流式細(xì)胞術(shù)為一種生物學(xué)技術(shù)，計(jì)數(shù)和分選懸浮于流體中的微小顆粒是它的主要用途。這種技術(shù)能夠用來連續(xù)的多參數(shù)的分析流過光學(xué)或電子檢測(cè)器的一個(gè)個(gè)細(xì)胞。流式細(xì)胞術(shù)（Flow CytoMetry，F(xiàn)CM）是通過檢測(cè)標(biāo)記的熒光信號(hào)使高速、逐一的定量分析和分選懸液中的單細(xì)胞或其他生物粒子得以實(shí)現(xiàn)的技術(shù)。

直接免疫熒光染色法和間接免疫熒光染色法為兩種主要的染色方法。

間接標(biāo)記

間接標(biāo)記是使用特異的無熒光標(biāo)記的一抗和被檢測(cè)的標(biāo)本反應(yīng)將沒有結(jié)合的抗體除去，之后將熒光標(biāo)記的二抗加入，使得含有熒光的抗原-抗體-抗體混合物生成。如此操作除了步驟復(fù)雜，還會(huì)將大量的時(shí)間耗費(fèi)掉，因此如今這種方法基本上很少使用了。

直接標(biāo)記

直接標(biāo)記即是在標(biāo)記的時(shí)候?qū)⑦B接著熒光素的特異性抗體加入，相對(duì)而言，此種方法比較簡(jiǎn)單，所以廣泛地應(yīng)用于各個(gè)實(shí)驗(yàn)室。

按照不同的細(xì)胞部位，能夠分成細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)抗。

細(xì)胞內(nèi)染色

對(duì)于白血病的免疫分型來說，如TdT,MPO,cCD3,cCD79a的一些胞內(nèi)抗原的檢測(cè)就顯得尤為重要。使細(xì)胞膜通透為胞內(nèi)染色的要點(diǎn)。往胞內(nèi)導(dǎo)入抗體或核酸染料，然而不會(huì)對(duì)細(xì)胞骨架的完整性產(chǎn)生影響。并且需要對(duì)有關(guān)抗原與相應(yīng)抗體的結(jié)合力和核酸與染料的結(jié)合不會(huì)受到固定和透膜的步驟的影響進(jìn)行保證。一些對(duì)胞內(nèi)染色適用的試劑可能對(duì)表面標(biāo)記分析不適用。如果不使用EMA的方法，那么通常不能夠同時(shí)進(jìn)行細(xì)胞活性的檢測(cè)與胞內(nèi)染色，對(duì)于某些核酸染料（如DAPI、TO、AO等）為活細(xì)胞染料，固定或透膜都不需要。

細(xì)胞表面染色

細(xì)胞表面染色為大多數(shù)免疫表型分析所采用的方法。由于在細(xì)胞里同時(shí)存在著很多抗原，所以，在檢測(cè)細(xì)胞表面抗原時(shí)，必須對(duì)保持細(xì)胞膜的完整十分留意。溶血前標(biāo)記和溶血后標(biāo)記均屬于表面標(biāo)記。若標(biāo)記受到紅細(xì)胞或者血漿成分的影響，那么溶血后標(biāo)記應(yīng)當(dāng)被采用，然而，需要對(duì)溶血?jiǎng)┠た乖挠绊戇M(jìn)行留意，因此，固定劑一般不包含在溶血?jiǎng)﹥?nèi)。如陣發(fā)性血紅蛋白尿的檢測(cè)和免疫球蛋白輕鏈檢測(cè)等。

胞膜和胞內(nèi)染色

通常，先胞膜染色，固定，膜通透和胞內(nèi)染色，Z后是DNA染色。