尿液分析儀是用干化學方法檢測尿中某些化學成分的自動化儀器,是臨床實驗室尿液自動化檢查的重要工具。尿液分析儀可在一張試紙條上將尿液中許多的化學成分測定出來,具有操作方便、測定迅速、結(jié)果準確等優(yōu)點。
1、尿酸堿度
尿液分析儀的尿pH檢查的原理是采用酸堿指示劑法,其測試模塊中含有甲基紅(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚藍(pH5.0~7.6)兩種酸堿指示劑,在pH4.5~9.0的范圍內(nèi),顏色由橙紅色經(jīng)黃綠色到藍色變化。
尿酸堿度可能因紙條上殘留過多尿液使尿蛋白試墊上的酸性緩沖夜污染pH試墊,造成結(jié)果偏酸性。細菌繁殖尿樣也可能影響該值結(jié)果。
2、尿蛋白
尿液分析儀檢測尿蛋白采用pH指示劑蛋白質(zhì)誤差原理。即在pH為3.2的條件下,溴酚藍產(chǎn)生的陰離子,與帶陽離子的蛋白質(zhì)結(jié)合發(fā)生顏色變化。
蛋白質(zhì)試劑塊含有四溴酚藍、枸櫞酸、枸櫞酸鹽和表面活性劑,四溴酚藍為酸堿指示劑,同時也為靈敏的蛋白顯色劑。當尿蛋白濃度由低至高時,試劑模塊發(fā)生由黃色經(jīng)綠色到藍色的顏色變化,顏色的深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。
試墊只對白蛋白起反應,不與球蛋白、血紅蛋白及其他尿蛋白發(fā)生反應或僅輕度反應,當尿蛋白含量為150~300mg/L時,定性試驗約為±,300mg/L約為+,1000mg/L約為++,3000mg/L約為+++。故尿蛋白陰性并不能排除尿液中其他蛋白的存在,當檢驗結(jié)果與臨床診斷不符合時應用其他方法做確認試驗。
尿pH≥9時,尿中污染季胺鹽或磷酸鹽或操作時試條浸入時間過長,可出現(xiàn)假陽性反應。

3、尿糖
尿液分析儀檢測尿糖采用葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法。葡萄糖試劑模塊含有葡萄糖氧化酶、過氧化物酶和色原等。葡萄糖氧化酶促葡萄糖與氧作用,生成葡萄糖酸內(nèi)酯及過氧化氫,后者與色原在過氧化氫的作用下,使色原呈現(xiàn)由藍色經(jīng)綠色至棕色的色澤變化,呈色的深淺與葡萄糖含量成正比。常見的色原有鄰聯(lián)甲苯胺、碘化鉀等。
當尿糖陽性時,試紙顯色由黃色、橘黃色至棕色。尿液分析儀只對葡萄糖起反應,不與乳糖、半乳糖或果糖等其他糖起反應。尿中含有大量維生素可致本試驗陰性;高比重堿性尿,可使糖檢出偏低。當尿中含過氧化氫、次氯酸鹽等強氧化劑時,可呈假陽性反應。
4、尿酮體
尿液分析儀檢測尿酮體采用硝普鈉法。酮體是脂肪分解代謝過程中的產(chǎn)物。尿酮體包括乙酰乙酸、丙酮和β羥丁酸3種形式。
酮體試劑塊主要含有亞硝酸基鐵氰 化 鈉、甘氨酸及堿性緩沖劑,這些物質(zhì)可與丙酮或乙酰乙酸作用形成紫色復合物,顏色由淡棕色至紫色。
試條對乙酰乙酸敏感,敏感度為0.5~1.0mmol/L,對丙酮敏感度較差,與β-羥丁酸不起化學反應。酸性尿液、高比重尿、陳舊尿可使結(jié)果呈弱假陽性,尿液中如有酚紅或二羥基苯 丙 胺酸代謝產(chǎn)物可出現(xiàn)假陽性反應。酮體試墊會因受潮而很快失效,故操作時必須在取出試條后立即將蓋蓋緊,預防墊塊受潮失效。
5、尿膽紅素
尿液分析儀檢測尿膽紅素采用偶氮反應法。膽紅素試劑主要含有2,4-二氯苯胺重氮鹽及緩沖液,與膽紅素作用后試墊可呈淺黃色至棕黃色反應。維生素C或亞硝酸鹽可降低尿液分析儀的靈敏度,氯丙嗪可致假陽性反應,尿液會因暴露于陽光下而呈假陰性。
