1．不同純度級別多肽的使用領(lǐng)域是什么？

答：由于多肽的純度級別不同，其的使用領(lǐng)域也存在差異。

（1）酶底物定性研究、體外生物活性分析，免疫封閉、磷酸化研究、親和層析，單抗制備等研究

可以使用研究級80%以上純度的多肽。

（2）細(xì)胞體內(nèi)外活性分析，定量分析等大多數(shù)研究均可以使用90%以上的純度，純度達(dá)到95%以上就能夠用于NMR研究。

（3）粗品和脫鹽級別的純度與多肽的長度相關(guān)。Fmoc固相多肽合成具有超過95%的氨基酸的偶連效率。

（4）免疫抗體為多肽的一個非常重要的用途，免疫的要求在通常情況下需要達(dá)到疫級65-75%左右純度。若純度為90-95%的多肽可以使抗體產(chǎn)生，那么65-75%純度的多肽通常也不會失敗。純度高固然很好，然而需要花費相對比較長的時間以及比較高的代價，同樣，70%左右的純度就能夠滿足Elias測定抗體效價。

2．制備多肽抗體，常用的載體有那些？如何選擇？

答：多肽具有很小的分子量，比較差的免疫應(yīng)答效果，需要和載體偶連來使免疫源性得以提高。通常將高分量的蛋白質(zhì)作為載體。KLH(銅藍(lán)蛋白)，BSA,OVA等為常用的載體，KLH為shou選的載體。在ELISA測定多肽抗體效價時，一些多肽需要與BSA等偶連后再包板，直接包板比較困難。

3．關(guān)于AntigenGrade多肽必須在在多肽的一端增加Cysteine嗎？

答：不一定，氨基酸組成同偶連的方式與偶連的活化劑有關(guān)聯(lián)。

MBS:S-S是由Cys的基團載體中其他SH連接而形成，若序列中沒有Cys，則應(yīng)當(dāng)對Cys基團進行添加，Z好是在N端添加。

EDC:通過C端COOH連接，通常要求序列中沒有anamidatedC-terminus或者Glu(E)以及Asp(D)。

Act.EDCMethod:通過N端的氨基偶連，要求序列中沒有乙?；疦端或者沒有Lys(K)。