液相色譜儀色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相，以及色譜柱的制備和操作條件。

液相色譜儀色譜柱的安裝

　　液相色譜儀色譜柱在運(yùn)輸過程中或在沒有使用時，它的兩端總是用堵頭進(jìn)行密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時，首先移去兩端的堵頭。請注意將流動相流動的方向與柱上標(biāo)記的方向保持一致。除非出于特殊考慮，例如為了清除堵在色譜柱入口端的臟污等而需要將色譜柱反接以進(jìn)行沖洗時，建議用戶在接上色譜柱時一定要遵循柱上標(biāo)記的方向。

　　由于色譜柱的連接是整個色譜操作過程的一部分，如果密封卡套過緊，或安裝不合適，或者密封卡套與色譜柱端口不匹配，都有可能導(dǎo)致溶液的泄漏。請按照下面步驟將色譜柱與密封卡套相連接，從而將色譜柱接入液相色譜儀系統(tǒng)：

　?、賒iyi次使用的管線，請依次將管線接頭和密封卡套裝在外徑1/16”的管線上。密封卡套的寬口端應(yīng)朝向管線接頭。

　?、趯⒐芫€緊緊插入色譜柱的接口，向前滑動密封卡套和管線接頭，并使管線接頭的螺紋與色譜柱端口的螺紋相互銜接，然后擰緊管線接頭。如果管線為高分子材料，請轉(zhuǎn)到步驟④;如果是金屬管線，請繼續(xù)③。

　　③在用力將管線壓入柱端接口之后，用1/4”扳手將已擰緊的螺帽再進(jìn)一步緊固。

　?、軐σ合嗌V儀色譜柱的另一端采用上述方法進(jìn)行操作。C18色譜柱中的液相是甲醇(或乙腈)的水溶液。在儲存和運(yùn)輸過程中，硅膠填料可能會干涸。這時推薦使用10-20倍柱體積的純有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈等進(jìn)行沖洗以活化色譜柱。接著可用自己選擇的流動相沖洗色譜柱。流速由0.1mL/min逐漸升至所需的操作條件，直至基線穩(wěn)定為止。如果柱壓和基線波動較大，這可能是氣泡進(jìn)入了色譜柱中。這時可用較高流速沖洗色譜柱2-5分鐘，例如4.6~150mm的色譜柱可采用流速2mL/min。

液相色譜儀色譜柱使用

　　液相色譜儀色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進(jìn)行先分離，而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。

　　現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較，具有GX、快速、靈敏等特點(diǎn)。液相色譜儀色譜柱對高沸點(diǎn)、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑并以實(shí)現(xiàn)分離。應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門。在選擇液相色譜儀色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等。

　　1、樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在1**%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受1**%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。

　　2、如果樣品極性太強(qiáng)，或酸性太強(qiáng);可以選擇成都摩爾提供的C18色譜柱，液相色譜儀色譜柱(親水色譜)，也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對試劑平衡時間長，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))。

　　3、若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等)，他們都會減少堿性化合物的拖尾，一般會選擇中性或偏堿的條件下做，因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。

　　4、如果堿性化合物的極性太強(qiáng)，或堿性太強(qiáng);液相色譜儀色譜柱可以選擇寬pH的C18液相色譜儀色譜柱在高pH值檢測(優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡單，缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價格也高)或者選用液相色譜儀色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用，這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱也有使用C18+強(qiáng)陰離子對試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。