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凝膠成像系統(tǒng)的原理|結構|分類

更新時間:2025-10-20 23:21:29 類型: 閱讀量:15305
導讀:凝膠成像系統(tǒng)由紫外透射燈箱、白光燈箱、暗箱、攝像頭、計算機系統(tǒng),凝膠分析軟件等組成,可在明室中操作。具有白光光源及三種波長的紫外光源,可單獨使用其中某個波長的光源,亦可同時使用幾種波長光源。

  凝膠成像系統(tǒng)由紫外透射燈箱、白光燈箱、暗箱、攝像頭、計算機系統(tǒng),凝膠分析軟件等組成,可在明室中操作。具有白光光源及三種波長的紫外光源,可單獨使用其中某個波長的光源,亦可同時使用幾種波長光源。

凝膠成像系統(tǒng)工作原理

  凝膠成像系統(tǒng)通過樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣,以標準品或者其他的替代標準品相比較就會對未知樣品作一個定性分析。這個就是圖像分析系統(tǒng)定性的基礎。根據(jù)未知樣品在圖譜中的位置可以對其作定性分析,就可以確定它的成份和性質。

  樣品對投射或者反射光有部分的吸收,從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會有差異。凝膠成像系統(tǒng)光密度于樣品的濃度或者質量成線性關系。根據(jù)未知樣品的光密度,通過于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質量。這就是圖像分析系統(tǒng)定量的基礎。采用新技術的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻,Zda限度的消除了光密度不均造成的對結果的影響。

凝膠成像系統(tǒng)工作原理.jpg

凝膠成像系統(tǒng)的組成結構

  1、凝膠成像系統(tǒng)的控制系統(tǒng)

  控制系統(tǒng)有三種規(guī)格:B型控制系統(tǒng)、T型控制系統(tǒng)和A型控制系統(tǒng)??刂葡到y(tǒng)的主要作用是控制凝膠圖像系統(tǒng)的工作和運行。

  2、凝膠成像系統(tǒng)的光源系統(tǒng)

  光源系統(tǒng)的作用是:紫外光照射經EB染色的凝膠會發(fā)出明亮的熒光。不同波長的紫外光對不同染色的凝膠激發(fā)作用也不盡相同。

  凝膠成像系統(tǒng)的光源的種類及用途:

  凝膠成像系統(tǒng)的光源分為四種,分別是透射紫外,反射紫外,透射白光,反射白光。

  ①透射紫外:可激發(fā)多種熒光染料。光源波長302nm或365nm。

 ?、诜瓷渥贤猓鹤贤夥瓷錈粼词褂貌⒉粡V泛,主要是提供非透明材質的DNA跑膠載體如紙層析等的成像需要而使用。由于比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠與聚丙烯酰胺凝膠,透射光源完全可以滿足,因此凝膠成像中通常將紫外反射光源作為選配件不列入標配中。光源波長254nm或365nm。

  ③透射白光:用于可見光樣品拍攝,例如蛋白樣品膠的考馬斯亮藍或銀染后的觀察。

 ?、芊瓷浒坠猓河糜跇悠返亩ㄎ缓途劢埂?/p>

  凝膠成像系統(tǒng)中常見的波長:

 ?、僮贤馔干涔庠矗?02nm、365nm;

 ?、谧贤夥瓷涔庠矗?54nm或365nm;

 ?、坨R頭濾光片:595nm/590nm,537nm,620nm,460nm。

  3、凝膠成像系統(tǒng)的暗室

  凝膠成像系統(tǒng)暗室的作用是:經紫外光激發(fā)的EB膠發(fā)出的熒光在暗室中更加明亮,便于攝像機抓拍。

  4、凝膠成像系統(tǒng)圖像采集系統(tǒng)

  凝膠成像系統(tǒng)圖像采集主要由攝像機鏡頭及圖像采集軟件組成。攝像機的主要作用是抓拍發(fā)出熒光的凝膠圖像。攝像機必須由高像素對弱光拍攝能力強科研及的相機。監(jiān)控用的民用級及工業(yè)級攝像機用來對凝膠圖像的抓拍均不清晰。圖像采集軟件的作用是將攝像機抓拍攝下來的凝膠圖像傳輸入計算機。

  5、凝膠成像系統(tǒng)的分析軟件

  凝膠成像系統(tǒng)的分析軟件的主要作用是在計算機內對凝膠圖像進行分子量、RF值等數(shù)據(jù)的分析。

凝膠成像系統(tǒng)分類.jpg

凝膠成像系統(tǒng)分類

  1、普通凝膠成像系統(tǒng):可以對蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進行圖象采集并進行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質凝膠等(或UV、EB和有色及可見樣品成像)。

  2、化學發(fā)光凝膠成像系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV、EB、化學發(fā)光、紫外-熒光、有色及可見樣品成像;

  3、多色熒光凝膠成像系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV、EB、化學發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像;

  4、多功能活體凝膠成像系統(tǒng):UV、EB、化學發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像和離體組織和小型動物,及大型型動物。

 

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