1982年，美國國立衛(wèi)生院Ito博士研制開發(fā)了一種新型的、連續(xù)GX的液液分配色譜技術(shù)--高速逆流色譜法，這種技術(shù)不同于其它色譜技術(shù)，任何固態(tài)載體其均不需要，所以可以使固相載體表面與樣品發(fā)生反應(yīng)而造成的樣品污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響得以避免，同時(shí)其具備較高的回收率，低廉的價(jià)格，較大的進(jìn)樣量，較為廣泛的適用范圍以及快速等優(yōu)點(diǎn)。所以其廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥、食品、材料、化妝品和環(huán)保等領(lǐng)域，其在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領(lǐng)域特別受到重視。

原理

在對(duì)旋轉(zhuǎn)管的流體動(dòng)力平衡進(jìn)行研究時(shí)，偶然發(fā)現(xiàn)了高速逆流色譜法，其為建立于單向性流體動(dòng)力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法。當(dāng)使用緩慢的速度轉(zhuǎn)動(dòng)螺旋管時(shí)，螺旋管中的兩相由一端分布到另一端，將其中一相當(dāng)作移動(dòng)相，由一端往另一端洗脫時(shí)，在螺旋管里，另一相的保留值約為一半，然而隨著移動(dòng)相流速的增大，這一保留量會(huì)減小，從而降低了分離效率。然而加快螺旋管的轉(zhuǎn)速，會(huì)改變兩相的分布，當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到臨界范圍時(shí)，沿螺旋管長(zhǎng)度兩相就會(huì)完全分開，其中首端的一段會(huì)由某一相全部占據(jù)，這一段被叫做首端相，尾端的一段由另一段全部占據(jù)，這一段被叫做尾端相。兩相的這種單向性分布特征正好為高速逆流色譜所利用。在高的螺旋管轉(zhuǎn)動(dòng)速下，若由首端相往尾相送入，其將穿過首端相往螺旋管的尾端移動(dòng)。當(dāng)分離時(shí)，首先將其中的一相(固定相)注入到螺旋管內(nèi)，之后將移動(dòng)相由合適的一端泵入，使其載著樣品在螺旋管中無限次的分配。固定相隨著儀器的轉(zhuǎn)速越快，保留的越多，也就會(huì)有越好的分離效果，并且使分離速度得到大大地提高，所以叫做高速逆流色譜。