生化分析儀又叫生化儀，是以分光光度法為基礎(chǔ)發(fā)展起來的，是通過分析患者的血液和體液從而幫助醫(yī)生診斷疾病的儀器。生化分析儀需要檢定的方面有很多，無論是哪方面都要按照一定的測量標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)要求來進行。

生化分析儀檢定內(nèi)容

　　1、重復(fù)性檢定

　　生化分析儀重復(fù)性檢定是以正確操作為前提，在程序、檢定員、儀器、環(huán)境等條件相同的情況下，對短時間內(nèi)重復(fù)檢定所得出結(jié)果的一致性進行分析，體現(xiàn)生化分析儀的精度、穩(wěn)定性。結(jié)論越符合要求，表明生化分析儀的精度越高、穩(wěn)定性越強。如出現(xiàn)重復(fù)性超差，首先要排除以下情況：

　　①溫度：室內(nèi)溫度偏高會影響生化分析儀散熱，儀器內(nèi)部溫度的持續(xù)升高將導(dǎo)致重復(fù)性降低。

　?、跐穸龋簼穸绕卟粌H會腐蝕、氧化零件，而且會使濾光片表面發(fā)霉、發(fā)霧，影響透光率。

　?、垭妷海弘妷翰环€(wěn)定，會干擾到光源發(fā)光器、微電流放大器和前置放大器等組件的運行。

　?、芊缐m：灰塵不僅會降低生化分析儀絕緣性能，而且阻礙組件之間接觸。

　　以上幾點是造成生化分析儀重復(fù)性超差的不穩(wěn)定因素。

　　2、準(zhǔn)確度檢定

　　生化分析儀準(zhǔn)確度是指檢測值與真值之間一致的程度。生化分析儀能否給出被檢測樣本正確的結(jié)論，準(zhǔn)確度是重要的技術(shù)指標(biāo)。生化分析儀屬于高精密儀器，檢測過程中諸多環(huán)節(jié)都可能影響到準(zhǔn)確度的示值誤差。誤差受到以下因素影響：

　?、賲?shù)設(shè)定：通常不允許在檢定時修改生化分析儀參數(shù)，因為參數(shù)變動或可能影響日后的檢驗工作，故需有可行方法解決此問題。其中計算因子K值的設(shè)定，直接影響到檢測結(jié)果。在檢測酶類時，參數(shù)不能隨意改動，K值即隨之不變。由于摩爾吸光系數(shù)ε值受許多因素影響，所以實際ε值和理論ε值可能存在差異，相應(yīng)的實測K值和理論K值也存在差異，酶類檢定結(jié)果超差就不可避免，需通過檢查和校準(zhǔn)理論K值減少這種誤差。

　　②加注系統(tǒng)：由于生化分析儀使用率高，試劑針長期被使用易受腐蝕，加注系統(tǒng)的準(zhǔn)確度隨之降低，檢定誤差相應(yīng)增大。這就要求在檢定工作中對加注系統(tǒng)也進行檢測，把Z終檢定結(jié)果誤差降到Zdi。

　?、鄯磻?yīng)運行系統(tǒng)：準(zhǔn)確度誤差主要產(chǎn)生于反應(yīng)運行系統(tǒng)中反應(yīng)盤上裝載的比色杯，長時間使用可能出現(xiàn)清潔不凈或表面磨損的情況，進而對摩爾吸光系數(shù)產(chǎn)生影響，增大了生化分析儀準(zhǔn)確度誤差。所以檢定過程中要注意查看比色杯，污損嚴(yán)重的，需更換后再行檢定。

　　3、雜散光檢定

　　雜散光是指遠(yuǎn)離吸收光的其他波長的入射光。它會使比爾定律出現(xiàn)偏移，光譜測量絕大部分誤差均來源于此。實際檢定中，產(chǎn)生雜散光誤差的原因有：

　?、俟鈱W(xué)元件被灰塵附著。

　　②光學(xué)系統(tǒng)沒有做好遮蔽，室內(nèi)光線直接進入生化分析儀。

　?、蹮彷椛浠驘晒庖鸬亩坞娮影l(fā)射等等。因此，要非常重視這些問題，以降低其對吸光度測定法準(zhǔn)確性的影響。

　　4、線性檢定

　　在實際檢定時，主要表現(xiàn)為吸光度測定值與濃度之問不成線性關(guān)系，出現(xiàn)偏離的現(xiàn)象。波長、雜光、帶寬、輻射光的非平行性、比色杯誤差以及檢測器噪聲等都會影響線性誤差，導(dǎo)致該項結(jié)果不合格。

　　5、交叉污染檢定

　　在日常檢定過程中，試劑間相互污染，直接影響了檢定結(jié)果的準(zhǔn)確性，所以在檢定前應(yīng)進行預(yù)沖洗或者增加沖洗次數(shù)。同時檢定人員應(yīng)合理地設(shè)置檢定項目順序，把非干擾項目穿插在其他項目之間，以便得到更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。但僅依靠設(shè)置項目順序，無法根除試劑間的交叉污染，這就需要工作人員對生化分析儀進行及時維護，尤其要定期清洗保養(yǎng)好攪拌棒、樣品針、試劑針、比色杯，以確保設(shè)備正常運行。

