拉曼光譜儀是基于拉曼散射效應(yīng)，對與入射光頻率不同的散射光譜進(jìn)行分析以得到分子振動、轉(zhuǎn)動方面信息，并應(yīng)用于分子結(jié)構(gòu)研究的一種分析儀器。由于很多用戶對拉曼光譜儀相關(guān)基礎(chǔ)較弱，在使用過程中總會遇到一些問題。

一、為什么得到的光譜中總是有隨機(jī)的、尖銳的譜線?

　　這些拉曼光譜儀譜線一般被認(rèn)為是宇宙射線。宇宙中的高能粒子輻照在CCD探測器上會導(dǎo)致電子的產(chǎn)生進(jìn)而被相機(jī)解釋為光的信號。宇宙射線在時間和產(chǎn)生的光譜位移上完全是隨機(jī)的，它們有很大的強(qiáng)度、類似發(fā)射譜線、半高寬較小(<1.5m-1)。為確認(rèn)宇宙射線的存在，你可馬上重新掃描光譜會發(fā)現(xiàn)峰的消失。如果譜線依然存在，則很有可能是室內(nèi)光線的干擾。

　　宇宙射線隨著掃描曝光時間的增加出現(xiàn)的概率會增加，因此當(dāng)拉曼光譜儀長時間掃描一個光譜時，必須避免宇宙射線在光譜中的出現(xiàn)，這可以通過軟件中宇宙射線去除能完成。這是一些軟件中包含的實驗設(shè)置功能，當(dāng)使用時，將在同一樣品位置掃描三次(相當(dāng)于積分三次)，軟件將比較這三次掃描獲得的光譜并去除沒有在所有光譜中出現(xiàn)的尖銳峰。

二、總是在測試時得到一些位置重復(fù)的、尖銳的譜峰，為什么?

　　當(dāng)拉曼光譜儀在重復(fù)測試一個樣品時發(fā)現(xiàn)有一些尖銳譜線在相同的位置重復(fù)出現(xiàn)時，可以排除它們是宇宙射線的可能(因宇宙射線的位置足隨機(jī)的)。這些重復(fù)的尖銳譜線通常來自日光燈的發(fā)射或CRT顯示器的磷光發(fā)射，尤其當(dāng)用長工作距離的物鏡時問題更嚴(yán)重。它們也可能來自氣體激光器發(fā)射的等離子線，需仔細(xì)鑒別。

　　拉曼光譜儀中的熒光干擾來自于汞的發(fā)射，可以將室內(nèi)的日光燈關(guān)閉或在較暗的白熾燈下工作。拉曼光譜儀室內(nèi)應(yīng)盡可能暗。簡單的做法是將拉曼光譜儀室裝飾成暗房樣式，以避免任何來自所謂白光發(fā)射的無數(shù)反常規(guī)的發(fā)射譜線。

　　磷光線的干擾主要是CRT顯示器上所鍍磷光物質(zhì)引起。如發(fā)現(xiàn)此種情況，可將CRT顯示器關(guān)掉或?qū)晒馄恋牧炼日{(diào)暗。需要牢記的是：這些發(fā)射譜線的波數(shù)值永遠(yuǎn)是在同一個坐標(biāo)值上，當(dāng)轉(zhuǎn)換不同波長激光激發(fā)時它們在拉曼譜上的位置是隨著移動和改變的。

　　當(dāng)上述方法都不能解決問題，而拉曼光譜儀正在使用514nm激光進(jìn)行激發(fā)時，檢查等離子線濾光片是否已經(jīng)插上。在其它激光配置系統(tǒng)中，要么不需要檢查，要么激光器上已經(jīng)包含了濾光片。

三、為什么測試時一些光譜給出十分強(qiáng)的背景信號，而這些信號湮蓋了拉曼信號?

　　一些發(fā)熒光或磷光的樣品在測量時會給出非常高的背景光譜。令人遺憾的是這些是樣品材料的本征性質(zhì)，是激光輻照下無法避免的結(jié)果，而且通常情況下熒光比拉曼信號更強(qiáng)。盡管這樣，我們可采取一些措施減少或減輕熒光副作用。

　　猝滅：一些樣品可在測試前將激光輻照在表面一段時間對熒光進(jìn)行猝滅以減小熒光光譜的背景增強(qiáng)拉曼信號。猝滅的時間根據(jù)樣品不同可從幾分鐘到幾小時。值得注意的是：猝滅效應(yīng)是呈指數(shù)衰減的，一開始就可觀察到。

　　共焦模式：采用共焦模式測量強(qiáng)光下輻照的小體積樣品時熒光將會大大降低。該法也同樣適合有熒光襯底的樣品，例如被熒光物質(zhì)基體包裹的樣品。

　　改變激發(fā)激光的波長：有時改變波長是Z可行的避免熒光干擾的方法。對用可見光激發(fā)的系統(tǒng)，熒光都是一個頭痛的事情，將拉曼光譜儀激發(fā)波長移至紫外或近紅外區(qū)域很可能解決或減少此類問題。

　　如果拉曼光譜儀實驗室里有太多的室內(nèi)光源比如熒光、白熾燈或日光燈等，這會在測試光譜上出現(xiàn)不必要的背景信號。因此在測試的時候應(yīng)將室內(nèi)光關(guān)閉或降到小或用遮光罩將樣品臺罩住以避免外界的雜散光進(jìn)入拉曼光譜儀。

四、為什么將測試樣品放置不同取向時得到的拉曼譜圖不相同?

　　這是因為拉曼光譜儀入射激光照射在樣品表面不同晶面取向上引起的。采用四分之一波片對激光進(jìn)行擾偏可幫助去除方向效應(yīng)。一般可向拉曼光譜儀儀器公司或其它提供光學(xué)元件的公司購買四分之一波片。

五、測試時放到了玻璃片上測出來的結(jié)果是玻璃的光譜。如何用拉曼光譜儀測透明的有機(jī)物液體?

　　1、可能是玻璃管被污染的厲害;

　　2、測出的玻璃的信號，可能焦點位置不對;

　　3、可能是聚焦位置不對，聚在玻璃上了;

　　4、用凹面載玻片，液體量會比較多，然后用顯微鏡聚焦好就可以了，如果液體有揮發(fā)性，好液體上用蓋玻片，然后焦點聚焦到蓋玻片以下。

　　5、如果還不行，可以查一下“液芯光纖”。