流式細(xì)胞儀（Flow cytometer ）是對細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量，并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細(xì)胞亞群從中分選出來。下面就讓小編帶你了解一下完整的流式實(shí)驗(yàn)是怎樣的。

一、處理樣品

1.制作單細(xì)胞懸液

濃度在5*10的五次方和10的六次方/ml。

外周血、骨sui、培養(yǎng)細(xì)胞、組織經(jīng)過尼龍網(wǎng)300目過濾制成細(xì)胞懸液。

2.挑選適合的熒光染料進(jìn)行染色

流式細(xì)胞儀上的激光器必須能夠激發(fā)此熒光染料。

激發(fā)的光譜必須能夠被儀器上的濾光片所接受。

應(yīng)該盡量減少熒光素光譜的重疊。

二、確定儀器的條件

1.電壓

在液流中，粒子通過激光束時(shí)產(chǎn)生光信號，光信號通過光電探測器轉(zhuǎn)換成電壓。信號隨著電壓的改變而變化。

BD流式細(xì)胞儀有光電二極管和光電倍增管兩種類型的光電探測器。

2.閾值

信號放大過程中會(huì)產(chǎn)生不需要的脈沖信號，可以設(shè)定某一信號的Zdi強(qiáng)度值來去除不需要的脈沖信號。設(shè)定的值被稱為閾值。

3.熒光補(bǔ)償

熒光補(bǔ)償是采用適合的方法校正熒光染料間疊加產(chǎn)生的誤差。

補(bǔ)償調(diào)整實(shí)驗(yàn)過程

1）樣品準(zhǔn)備

陰性樣本，單陽性樣本。

2）調(diào)整

diyi步：陰性樣本調(diào)整所有的PMT。單陽性樣本調(diào)整補(bǔ)償。

3）判斷標(biāo)準(zhǔn)

數(shù)據(jù)分析

1）設(shè)門

設(shè)門就是選定要分析的目標(biāo)細(xì)胞

2）設(shè)定陰性和陽性群體的界限

3）確定陽性和陰性的細(xì)胞群體

4）統(tǒng)計(jì)陽性或陰性細(xì)胞群體的百分率，平均熒光值，數(shù)或抗原子結(jié)合數(shù)。

流式檢測結(jié)果的表示

1.百分率

2.計(jì)數(shù)

3.平均熒光強(qiáng)度

4.直方圖和散點(diǎn)圖