在蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的測定方法中，圓二色光譜(簡稱CD)得到了Z為廣泛的應用。在對溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的研究，其比較準確、簡單以及快速。其能夠在溶液狀態(tài)下測定，和其生理狀態(tài)比較接近。并且測定方法快速簡便，對構(gòu)象變化靈敏，因此，到目前為止，在對蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的研究中，其占據(jù)主導地位，并且已經(jīng)在蛋白質(zhì)的構(gòu)象研究中得到了廣泛地應用。圓二色光譜儀為按照圓二色光譜法的原理和測試要求設(shè)計制成的儀器。到目前為止目前圓二色光譜法及其儀器已在有機化學、生物化學、配位化學和藥物化學等領(lǐng)域得到了廣泛地應用，已經(jīng)成為對有機化合物的立體構(gòu)型進行研究的一個重要方法。

簡介

圓二色光譜為一種用于對非對稱分子的構(gòu)型和構(gòu)象進行推斷的旋光光譜。如果光學活性物質(zhì)對組成平面偏振光的左旋和右旋圓偏振光的吸收系數(shù)(ε)是不一致的，εL≠εR，就會具有圓二色性。若橫坐標為不同波長的平面偏振光的波長λ，縱坐標為吸收系數(shù)之差Δε=εL-εR，然后使用上述內(nèi)容作圖，得到的圖譜就是圓二色光譜，簡稱CD。如果在紫外可見區(qū)域內(nèi)某手性化合物有吸收，具有特征的圓二色光譜就能夠得到。因為εL≠εR，透射光不再是平面偏振光，而是橢圓偏振光，摩爾橢圓度[θ]與Δε的關(guān)系為：[θ]=3300Δε。圓二色譜也能夠以波長為橫坐標，以摩爾橢圓度為縱坐標作圖。因為△ε存在正值和負值之分，因此圓二色譜也有呈谷的負性圓二色譜以及呈峰的正性圓二色譜。對有機化合物的構(gòu)型和構(gòu)象進行推斷為在紫外可見光區(qū)域?qū)A二色譜與旋光譜進行測定的目的。

樣品要求

1.緩沖液、溶劑要求：在配制溶液前，要單獨的檢查緩沖液和溶劑，檢查在測定波長范圍內(nèi)是否有吸收干擾，檢查是否有沉淀和膠狀形成。在蛋白質(zhì)測量中，緩沖體系經(jīng)常選擇透明性極好的磷酸鹽。

2.　樣品濃度與池子選擇：樣品不一樣，測定的圓二色光譜范圍也會存在差異，對池子大小(光徑)的選擇和濃度的要求也不相同，通常在相對較稀的溶液中進行蛋白質(zhì)CD光譜的測量。

3.溶劑必須在測定波長沒有吸收干擾，樣品必須保持一定的純度不含光吸收的雜質(zhì)，，樣品在溶劑中可以完全溶解，有均一透明的溶液形成。

4.控制氮氣流量