厭氧菌與人類及動物的生命密切相關，隨著醫(yī)學及生物技術的發(fā)展，人類對厭氧菌的研究越來越廣泛，由于厭氧菌的厭氧特性，其培養(yǎng)必須在無氧條件下進行，用厭氧培養(yǎng)法進行厭氧菌的培養(yǎng)很簡便、實用，是醫(yī)院、工廠、教育及科研領域培養(yǎng)、檢驗、研究厭氧菌的重要手段。

常見的厭氧培養(yǎng)裝置

　　近年關于厭氧菌培養(yǎng)技術和方法獲得驚人的發(fā)展，使厭氧菌的培養(yǎng)技術日趨完善。厭氧培養(yǎng)技術可分為一般厭氧技術和嚴格厭氧技術，一般厭氧技術又可分為厭氧袋法和厭氧罐法，嚴格厭氧技術是指厭氧箱法。

　　1、厭氧袋

　　國外商品名為“Bio-Bag”為一透明、不透氣的塑料袋，內配有產(chǎn)氣、催化、厭氧度指示及吸濕四個系統(tǒng)，可在1.5h內建立厭氧條件，并能保持一周。

　　2、厭氧罐

　　厭氧罐培養(yǎng)技術自1916年問世以來，大體經(jīng)歷了一個簡便化、GX化安全化、規(guī)?；蜕唐坊难葑冞^程。使厭氧罐達到無氧狀態(tài)有多種方法，例如，用抽氣換氣法以氮或二氧化碳驅除罐內氧氣。

　　3、厭氧培養(yǎng)箱

　　我國八十年代曾由陳聰敏教授等人開發(fā)厭氧手套箱和義烏生產(chǎn)的抽氣換氣厭氧培養(yǎng)裝置，但終因造價較高，厭氧性能稍遜而未獲得全國的推廣和使用，現(xiàn)在國內有單位在霍爾碼(forma)厭氧手套箱開發(fā)原理基礎上，開發(fā)研制出小型簡易的厭氧手套培養(yǎng)箱，立足于我國的國情，裝置造價低廉，操作使用簡單容易。

厭氧培養(yǎng)裝置的原理及使用

　　1、厭氧袋的原理及使用

　　根據(jù)氫“燃燒”除氧的原理所設計的一種簡易厭氧袋，不但適用于培養(yǎng)各種臨床標本中的厭氧菌，也適合培養(yǎng)其他專性厭氧菌。

　　厭氧袋除氧的主要原理是：①利用氫硼化鈉或氫硼化鉀與水反應產(chǎn)生氫，氫與密封袋中的氧氣在鈀催化下結合成水，從而建立起無氧小環(huán)境。②厭氧袋中二氧化碳由檸檬酸生成，利用美藍的變色反應作為厭氧度的指示劑。厭氧環(huán)境無氧指示劑呈無色，有氧則變?yōu)樗{色。

　　厭氧袋結構：

　　①塑料袋：用電熱法燙制的無毒復合透明薄膜塑料袋(14*32cm)：

　?、诋a(chǎn)氣系統(tǒng)：取直徑1.0cm，長16cm左右的無毒塑料軟管1根，用電熱法封其一端。將NaBH₄ 0.2g和NaHCO₃ 0.2g(按袋體積500mL計算)用擦鏡紙包成小包，塞入軟管底部，其上塞少量脫脂棉花。再將內含5%的檸檬酸溶液1.5mL的安瓶管裝入塑料管，然后加上一個有缺口的泡沫塑料小塞即成：

　?、蹍捬醵戎甘竟苤甘鞠到y(tǒng)：取直徑1cm，長8cm無毒透明塑料軟管1根。將內含1mL美藍指標劑的安瓶裝人軟管，在其上下口都先塞入少量脫脂棉花，再加泡沫塑料軟塞即成;

　?、艽呋瘎┐呋到y(tǒng)：取市售鈀粒(A型)5-10粒，經(jīng)加熱活化后裝入帶有孔的小塑料硬管內即可;

　?、菸鼭駝┌鼭裣到y(tǒng)：取變色硅膠少許，用濾紙包成小包就可以。

　　使用時放入已接種好的平板后，盡量擠出袋內空氣，然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管，后折斷美蘭指示劑管，使袋內在半小時內造成無氣環(huán)境，如不變化表示袋內已達厭氧狀態(tài)。

