細胞融合作為一種實驗方法,在單克隆抗體的制備,膜蛋白的研究方面,應(yīng)用非常廣泛。
融合過程
有內(nèi)外兩層細胞膜,細胞融合首先在外層發(fā)生,然后再到內(nèi)層,所以,就會有兩種融合通道出現(xiàn),通過這兩種通道轉(zhuǎn)移細胞體內(nèi)物質(zhì)。病毒膜與目標細胞融合時,僅僅有一種融合通道出現(xiàn),也就是說,在目標細胞中不能夠找到引起融合的基因,僅僅可以在病毒中找到造成融合的基因。然而通過EFF-1發(fā)生的細胞融合卻是一個雙向融合過程,在兩個相互融合的細胞中需要EFF-1出現(xiàn)才行。
研究進展
1838年,脊椎動物腫瘤細胞可以在體內(nèi)自發(fā)地融合,從而使得多核的腫瘤細胞產(chǎn)生被Muller觀察到。
1858年,腫瘤組織、正常組織與發(fā)炎組織中的多核細胞現(xiàn)象由Virchow描述了。

1873年,多核的血細胞也會存在于天花病人的血液中的現(xiàn)象被Luginbuhl觀察到。
1875年,脊椎動物(蛙類)的血液細胞發(fā)生融合的過程首次由Lange觀察到。
細胞在無脊椎動物中合并的現(xiàn)象分別被Cienkawski在1876年,Buck在1877年,Geddes在1880年發(fā)現(xiàn)了。
1958年,仙臺病毒會對動物細胞融合產(chǎn)生觸發(fā)的效應(yīng)被日本學(xué)者岡田(Okada)發(fā)現(xiàn)了。
1974年,聚乙二醇(PEG)化學(xué)融合法被華裔加拿大學(xué)者高國楠創(chuàng)立了。
1975年,小鼠B-淋巴細胞和骨sui瘤細胞由Kohler和Milstein成功地融合了,并且使得能分泌穩(wěn)定單克隆抗體的雜交瘤細胞產(chǎn)生了。
20世紀80年代,電融合技術(shù)出現(xiàn)了。
植物或者微生物原生質(zhì)體的制備
有一層堅韌的細胞壁位于植物和許多微生物細胞,如果想要對這樣的細胞促使融合,那么單個細胞就必須先得到。想要獲得植物原生質(zhì)體或微生物原生質(zhì)球,則必須將細胞壁除去。所以植物和微生物細胞的融合通常又叫做原生質(zhì)體融合。
動物單個細胞的獲得
1、組織的獲得
2、組織的消化
方法的選擇
細胞融合按照對象不同,方法和條件也會出現(xiàn)差異。
微生物細胞融合:僅有PEG法適合。
植物細胞融合:電融合法以及PEG法比較常用。
誘導(dǎo)動物細胞融合:電融合法、PEG法以及仙臺病毒HVJ誘導(dǎo)均比較適合。
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