毛細(xì)管電泳儀通過彈性石英毛細(xì)管作為分離通道,通過高壓直流電場(chǎng)作為驅(qū)動(dòng)力,以樣品中各組分的淌度(單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的遷移速度)和分配行為的差異為根據(jù),從而使分離各組分得以實(shí)現(xiàn)。下面就讓小編帶你了解一下毛細(xì)管電泳儀的工作流程和注意事項(xiàng)。
工作流程
在毛細(xì)管柱充滿緩沖液→進(jìn)樣端換上,樣品池進(jìn)樣→各組分因淌度和分配差異而使分離實(shí)現(xiàn)→紫外或激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器→數(shù)據(jù)記錄與處理系統(tǒng)→色譜圖

注意事項(xiàng)
對(duì)CE 系統(tǒng)進(jìn)行搭建時(shí),需要仔細(xì)考慮以下幾個(gè)關(guān)鍵部位。
1. 毛細(xì)管及其溫控系統(tǒng):
CE 分析實(shí)驗(yàn)過程中,焦耳熱效應(yīng)應(yīng)當(dāng)使分離效率有所降低并且在一定程度上對(duì)分析結(jié)果的重復(fù)性造成影響。所以需要將一個(gè)溫度可調(diào)的恒溫環(huán)境設(shè)計(jì)出來來對(duì)焦耳熱效應(yīng)進(jìn)行降低同時(shí)對(duì)毛細(xì)管分離結(jié)果受到外界溫度變化的影響加以規(guī)避。比較常用的是風(fēng)冷和液冷兩種溫控方式。風(fēng)冷控溫的實(shí)現(xiàn)方式是對(duì)空氣對(duì)流進(jìn)行控制,然而沒有取得比較好的結(jié)果。液冷控溫是在恒溫液體中放置毛細(xì)管,通常介質(zhì)是用水進(jìn)行冷卻,由專門的制冷系統(tǒng)進(jìn)行冷卻或恒溫并經(jīng)由流路進(jìn)行循環(huán)。有比較良好的效果,所以這種溫控方式較為常用。
2. 檢測(cè)系統(tǒng):
CE 應(yīng)用Z為廣泛的是紫外檢測(cè)器。其采用柱上檢測(cè)方式,有著比較簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu),能夠非常方便地進(jìn)行操作,在使用之前,需要在適當(dāng)位置剝離毛細(xì)管外壁涂層的彈性保護(hù)層聚酰亞胺膜,使得透明部分對(duì)準(zhǔn)光路。涂層剝離可以通過灼燒、硫酸腐蝕或者刀片刮除等方式來實(shí)現(xiàn)。
3.進(jìn)樣系統(tǒng):
流體動(dòng)力學(xué)進(jìn)樣和電遷移進(jìn)樣為比較常用的方式。動(dòng)力和計(jì)時(shí)控制部件、毛細(xì)管和樣品瓶及緩沖液瓶的位置變換控制部件等均為該進(jìn)樣系統(tǒng)的組分。
4. 毛細(xì)管清洗裝置和緩沖液填充系統(tǒng):
酸堿活化毛細(xì)管能夠使 CE分離結(jié)果得到保證。除此之外,必須的步驟是對(duì)緩沖液進(jìn)行填充。通常采用正壓或負(fù)壓來實(shí)現(xiàn)毛細(xì)管清洗或緩沖液填灌。要求系統(tǒng)具有一定的密閉性。商品化的儀器壓力控制機(jī)構(gòu)一般為毛細(xì)管清洗過程與進(jìn)樣過程所共享。然而分鐘為計(jì)時(shí)單位,影響進(jìn)樣精度。
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