　　2、厭氧罐的原理及使用

　　厭氧罐，罐體為聚碳酸酯材料制成，透明度好，配有硅橡膠密封圈，以保證密封。罐內分有三個空間，可分別放置培養(yǎng)皿、脫氧劑和指示劑。

　　(1)罐體：常見的規(guī)格是內徑為15cm，高25cm的圓筒形罐休，其內可放直徑9cm培養(yǎng)皿10只;在蓋的下方ZY，旋連著一個金屬絲網(wǎng)盒，用于存放活化的鈀粒。

　　(2)H₂和CO₂的供應：厭氧罐供氫和CO₂有內源法和外源法兩種。內源法相似于厭氧袋。外源法抽氣換氣程序為：抽氣一換氣一再抽氣一充N₂-CO₂充H₂。

　　(3)催化劑目前一般均用常溫下即可起催化的“冷式”催化劑，如“鈀?！?、“鈀條”等，它是由含鈀的石棉等填充料加工而成的。每次使用前，把催化劑在140-160攝氏度烘箱內烘2h活化;

　　(4)厭氧指示劑：目前常用的仍是化學法，尤其是利用美藍，也有用刃天青作為指標劑。

　　3、厭氧培養(yǎng)箱的原理及使用

　　厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境下進行細菌培養(yǎng)及操作的專用裝置，可培養(yǎng)Z難生長的厭氧生物，又能避免以往厭氧生物在大氣中的操作時接觸氧而死亡的危險性嘲。

　　結構特點：該產(chǎn)品由培養(yǎng)操作室、取樣室、氣路及電路控制系統(tǒng)、熔蠟消毒器等部分組成。溫控系統(tǒng)采用高精度數(shù)顯式控溫儀，能準確直觀的反映箱內實際溫度，加上有效的限溫保護裝置，安全可靠。箱內裝有紫外線殺菌燈，氣體經(jīng)過過濾后進入箱內，可有效避免細菌污染。歧路裝置可任意調節(jié)流量，能任意輸入各種氣體。操作室均由不銹鋼板制成。其前窗采用透明耐沖壓特種玻璃制成。操作使用專用手套，可靠、舒適、靈活、使用方便。操作室內配有特殊接種棒滅菌器，熔蠟消毒裝置，還裝有除氧催化器。

　　操作方法：操作者將手伸入操作室，關緊操作室與取樣室的封閉門。打開取樣室的封閉門，將培養(yǎng)皿放入取樣室，關緊取樣室封閉門。將培養(yǎng)皿放入操作室內培養(yǎng)箱，操作室與取樣室間的封閉門虛掩。調溫，使操作室內培養(yǎng)箱溫度達到所需溫度。充入氮氣和混合氣各三次以上。檢察操作系統(tǒng)。

　　注意事項：禁止在真空狀態(tài)下打開艙門、手套口壓蓋或進行拆卸檢修。內置電源為220V、50Hz、1KW。手套應先于或同時于箱體抽真空，后于或同時于箱體停止抽真空。外接氣源管件應適配、接插應密封牢靠，充氣時不宜超過零壓即1個大氣壓。

　　4、其他厭氧培養(yǎng)裝置及厭氧培養(yǎng)方法

　　厭氧缸：接種好標本的平板或液體培養(yǎng)基試管，可放入?yún)捬醺變扰囵B(yǎng)，厭氧缸是普通的干燥缸，用物理化學的方法使缸內造成厭氧環(huán)境，從而將厭氧菌培養(yǎng)出來。

　　厭氧盒：原理同厭氧袋，有成品銷售。

　　生物耗氧法：在一密閉的容器內放以生物(多是植物)，消耗氧氣，同時產(chǎn)生二氧化碳，供細菌生長用。

　　焦性末食子酸法：在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙，均勻撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO₃粉末或NaOH溶液，迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面，用融化的自蠟封邊，造成一個封閉空間。

厭氧培養(yǎng)裝置的應用

　　目前實驗室應用較多的為百寶牌Bb03-A型2.4升厭氧菌培養(yǎng)罐，SHELLAB厭氧箱及YQX厭氧培養(yǎng)箱。隨著厭氧菌等相關研究領域的發(fā)展，厭氧裝置是高等院校、科研單位、企業(yè)實驗室開展科學實驗理想的厭氧裝置，將會更廣泛的應用于生化、冶金、電子、化工、地質、礦產(chǎn)、醫(yī)藥等部門。