葉綠素測(cè)定儀也叫葉綠素儀，通過(guò)測(cè)定葉綠素含量來(lái)分析植物長(zhǎng)勢(shì)，植物葉片中的葉綠素含量指示了植物本身的狀況。所以葉綠素測(cè)定儀在所有植物生理儀器中有著重要地位，是一種非常重要的植物生理儀器。

葉綠素測(cè)定儀的原理

　　葉綠素測(cè)定儀根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見(jiàn)光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。

　　根據(jù)朗伯-比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A=αCL式中：α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。由于各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過(guò)測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)，則此混合液在某一波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。

　　要測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類(lèi)胡蘿卜素的含量，只需測(cè)定該提取液在三個(gè)特定波長(zhǎng)下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類(lèi)胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排除類(lèi)胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的Zda吸收峰。

葉綠素測(cè)定儀的特點(diǎn)

　　葉綠素測(cè)定儀通過(guò)測(cè)量葉片在兩種波長(zhǎng)范圍內(nèi)的透光系數(shù)來(lái)確定葉片當(dāng)前葉綠素的相對(duì)數(shù)量，也就是在葉綠素選擇吸收特定波長(zhǎng)光的兩個(gè)波長(zhǎng)區(qū)域，根據(jù)葉片透射光的量來(lái)計(jì)算測(cè)量值。

　　葉綠素測(cè)定儀來(lái)進(jìn)行對(duì)植物葉片中的葉綠素含量，具有快速、無(wú)破壞的測(cè)量，測(cè)量的結(jié)果受一定的因素影響，同時(shí)也具有一定的局限性，葉綠素測(cè)定儀只能用于葉片稍大的物種，尚不能用于小葉片的，如針葉樹(shù)種。

　　葉綠素測(cè)定儀使用中要注意的是，由于其測(cè)定的范圍較小，而且反應(yīng)非常敏感，如果要代表整個(gè)葉片的綠色度水平，就要對(duì)葉片的不同部位分別測(cè)量然后取其平均值。

常見(jiàn)的葉綠素測(cè)定方法

　　葉綠素含量的測(cè)定除了可以通過(guò)使用葉綠素測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定之外，還可以通過(guò)使用研磨法、浸提法進(jìn)行測(cè)定分析，這三種方法是如何進(jìn)行測(cè)定植物葉片葉綠素含量的呢?

　　葉綠素含量?jī)x：使用葉綠素含量?jī)x測(cè)定Z為簡(jiǎn)單快速，只需要將待測(cè)的葉片放在一起上面按下按鍵既可得出相應(yīng)的測(cè)定結(jié)果，不過(guò)葉綠素含量?jī)x只能測(cè)定植物葉片葉綠素含量，對(duì)于水分中等其他地方的測(cè)定則是無(wú)法進(jìn)行測(cè)定分析。

　　研磨法：首先是要進(jìn)行對(duì)葉片進(jìn)行研磨，以此來(lái)提取葉片中的葉綠素含量，接著將研磨好的葉綠素提取液用濾紙過(guò)濾洗滌，定容到25ml的容量瓶中。進(jìn)行光譜分析。在該方法的測(cè)定過(guò)程中研磨方法對(duì)于植物葉綠素含量存在一定的影響。

　　浸提法：首先選擇Z有代表性的葉片，將其剪成寬度小于2mm的細(xì)絲或者是小塊，將這些放入盛有提取液的容量瓶中封口，至于黑暗中直接浸提，接著用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)量。不過(guò)浸提法的測(cè)定時(shí)間需要比較久一些，而且不同浸提液測(cè)定的值也存在比較大的差異性，其中乙醇丙酮為提取液的精度較高。

　　在眾多測(cè)定方法中，通過(guò)使用葉綠素儀進(jìn)行測(cè)定不論是從時(shí)間還是精度上都要高于其他兩種的測(cè)定方法。

葉綠素測(cè)定儀與葉綠素?zé)晒鈨x有什么區(qū)別?

　　在植物的種植和研究中，葉綠素含量是一個(gè)很重要的參數(shù)，可以比較準(zhǔn)確的反映出植物的生長(zhǎng)發(fā)育狀況。其中能夠準(zhǔn)確測(cè)量葉綠素含量的葉綠素測(cè)定儀、葉綠素?zé)晒鈨x等得到廣泛的推廣應(yīng)用，那么葉綠素測(cè)定儀與葉綠素?zé)晒鈨x有什么區(qū)別呢?

　　測(cè)量方法不同：

　　葉綠素測(cè)定儀是利用葉綠素對(duì)紅光的特殊吸收特性，利用光電傳感器對(duì)紅光吸收量多少的測(cè)定，葉綠素測(cè)定儀的測(cè)量是在某一時(shí)，某一點(diǎn)上的瞬時(shí)測(cè)量。葉綠素?zé)晒鈨x是利用葉綠素特有的熒光現(xiàn)象，采用極高靈敏度和反應(yīng)速度的傳感器，輔以光電脈沖設(shè)計(jì)來(lái)捕獲電子傳遞過(guò)程中的各時(shí)段上的熒光數(shù)據(jù)。熒光測(cè)量是一個(gè)過(guò)程的測(cè)量。

　　研究目的不同：

　　當(dāng)選擇葉綠素?zé)晒鈨x時(shí)，主要是研究光合作用的機(jī)理問(wèn)題，而葉綠素測(cè)定儀主要是用于檢測(cè)植物生長(zhǎng)過(guò)程中的營(yíng)養(yǎng)狀況，為作物施肥提供生產(chǎn)上的參考。總的來(lái)說(shuō)就是，葉綠素?zé)晒鈨x用于理論研究，而葉綠素測(cè)定儀用于應(yīng)用上的研究。