液相色譜儀是實(shí)現(xiàn)液相色譜分析的重要工具之一，使用液相色譜儀的領(lǐng)域越來越廣泛。液相色譜儀在使用過程中的檢定方法是需要十分重視的，如果不按照規(guī)定的檢定方法，會(huì)導(dǎo)致液相色譜儀在使用過程中產(chǎn)生各種不確定因素，影響檢定結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度、操作人員的熟練程度、檢定人員對規(guī)程的理解程度、進(jìn)樣量等因素都會(huì)影響液相色譜儀的檢定結(jié)果，使檢定難度大大增加。

泵流量檢定經(jīng)驗(yàn)分析

　　1、泵流量檢定方法

　　按規(guī)程要求設(shè)定流量、啟動(dòng)液相色譜儀，待壓力穩(wěn)定后，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)收集流動(dòng)相，同時(shí)用秒表計(jì)時(shí)，出口處用事先清洗稱重過的容量瓶收集流動(dòng)相，在天平上稱重，重復(fù)測量3次，則根據(jù)公式即可計(jì)算泵流量設(shè)定值誤差SS和流量穩(wěn)定性SR。

　　2、泵流量檢定經(jīng)驗(yàn)

　　(1)液相色譜儀在收集數(shù)據(jù)的同時(shí)要注意把相關(guān)的實(shí)驗(yàn)材料保管好。收集流動(dòng)相和計(jì)時(shí)盡量由一個(gè)人完成，減少計(jì)時(shí)誤差;因甲醇容易揮發(fā)，所以要掌握好實(shí)驗(yàn)的速度和時(shí)間。并且在實(shí)驗(yàn)過程還要有條不紊的進(jìn)行每一個(gè)步驟的安排，以便減少實(shí)驗(yàn)過程的失誤和一定的經(jīng)濟(jì)損失。收集時(shí)用封口膠密封容量瓶瓶口，收集完一瓶后立刻稱量，收集的流動(dòng)相在換算成體積后保留小數(shù)點(diǎn)后三位，并且要把詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)記錄進(jìn)行整理，確保實(shí)驗(yàn)記錄的可靠性。

　　(2)如果液相色譜儀實(shí)際流速低于設(shè)定值，一般需要清洗或更換單向閥、過濾頭;如果流速過高，則需檢查流速補(bǔ)償和壓縮補(bǔ)償調(diào)節(jié)是否失靈。如果流量不穩(wěn)，需檢查泵頭內(nèi)是否聚集氣泡，如有，需打開放空閥，讓泵在高流速下運(yùn)行，排除氣泡即可。

柱溫箱溫度設(shè)定值誤差和溫度穩(wěn)定性檢定經(jīng)驗(yàn)分析

　　1、柱溫箱溫度設(shè)定值誤差和溫度穩(wěn)定性檢定方法

　　將數(shù)字溫度計(jì)探頭固定在柱溫箱內(nèi)與色譜柱相同的部位，選擇35℃和45℃(也可根據(jù)用戶使用溫度設(shè)定)進(jìn)行檢定。按液相色譜儀說明書操作，通過升溫，待溫度穩(wěn)定后，記下溫度讀數(shù)并開始計(jì)時(shí)，以后每隔10min記錄一次讀數(shù)，共記錄7次，求出平均值，平均值與設(shè)定值之差為柱溫箱溫度設(shè)定值誤差△TS，7次讀數(shù)中Zda值與Z小值之差為柱溫箱溫度穩(wěn)定性TC。

　　2、柱溫箱溫度設(shè)定值誤差和溫度穩(wěn)定性檢定經(jīng)驗(yàn)

　　溫度的升高在通常情況下會(huì)加大理論塔板數(shù)，峰和峰之間的距離變小，但是要保證每個(gè)峰的面積不變，所以在峰距變小的情況下，峰的高度就會(huì)，所以溫度升高會(huì)使保留的時(shí)間變短，而溫度降低正好相反，需要延長保留時(shí)間。

基線噪聲和基線漂移檢定經(jīng)驗(yàn)分析

　　1、基線噪聲和基線漂移檢定方法

　　液相色譜儀選用C18色譜柱，以1**%甲醇為流動(dòng)相，流量為1.0mL/min，紫外檢測器的波長為254nm，檢測靈敏度調(diào)到Z靈敏檔，開機(jī)預(yù)熱，待液相色譜儀穩(wěn)定后記錄基線30min，選取基線中噪聲Zda峰-峰高對應(yīng)的信號(hào)值，計(jì)算基線噪聲，用30min內(nèi)基線偏離起始點(diǎn)的Zda信號(hào)值表示基線漂移。

　　2、基線噪聲和基線漂移檢定經(jīng)驗(yàn)

　　(1)檢定噪聲和漂移時(shí)，不能有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)通過檢測器，只有1**%甲醇作流動(dòng)相，液相色譜儀中不能有1**%甲醇以外的其他物質(zhì)作為流動(dòng)相。

　　(2)基線出現(xiàn)波動(dòng)，毛刺等現(xiàn)象，應(yīng)檢查流動(dòng)相中是否混入空氣形成氣泡，或考慮等待氘燈穩(wěn)定情況，同時(shí)檢查液相色譜儀的接地是否良好，必要時(shí)換新的氘燈。漂移過大，流動(dòng)相中含有雜質(zhì)，檢查泵、色譜柱、儲(chǔ)液瓶和流動(dòng)相有無污染物。

　　(3)要注意單位的換算。若工作站顯示屏的縱坐標(biāo)為mV時(shí)，要換算成規(guī)程所要求的AU，即：1mV=1×10^-3AU。

Z小檢測濃度檢定經(jīng)驗(yàn)分析

　　1、Z小檢測濃度檢定方法

　　液相色譜儀Z小檢測濃度的檢定方法與上面的基線噪聲條件相似，由進(jìn)樣系統(tǒng)注入(10-20)微升的1.00×10^-7g/mL的萘-甲醇溶液，并且嚴(yán)格根據(jù)相應(yīng)的操作步驟記錄色譜圖，并且根據(jù)CL=2NdcV/20H的公式對Z小檢測濃度進(jìn)行計(jì)算。

　　2、Z小檢測濃度檢定經(jīng)驗(yàn)

　　需要注意的是公式中分母的數(shù)字指根據(jù)20微升的進(jìn)樣體積完成計(jì)算工作，并非根據(jù)濃度完成計(jì)算工作。