HSkMM：人骨骼肌成肌細(xì)胞；NRVM：新生大鼠心室肌細(xì)胞；皮層神經(jīng)元：大鼠原代皮層神經(jīng)元。摘自參考文獻(xiàn) 11總結(jié)我們對代謝作用的理解已經(jīng)從簡單的“管家”演變?yōu)樵S多正常和疾病狀態(tài)的核心參與者。在活細(xì)胞中檢測化合物對線粒體功能和代謝表型的影響，提供了一條識別代謝調(diào)節(jié)靶點的通路。此方法補(bǔ)充了其他方法，例如以信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和細(xì)胞受體為靶標(biāo)的方法。除 ETC 和氧化磷酸化以外，本文所概述的示例強(qiáng)調(diào)了考慮多條線粒體通路（包括底物轉(zhuǎn)運(yùn)和線粒體酶活性）的重要性。通過將線粒體和代謝功能的直接基于細(xì)胞的測量結(jié)合到藥物靶點識別研究中，可以獲得有關(guān)化合物的特異性和非特異性效應(yīng)的重要見解。參考文獻(xiàn)1. Schenone, M., et al., Target identification and mechanism of action in chemical biology and drug discovery. Nature chemical biology, 2013. 9(4): p. 232–2402. Dimeloe, S., et al., T-cell metabolism governing activation,proliferation and differentiation; a modular view.Immunology, 2017. 150(1): p. 35–443. Ochocki, J.D. and M.C. Simon, Nutrient-sensing pathways and metabolic regulation in stem cells. The Journal of Cell Biology, 2013. 203(1): p. 23–334. Smith, R.A., et al., Mitochondrial pharmacology. TrendsPharmacological Sciences, 2012. 33(6): p. 341–525. Galluzzi, L., et al., Metabolic targets for cancer therapy.Nature Reviews Drug Discovery, 2013. 12: p. 8296. Lee, J., Mitochondrial drug targets in neurodegenerative diseases. Bioorg Med Chem Lett, 2016. 26(3): p. 714-7207. Wang, W., G. Karamanlidis, and R. Tian, Novel targets for mitochondrial medicine.Science Translational Medicine,2016. 8(326): p. 326rv38. 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Murphy, Measuring Mitochondrial Function in Permeabilized Cells Using the Seahorse XF Analyzer or a Clark-Type Oxygen Electrode.Current protocols in toxicology, 2014.60: p. 25.2.1–25.2.16

2022-11-15 20:34:18安捷倫Seahorse XF Pro創(chuàng)新引領(lǐng)活細(xì)胞代謝分析平臺: 能量代謝在多種細(xì)胞和生理過程中發(fā)揮著核心作用。細(xì)胞中能量代謝的運(yùn)作方式不僅可以作為細(xì)胞健康的關(guān)鍵指標(biāo)，也可用于有效預(yù)測細(xì)胞命運(yùn)、功能和適應(yīng)性。實時監(jiān)測這些信息可提供關(guān)于激活、增殖、分化和細(xì)胞死亡過程的深入見解，推動科學(xué)研究并助力治療藥物研發(fā)。