對(duì)氨基酸進(jìn)行重復(fù)添加的過(guò)程，稱為多肽合成。通常由C端（羧基端）向N端（氨基端）合成，為固相合成順序。從前，在溶液中進(jìn)行多肽合成，叫做液相合成法。

自從1963年，固相多肽合成方法被Merrifield創(chuàng)立成功以來(lái)，通過(guò)不斷的完善與改進(jìn)，目前為止，在多肽與蛋白質(zhì)合成中，固相法已經(jīng)成為了一個(gè)常用的技術(shù)，其克服了經(jīng)典液相合成法的缺點(diǎn)，使得每步產(chǎn)品提純的難度大大地得到減輕。

固相多肽合成的步驟：

1.樹脂的選擇及氨基酸的固定

聚乙烯一乙二醇脂、聚酰胺以及交聯(lián)聚苯乙烯這三類樹脂主要用來(lái)作為多肽合成的高分子的載體。通過(guò)保護(hù)的氨基酸的羧基同樹脂的反應(yīng)基團(tuán)之間形成共價(jià)鍵來(lái)來(lái)使氨基酸的固定得以實(shí)現(xiàn)。

2.氨基、羧基、側(cè)鏈的保護(hù)及脫除

需要保護(hù)暫不參與形成酰胺鍵的氨基和羧基，以便使具有特定的氨基酸順序的多肽成功合成，同時(shí)也需要保護(hù)氨基酸側(cè)鏈上的活性基團(tuán)，當(dāng)完成反應(yīng)后，再去除保護(hù)基團(tuán)。

這些年以來(lái)，F(xiàn)MOC合成法的應(yīng)用相當(dāng)?shù)膹V泛。一般使用形成酯基的方法來(lái)保護(hù)羧基。逐步合成中保護(hù)羧基的常用方法為甲酯和乙酯。

3.成肽反應(yīng)

固相中的成肽反應(yīng)通常是在溶液內(nèi)放入一個(gè)氨基被保護(hù)的氨基酸以及一個(gè)羧基被保護(hù)的氨基酸，需要將酰胺鍵生成，不形成肽鍵，活化活化變成混合酸酐、活潑酯、酰氯或用強(qiáng)的縮合劑(如碳二亞氨)形成對(duì)稱酸酐等方法來(lái)使酰胺鍵形成為常用的手段。

4.裂解及合成肽鏈的純化

裂解和脫側(cè)鏈保護(hù)基，F(xiàn)MOC法直接用TFA，而BOC法用TFA+H。有些時(shí)候，由于不同的條件，也會(huì)采用其它堿、光解、氟離子和氫解等脫保護(hù)方法。一般采用GX液相色譜、親和層析、毛細(xì)管電泳等進(jìn)一步的精制、分離與純化合成肽鏈。