腦立體定位儀是腦固定裝置,是神經(jīng)解剖、神經(jīng)生理、神經(jīng)藥理和神經(jīng)外科等領(lǐng)域內(nèi)的重要研究設(shè)備。腦立體定位儀被廣泛的運(yùn)用于腦的損毀、刺激和腦電記錄的精確定位中,成為研究腦結(jié)構(gòu)和功能必不可少的工具。
腦立體定位儀經(jīng)過(guò)搬動(dòng)或長(zhǎng)期不用后,使用前需先加以校驗(yàn)。ZD是檢驗(yàn)電極移動(dòng)架各滑尺是否保持直角,可用三角板測(cè)定各滑尺所成的角度是否是直角;各銜接部與螺絲有沒(méi)有松動(dòng);滑尺是否太松;檢查主框兩臂的平行情況;Z后觀察固定頭的裝置兩側(cè)對(duì)稱(chēng)程度,小框是否與主框平行。

檢查腦立體定位儀無(wú)故障后,可進(jìn)行下列校驗(yàn)性操作:
1、將兩側(cè)耳桿柱旋松,在主框上前后滑動(dòng),然后再按照原規(guī)定刻度裝好,看兩側(cè)耳桿尖是否完全對(duì)正。
2、取下一側(cè)耳桿,將一側(cè)電極移動(dòng)架裝好,前后左右上下移動(dòng)各滑尺,使裝在電極夾上的金屬定位針尖正對(duì)耳桿尖的ZX,記下各滑尺的刻度讀數(shù),再卸下移動(dòng)架再裝上,并按上法測(cè)定耳桿尖的部位,記下三個(gè)滑尺的讀數(shù),反復(fù)操作取平均數(shù)首先將放置水平的腦立體定位儀上的兩個(gè)滑道,按實(shí)驗(yàn)的要求調(diào)節(jié)好合適的高度后。
3、然后再用水平尺調(diào)正好兩個(gè)滑道的前后、左右水平。這時(shí)再把安置在滑道上的手動(dòng)微推進(jìn)器按上面的刻度調(diào)節(jié)垂直。
確定腦立體定位零點(diǎn),小鼠腦定位的系統(tǒng)大致分兩種:
1、用耳間線ZX定位,首先將兩個(gè)耳棒在腦立體定位儀滑道中間部位彼此相接觸(兩個(gè)耳棒讀數(shù)相同),旋緊鏍絲。
2、取下一側(cè)耳棒,另一耳棒不動(dòng)。調(diào)節(jié)移動(dòng)推進(jìn)器,使校驗(yàn)電極與耳棒的ZX點(diǎn)相觸,即為A點(diǎn)(即耳間線ZX點(diǎn)),并記下刻度值。
3、將推進(jìn)器水平移動(dòng)到門(mén)齒鉤的上方,將門(mén)齒鉤平面與校驗(yàn)電極相觸。這時(shí)就定出外耳道ZX點(diǎn)與門(mén)齒牙板上面上沿之間的水平切面0點(diǎn),記為H0。這時(shí),動(dòng)物的前囟和后囟基本處在一個(gè)水平面上,相差0-0.1mm。另外,規(guī)定耳間線ZX點(diǎn)以上為+,向下為-;向嘴側(cè)為+,向尾側(cè)為-。
4、用顱骨標(biāo)志定位(常用前囟),即以前囟為嘴尾側(cè)0點(diǎn),由前囟向嘴側(cè)為+,向尾側(cè)為-,其它與上面定位方法相同。
1、動(dòng)物麻醉:小鼠,體重20-30g,稱(chēng)重后以0.4% 戊 巴 比 妥 納 麻醉注射,注射時(shí)必須緩慢,隨時(shí)注意動(dòng)物狀態(tài)。
2、小鼠頭部固定:將小鼠的門(mén)齒固定于腦立體定位儀上頜固定器,然后把一側(cè)的耳捧推入動(dòng)物的外道后,使動(dòng)物的頭在處于兩滑道正中。再將另一耳捧推入另一側(cè)的外耳道。這時(shí)觀察兩個(gè)耳棒的刻度一致后,將兩耳棒上的固定螺絲扭緊,在將牙齒固定器上壓鼻環(huán)壓下后扭緊(鼻環(huán)、耳棒的松緊度調(diào)節(jié)適宜為好),這時(shí)從各個(gè)方向推壓動(dòng)物頭部均不會(huì)出現(xiàn)移動(dòng)。
3、開(kāi)顱鉆孔前的備皮:剪去動(dòng)物頭部毛,用2%碘酒及75%酒精棉球作頭部皮膚的消毒,沿矢狀縫作-3cm長(zhǎng)的皮膚切口,分離皮下組織,用雙氧水清潔顱骨表面的筋膜及肌肉并剝離,推開(kāi)骨膜,暴露前囟、人字縫及矢狀縫。

4、確定標(biāo)準(zhǔn)中線:將金屬定位針向下移動(dòng)到矢狀縫上方后,再前后移動(dòng)定位針,使定位針定位到前囟。
5、小鼠定位:用定位針在前囟后2mm,矢狀縫旁開(kāi)2.5mm處定位一點(diǎn),即為小鼠的平面位置,然后在此點(diǎn)上用鉆孔針在顱骨上鉆一小圓孔。
6、注射藥物:小鼠位于該圓孔下2mm,將1ml注射器吸入藥物安置到微操作儀上,操作儀器使注射器針頭由小鼠腦鉆孔處下降2mm時(shí)完成藥物注射到小鼠腦海馬處。
7、制作腦組織切片:將小鼠腦制作成切片,顯微觀察小鼠腦中紅染料位置來(lái)驗(yàn)證小鼠腦海馬中是否定位準(zhǔn)確。
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