生化分析儀檢定方法

　　生化分析儀要檢定的項目有很多，每種項目的測量溶液標(biāo)準(zhǔn)都是不一樣的，所以需要的溶液在種類和濃度上也是不同的，需要使用的標(biāo)準(zhǔn)溶液主要的化學(xué)成分分別是：亞硝酸鈉、氯化鈷以及氧化鈦等，這些溶液在對應(yīng)的檢定項目中應(yīng)用效果很顯著。

　　1、波長方面檢定方法

　　主要檢定波長的準(zhǔn)確度與重復(fù)性，需要檢定的對象有兩種：

　　①分光式生化分析儀波長，在對其準(zhǔn)確度和重復(fù)性進行測定時，先要確定波長標(biāo)準(zhǔn)值，可以作為參考的對象有很多，比如汞燈、氧化鈥標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片，在選擇時，波長在分布上要保持均勻，在數(shù)量上也要使其有參考價值，一般選擇三條。選擇單方向測量，每條波長的測量數(shù)值要有三個，以便計算出平均值，平均值與波長準(zhǔn)確度有關(guān)，后者和其相差一個波長標(biāo)準(zhǔn)值。波長準(zhǔn)確度計算公式為：

　　λi為波長每次的測量值，在這i分別為1，2，3。在這三個測量值中找到Zda值和Z小值，然后求差，Z后計算的數(shù)值就是波長重復(fù)性。

　　②濾光式生化分析儀的ZX波長，主要檢定誤差和帶寬，在該檢定中，主要使用分光光度計，要將波長準(zhǔn)確度控制在1nm之內(nèi)，該設(shè)備針對濾光片，直接反映的信息為波長與透射比光譜特性曲線。橫軸為波長，縱軸為透射比。

　　通過曲線數(shù)值，可以將其用在濾光波片ZX波長計算中，求得濾光片不同透射率下的ZX波長，就可以將其ZX誤差計算出來。

　　ZX波長計算公式表達(dá)為：λ₀=(λ₁+λ₂)/2。

　　ZX波長誤差和ZX波長就差一個標(biāo)準(zhǔn)波長，將λ_t作為標(biāo)準(zhǔn)情況下的波長，則ZX波長誤差?λ計算公式為：?λ=λ₀-λ_t。

　　當(dāng)透射比為T_max/2時，對應(yīng)波長之間的距離就是濾光片的帶寬。

　　2、吸光度方面檢定方法

　　在檢定時，需要先準(zhǔn)備好參比液和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以及相關(guān)儀器，測定對象為吸光度，所以還要使標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸光度不同，可以分別為0.和1.0A，對相關(guān)儀器的性能進行檢驗，主要看零點和1**%時的透射比是否符合檢定要求。檢定過程就是在測定波長實際吸光度值后，與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)值作比較，Z后查看兩者之差是否在吸光度的參考范圍內(nèi)。

　　3、線性誤差檢定方法

　　生化分析儀線性誤差和吸光度有關(guān)，所以還要對吸光度進行計算，將不同濃度的氯化鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液作為測定對象，將測定條件定位波長為510nm，所以在對線性誤差進行檢定之前，還要準(zhǔn)備好相關(guān)的溶液和參比液，溶液的濃度Z小為2.0g/L，參比液選蒸餾水。吸光度的測量次數(shù)定為3次，計算出這三組數(shù)據(jù)的平均單位值，相關(guān)的計算公式為：

　　A為吸光度值，C為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度值。

　　線性標(biāo)準(zhǔn)差就是任何一次實測吸光度值和平均單位吸光度值之間的差值與平均單位吸光度值之比。用符號?’表示線性誤差，相關(guān)的公式為：

　　將不同濃度下的溶液吸光度實測數(shù)值與平均單位吸光度值記錄下來，并做好計算。關(guān)于線性誤差方面的測定值方面，不同吸光度范圍以及不同級別的生化分析儀對線性誤差要求不同。如下表所示。

　　4、交叉污染檢定方法

　　在檢定之前，對標(biāo)準(zhǔn)溶液和波長進行選定，前者可選擇濃度Z小和Zda時的溶液，后者選擇510nm波長。將前者置于后者條件下進行交叉污染檢定。

　　在測定過程中，將兩種溶液的Z小樣品量準(zhǔn)備出來，將Z小濃度2.0g/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液作為吸收池沖洗試劑，沖洗次數(shù)定為3次，然后就可以對Z小濃度和Zda濃度時的標(biāo)準(zhǔn)溶液進行測定，將測定次數(shù)定位4次，那么會測得Z小濃度的4組數(shù)值，用符號E表示，以及Zda濃度的4組數(shù)值，用符號F表示。

　　然后就可以對生化分析儀交叉污染率進行計算，交叉污染率和溶液濃度值有關(guān)，濃度從高到低計算值以及從低到高計算值是不同的，所以樣品的交叉污染率也是不同的，但無論如何，都要在2%之內(nèi)。用符號C_OEF和C_OFE表示樣品交叉率，相關(guān)的計算公式如下：

　　C_OEF={(F₄+F₂+F₃)/3-F₁}/{(F₄+F₂+F₃)/3-(E₂+E₃+E₄)/3}×1**%

　　C_OFE={E₁-(E₂+E₃+E₄)/3}/{(F₄+F₂+F₃)/3-(E₂+E₃+E₄)/3}×1**%