細(xì)胞破碎儀是利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)容物成分釋放出來(lái)的儀器。細(xì)胞破碎儀優(yōu)點(diǎn)是保持細(xì)胞活性,省時(shí),樣品損失少,可以處理大量樣品。因此細(xì)胞破碎儀的不斷發(fā)展和改進(jìn),對(duì)實(shí)驗(yàn)生產(chǎn)的貢獻(xiàn)是十分可觀的。
破碎細(xì)胞的目的是使細(xì)胞壁和細(xì)胞膜受到不同程度的破壞(增大滲透性)或破碎、釋放其中的目標(biāo)產(chǎn)物,主要采用的方法有機(jī)械法和非機(jī)械法兩大類。
機(jī)械破碎處理量大,破碎速度較快,時(shí)間短,效率較高,是工業(yè)規(guī)模細(xì)胞破碎的重要手段,細(xì)胞受到擠壓,剪切和撞擊作用,易被破碎在許多情況下,細(xì)胞內(nèi)含物全部釋放出來(lái),由于機(jī)械攪拌產(chǎn)生熱量,破碎要采用冷卻措施,機(jī)械破碎主要的方法有珠磨法、高壓勻漿法、撞擊破碎法和超聲波等方法。

在生物產(chǎn)物的分離提取中,如果目標(biāo)物質(zhì)為胞外產(chǎn)物(如霉菌產(chǎn)生的糖化酶等),其提取過(guò)程較簡(jiǎn)單,只需直接進(jìn)行固液分離,獲得澄清的濾液,再進(jìn)行分離純化操作;如果目標(biāo)物質(zhì)為胞內(nèi)產(chǎn)物或多細(xì)胞生物組織中的各種生物分子(如堿性磷酸酶等胞內(nèi)酶、部分外源基因表達(dá)產(chǎn)業(yè)或植物細(xì)胞產(chǎn)物等),都需要事先將細(xì)胞或組織破碎,使目標(biāo)物質(zhì)充分釋放到溶液中而且不失去生物活性。
不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織,其細(xì)胞破碎的難易程序不一,細(xì)胞破碎儀使用的方法也不相同,如動(dòng)物臟器的細(xì)胞膜較脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有較堅(jiān)固的纖維素,半纖維素組成的細(xì)胞壁,要采取專門的細(xì)胞破碎方法。
根據(jù)細(xì)胞破碎儀所應(yīng)用的原理,可分為超聲波法細(xì)胞破碎儀、高壓勻漿法細(xì)胞破碎儀、高速珠磨法細(xì)胞破碎儀。
1、超聲波細(xì)胞破碎儀
超聲波細(xì)胞破碎儀就是將電能通過(guò)換能器轉(zhuǎn)換為聲能,這種能量通過(guò)液體介質(zhì)而變成一個(gè)個(gè)密集的小氣泡,這些小氣泡迅速炸裂,產(chǎn)生的大量的能量,從而起到破碎細(xì)胞等物質(zhì)的作用。
2、高壓勻漿細(xì)胞破碎儀
高壓勻漿細(xì)胞破碎儀可大規(guī)模破碎細(xì)胞,高壓勻漿器由高壓泵和勻漿閥組成,它是利用高壓迫使懸浮液通過(guò)針形閥,由于突然簡(jiǎn)壓和高速?zèng)_擊撞擊造成細(xì)胞破裂,在高壓勻漿器中,細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切、碰撞和由高壓到常壓的突變,從而造成細(xì)胞壁的破壞,細(xì)胞膜隨之破裂,胞內(nèi)產(chǎn)物得到釋放。

3、高速珠磨法細(xì)胞破碎儀
其利用固體間研磨剪切力和撞擊使細(xì)胞破碎。珠磨機(jī)的主體一般是立式或臥式圓筒形腔體。磨腔內(nèi)裝鋼珠或小玻璃珠以提高碾磨能力,一般,臥式珠磨破碎效率比立式高,因?yàn)榱⑹綑C(jī)向上流動(dòng)的液體在某種程度上會(huì)使研磨珠流態(tài)化,影響其研磨效率。
珠磨法破碎細(xì)胞分為間歇或連續(xù)操作。珠磨法操作的有效能利用率僅為1%左右,破碎過(guò)程會(huì)產(chǎn)生大量熱能,所以要考慮換熱問(wèn)題。珠磨的細(xì)胞破碎效率隨細(xì)胞種類而異,適用于絕大多真菌菌絲和藻類等微生物細(xì)胞的破碎。與高壓勻漿細(xì)胞破碎儀相比,影響破碎率的操作參數(shù)較多,操作過(guò)程的優(yōu)化設(shè)計(jì)較復(fù)雜。
細(xì)胞破碎儀具有破碎組織、細(xì)菌、病毒、孢子及其它細(xì)胞結(jié)構(gòu),勻質(zhì)、乳化、混合、脫氣、崩解和分散、浸出和提取,加速反映等功能,所以細(xì)胞破碎儀廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、化學(xué)、制藥、食品、化妝品、環(huán)保等實(shí)驗(yàn)室研究及企業(yè)生產(chǎn)。
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