安捷倫 Seahorse XF Pro 細(xì)胞能量代謝分析儀擁有更高的靈敏度和數(shù)據(jù)一致性、直觀的自定義工作流程方案、先進(jìn)的實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析工具，讓活細(xì)胞生物能量代謝的實時測量和數(shù)據(jù)解析變得更加簡單易行，即使新手也能輕松掌握?；罴?xì)胞功能代謝分析的廣泛應(yīng)用適用于表征體外疾病模型、識別新的藥物靶標(biāo)、驗證靶標(biāo)對細(xì)胞功能的影響、評估藥物安全性以及測量 T 細(xì)胞療法抗腫瘤潛力的相關(guān)參數(shù)。藥物發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)/驗證新的治療靶標(biāo)確保細(xì)胞模型具有所需的代謝程序識別線粒體毒性，降低藥物研發(fā)管線的風(fēng)險掃碼了解更多免疫學(xué)探索細(xì)胞命運(yùn)的驅(qū)動因素實時監(jiān)測/調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞活化通過靶向代謝通路改善免疫療法的設(shè)計和性能掃碼了解更多癌癥生物學(xué)研究癌細(xì)胞如何進(jìn)行代謝重編程以支持快速生長研究營養(yǎng)物質(zhì)對癌細(xì)胞生長的影響揭示腫瘤微環(huán)境如何影響代謝干細(xì)胞生物學(xué)探索驅(qū)動干細(xì)胞多能性和分化的能量代謝程序調(diào)節(jié)培養(yǎng)基條件以獲得所需表型掃碼了解更多深入了解XF技術(shù)工作原理安捷倫 Seahorse XF Pro 分析儀利用 96 孔板形式的免標(biāo)記固態(tài)探針板，同步測定活細(xì)胞中兩種主要能量代謝途徑（線粒體呼吸和糖酵解）的活性。它提供可在系統(tǒng)水平了解培養(yǎng)細(xì)胞和體外樣品的細(xì)胞代謝功能的測量。XF Pro 分析儀適用于大多數(shù)細(xì)胞類型，包括原代細(xì)胞、貼壁細(xì)胞系和懸浮細(xì)胞。先進(jìn)的實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析先進(jìn)的 XF 軟件和數(shù)據(jù)分析平臺，提供簡單直觀的實驗設(shè)置和數(shù)據(jù)分析體驗，將自動化數(shù)字成像和歸一化系統(tǒng)與Seahorse XF 分析無縫集成，輕松獲得更一致、更易于解析的結(jié)果，使用明場成像檢查 XF 分析前后的細(xì)胞培養(yǎng)完整性/健康狀況，提高數(shù)據(jù)質(zhì)量和可解讀性。量身定制的 Wave Pro Controller 軟件包括預(yù)加載模板、高級模板導(dǎo)入功能、劑量反應(yīng)分析設(shè)置功能?；诰W(wǎng)頁的 Seahorse Analytics 提供獨(dú)有的前沿數(shù)據(jù)分析功能，允許定制分析視圖/報告，從而快速將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為有用見解，或?qū)?shù)據(jù)導(dǎo)出至 GraphPad Prism 和 Microsoft Excel 等第三方繪圖和統(tǒng)計軟件。細(xì)胞分析網(wǎng)絡(luò)研討會系列查看我們的細(xì)胞分析網(wǎng)絡(luò)研討會系列，我們提供了各種網(wǎng)絡(luò)研討會，您可以按需觀看。在本系列網(wǎng)絡(luò)研討會中，我們邀請了研究人員分享他們使用 Seahorse XF 技術(shù)取得的研究成果。了解其他研究人員如何使用實時代謝測量來推進(jìn)他們的研究。細(xì)胞分析出版物數(shù)據(jù)庫訪問安捷倫細(xì)胞分析出版物數(shù)據(jù)庫，其中包含 6800 多篇精選的安捷倫 Seahorse XF 同行評審出版物。利用出版物數(shù)據(jù)庫搜索過濾器，按研究領(lǐng)域、細(xì)胞系、細(xì)胞類型、作者、分析類型或分析儀查詢 Seahorse XF 出版物，找到與您的研究相關(guān)的出版物。僅供科研使用，不用于臨床診斷用途。