6、隱血
尿液分析儀檢測隱血采用血紅蛋白類過氧化物酶法,血紅蛋白能使有機過氧化物顯色,根據(jù)血紅蛋白的含量不同,墊塊顏色由橘黃色變?yōu)榫G色或深藍色,試墊不僅與游離的血紅蛋白起反應,而且還可與完整的紅細胞起反應,在試墊上出現(xiàn)綠色斑點,提示為完整紅細胞所致。
墊塊檢出游離血紅蛋白敏感度為150~300μg/L。高比重尿、蛋白質(zhì)尿會降低該法敏感度,維生素C、甲醛可出現(xiàn)假陰性反應。肌紅蛋白、強氧化劑,如次氯酸鈣或某種可產(chǎn)過氧化物酶的微生物污染,可呈假陽性反應。
7、亞硝酸鹽
尿液分析儀檢測亞硝酸鹽采用亞硝酸鹽還原法。亞硝酸鹽試劑塊主要含有對氨基苯砷酸、N-萘基乙二胺物質(zhì)。當尿液中感染的具有硝酸鹽還原酶的細菌增加時,如大腸埃希菌,可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,并可將模塊中的氨基苯砷酸重氮化而成重氮鹽,以此重氮鹽再與N-奈基乙二胺偶聯(lián),使模塊呈現(xiàn)由黃色至紅色的變化,顏色的深淺與亞硝酸鹽含量成正比。

8、尿膽原
尿液分析儀檢測尿膽原是應用其對二甲氨基苯甲醛與尿膽原在酸性條件下,可形成紅色化合物的原理。
尿膽原是一種不穩(wěn)定成分,很快被氧化成尿膽素,從而不與試墊反應而出現(xiàn)假陰性。尿液分析儀檢測時尿液必須新鮮,正常新鮮尿液尿膽原呈弱陽性反應。該法可受許多因素干擾,如甲醛防腐劑的尿液或尿液中含大量亞硝酸鹽時可出現(xiàn)假陰性。
9、白細胞
尿液分析儀檢測白細胞采用白細胞酯酶法。白細胞試劑塊主要含有吲哚酚酯、重氮鹽及其他物質(zhì)。粒細胞中存在酯酶,它能作用于模塊中的吲哚酚酯,使其產(chǎn)生吲哚酚,吲哚酚與重氮鹽發(fā)生反應形成紫包縮合物,試劑模塊區(qū)發(fā)生由黃色至紫色的顏色變化,顏色的深淺與白細胞含量成正比。
尿液分析儀的該項試驗只對完整的粒細胞起反應,不與淋巴細胞和其他細胞起反應,健康尿液該試驗為陰性,其檢出白細胞的靈敏度為(5~15)×106/L。婦女在留取標本時注意不要被白帶污染,尿糖、頭孢菌素或草酸增加都可降低尿液分析儀的敏感度。
10、尿比重
尿液分析儀檢測尿比重采用多聚電解質(zhì)離子解離法。尿比重試劑塊含有甲基紅(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚藍、酸堿指示劑及緩沖物。經(jīng)過處理的多聚電解質(zhì)的pKa改變與尿液中離子濃度相關。
尿液分析儀測試過程中,尿液中以鹽類形式存在的電解質(zhì)(M+X-)在水溶液中解離出M+陽離子,并與離子交換體中的H+置換,釋放出H+溴麝香草酚藍pH6.2~7.0以分子型和離子型兩種形式共存,不同的比例呈現(xiàn)出不同的色澤變化。分子型居多時呈黃色,離子型居多時呈藍色。
尿比重偏高時,尿液中所含鹽類成分較多,試劑帶中電解質(zhì)多聚體釋放出的H+增多,溴麝香草酚藍為分子型,呈現(xiàn)黃色;尿比重偏低時,尿液中所含鹽類成分較少,試帶中電解質(zhì)多聚體釋放出的H+減低,溴麝香草酚藍多為離子型,呈現(xiàn)藍色。這種尿液中所含鹽類成分的高低可由試劑塊中的酸堿指示劑變化顯現(xiàn)出來,顏色由藍色經(jīng)綠色、茶綠色至黃色變化,進而換算成尿液的比重值。
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