流式細(xì)胞儀(Flow cytometer )是對細(xì)胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細(xì)胞亞群從中分選出來。下面讓小編帶你簡單了解一下流式細(xì)胞儀的技術(shù)參數(shù)和應(yīng)用。
技術(shù)參數(shù)
指標(biāo)
為了表征儀器性能,往往根據(jù)使用目的和要求而提出幾個技術(shù)參數(shù)或指標(biāo)來定量說明。對于流式細(xì)胞儀常用的技術(shù)指標(biāo)有熒光分辨率、熒光靈敏度、適用樣品濃度、分選純度、可分析測量參數(shù)等。

熒光分辨率
強度一定的熒光在測量時是在一定道址上的一個正態(tài)分布的峰,熒光分辨率是指兩相鄰的峰可分辨的Z小間隔。通常用變異系數(shù)(C.V值)來表示。C.V的定義式為:
C.V=σ/μ
式中,σ為標(biāo)準(zhǔn)偏差,μ是平均值。
在實際應(yīng)用中,我們使用挖關(guān)系式σ=0.423FWHM;其中FWHM為峰在峰高一半處的峰寬值?,F(xiàn)在市場上儀器的熒光分辨率均優(yōu)于2.0%。
熒光靈敏度
反映儀器所能探測的Z小熒光光強的大小。一般用熒光微球上所標(biāo)可測出的FITC(fluorescein isothiocyanate 異硫氰基熒光素)的Z少分子數(shù)來表示。現(xiàn)在市場使用儀器均可達到1000左右。
分析速度/分選速度
儀器每秒種可分析/分選的數(shù)目。一般分析速度為5000~10000;分選速度掌握在1000以下。
樣品濃度
主要給出儀器工作時樣品濃度的適用范圍。一般在1010細(xì)胞/ml的數(shù)量級。
其它技術(shù)參數(shù)尚多,不再一一介紹。
應(yīng)用
1.分析細(xì)胞表面標(biāo)志
2.分析細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)
3.分析細(xì)胞受體
4.分析腫瘤細(xì)胞的DNA、RNA含量
5.分析免疫細(xì)胞的功能
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