2022-11-15 20:32:31安捷倫Seahorse XF Pro創(chuàng)新引領(lǐng)活細(xì)胞代謝分析平臺: 能量代謝在多種細(xì)胞和生理過程中發(fā)揮著核心作用。細(xì)胞中能量代謝的運(yùn)作方式不僅可以作為細(xì)胞健康的關(guān)鍵指標(biāo)，也可用于有效預(yù)測細(xì)胞命運(yùn)、功能和適應(yīng)性。實時監(jiān)測這些信息可提供關(guān)于激活、增殖、分化和細(xì)胞死亡過程的深入見解，推動科學(xué)研究并助力治療藥物研發(fā)。安捷倫 Seahorse XF Pro 細(xì)胞能量代謝分析儀擁有更高的靈敏度和數(shù)據(jù)一致性、直觀的自定義工作流程方案、先進(jìn)的實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析工具，讓活細(xì)胞生物能量代謝的實時測量和數(shù)據(jù)解析變得更加簡單易行，即使新手也能輕松掌握。活細(xì)胞功能代謝分析的廣泛應(yīng)用適用于表征體外疾病模型、識別新的藥物靶標(biāo)、驗證靶標(biāo)對細(xì)胞功能的影響、評估藥物安全性以及測量 T 細(xì)胞療法抗腫瘤潛力的相關(guān)參數(shù)。藥物發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)/驗證新的治療靶標(biāo)確保細(xì)胞模型具有所需的代謝程序識別線粒體毒性，降低藥物研發(fā)管線的風(fēng)險掃碼了解更多免疫學(xué)探索細(xì)胞命運(yùn)的驅(qū)動因素實時監(jiān)測/調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞活化通過靶向代謝通路改善免疫療法的設(shè)計和性能掃碼了解更多癌癥生物學(xué)研究癌細(xì)胞如何進(jìn)行代謝重編程以支持快速生長研究營養(yǎng)物質(zhì)對癌細(xì)胞生長的影響揭示腫瘤微環(huán)境如何影響代謝干細(xì)胞生物學(xué)探索驅(qū)動干細(xì)胞多能性和分化的能量代謝程序調(diào)節(jié)培養(yǎng)基條件以獲得所需表型掃碼了解更多深入了解XF技術(shù)工作原理安捷倫 Seahorse XF Pro 分析儀利用 96 孔板形式的免標(biāo)記固態(tài)探針板，同步測定活細(xì)胞中兩種主要能量代謝途徑（線粒體呼吸和糖酵解）的活性。它提供可在系統(tǒng)水平了解培養(yǎng)細(xì)胞和體外樣品的細(xì)胞代謝功能的測量。XF Pro 分析儀適用于大多數(shù)細(xì)胞類型，包括原代細(xì)胞、貼壁細(xì)胞系和懸浮細(xì)胞。先進(jìn)的實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析先進(jìn)的 XF 軟件和數(shù)據(jù)分析平臺，提供簡單直觀的實驗設(shè)置和數(shù)據(jù)分析體驗，將自動化數(shù)字成像和歸一化系統(tǒng)與Seahorse XF 分析無縫集成，輕松獲得更一致、更易于解析的結(jié)果，使用明場成像檢查 XF 分析前后的細(xì)胞培養(yǎng)完整性/健康狀況，提高數(shù)據(jù)質(zhì)量和可解讀性。量身定制的 Wave Pro Controller 軟件包括預(yù)加載模板、高級模板導(dǎo)入功能、劑量反應(yīng)分析設(shè)置功能?；诰W(wǎng)頁的 Seahorse Analytics 提供獨(dú)有的前沿數(shù)據(jù)分析功能，允許定制分析視圖/報告，從而快速將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為有用見解，或?qū)?shù)據(jù)導(dǎo)出至 GraphPad Prism 和 Microsoft Excel 等第三方繪圖和統(tǒng)計軟件。細(xì)胞分析網(wǎng)絡(luò)研討會系列查看我們的細(xì)胞分析網(wǎng)絡(luò)研討會系列，我們提供了各種網(wǎng)絡(luò)研討會，您可以按需觀看。在本系列網(wǎng)絡(luò)研討會中，我們邀請了研究人員分享他們使用 Seahorse XF 技術(shù)取得的研究成果。了解其他研究人員如何使用實時代謝測量來推進(jìn)他們的研究。細(xì)胞分析出版物數(shù)據(jù)庫訪問安捷倫細(xì)胞分析出版物數(shù)據(jù)庫，其中包含 6800 多篇精選的安捷倫 Seahorse XF 同行評審出版物。利用出版物數(shù)據(jù)庫搜索過濾器，按研究領(lǐng)域、細(xì)胞系、細(xì)胞類型、作者、分析類型或分析儀查詢 Seahorse XF 出版物，找到與您的研究相關(guān)的出版物。僅供科研使用，不用于臨床診斷用途。