大腸桿菌是一種不同的原核生物，其無(wú)芽孢，能運(yùn)動(dòng)，周生鞭毛，大小0.5×1～3μm。其通常不致病，是人和動(dòng)物腸道中的常居菌，在一定條件下可引起腸道外感染。下面就讓小編為你介紹一下大腸桿菌的兩種分離方法。

大腸桿菌有兩種分離方法，分別是劃線分離法以及涂布分離法。

在無(wú)菌操作臺(tái)上用接種環(huán)取菌后在固體培養(yǎng)基的平板上連續(xù)劃線。這種方法叫做劃線分離法。

一、劃線分離操作步驟

1.使用火焰灼燒接種環(huán)，直到燒紅接種環(huán)為止。

2.在火焰旁將接種環(huán)冷卻，并將棉塞打開(kāi)。

3.將試管口通過(guò)火焰。

4.往菌液里伸入已經(jīng)冷卻的接種環(huán)獲取菌液。

5.將試管口通過(guò)火焰，并將棉塞塞上。

6.使用左手將皿蓋打開(kāi)一條縫隙，使用右手往平板內(nèi)迅速伸進(jìn)去，劃三到五條平行線，然后將皿蓋蓋上。千萬(wàn)要當(dāng)心，不能將培養(yǎng)基劃破如果滑坡了會(huì)導(dǎo)致劃線不均勻，使得分離單菌落的目的難以達(dá)到。而且在劃破的地方存留的單細(xì)胞不能產(chǎn)生規(guī)矩的菌落，菌落會(huì)沿著劃破的地方生長(zhǎng)，會(huì)產(chǎn)生一個(gè)條狀的菌落。

7.使用火焰灼燒接種環(huán)，等到接種環(huán)冷卻后，由diyi區(qū)域的尾部向第二區(qū)域劃線。重復(fù)上述操作，往三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。需要留心的是不能將diyi區(qū)域和Z后一區(qū)域的劃線相連。

8.倒置平板，然后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

劃線分離的注意事項(xiàng)

1.只能用接種環(huán)沾取一次菌液，卻需要在培養(yǎng)基的不同地方連續(xù)劃線多次。

2.劃線不能將diyi區(qū)域和Z后一區(qū)域的劃線相連。

3.在劃線后，培養(yǎng)皿需要倒置培養(yǎng)12-24小時(shí)。

將培養(yǎng)的菌液稀釋到一定的倍數(shù)，然后在固體培養(yǎng)基上加上一定量的稀釋液，再在培養(yǎng)基平面上用玻璃刮刀涂布。這種方法叫做涂布分離法。

二、涂布分離操作步驟

1.取6支試管，分別注入9毫升水并進(jìn)行滅菌，然后根據(jù)101-106順序編號(hào)標(biāo)記。

2.將移液管滅菌，使用移液管吸取1ml的培養(yǎng)液注入101試管里，使用手指輕壓移液管的橡皮頭，吹吸三次，讓菌液和水充分混合均勻。

3.由標(biāo)記101的試管中吸取1毫升稀釋液，注入102試管里，再?gòu)?02試管里吸取1毫升稀釋液注入103試管里，以此類推，一直到Z后一支試管的稀釋完成。

劃線分離和涂布分離的優(yōu)缺點(diǎn)

劃線分離：方法簡(jiǎn)單，然而分開(kāi)單菌落比較困難。

涂布分離：分開(kāi)單菌落比較容易，但實(shí)驗(yàn)操作比較復(fù)雜。