聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，簡(jiǎn)稱PCR。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，通過(guò)高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)形成一個(gè)周期，目的DNA迅速擴(kuò)增，其具有節(jié)約時(shí)間，操作簡(jiǎn)單，高靈敏度，強(qiáng)特異性等特點(diǎn)。其又被叫做無(wú)細(xì)胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。其不但在核酸序列分析和基因分離、克隆被使用，其還在任何有DNA,RNA的地方被使用或者被用來(lái)對(duì)疾病進(jìn)行診斷。

PCR的三種控溫方法

1.計(jì)算控制

在運(yùn)行多數(shù)程序中，Z好的溫度控制方法就是計(jì)算控制，溫度的一致性以及可靠性都比較的好。使用計(jì)算控制的時(shí)候，模塊的溫度通過(guò)對(duì)樣品的管子或玻片熱傳導(dǎo)的速度和樣品的體積進(jìn)行估算（當(dāng)程序運(yùn)行的時(shí)候，會(huì)顯示這些樣品的信息）。由于這種估算遵循已知的容量和熱力學(xué)的規(guī)律，因此和模塊控制以及探針控制相比，計(jì)算控制更極ng準(zhǔn)。運(yùn)行計(jì)算控制能夠使得實(shí)驗(yàn)時(shí)間縮短，簡(jiǎn)單的程序操作能夠使得酶的活性得到保護(hù)，使得引物的損失減少。

2.模塊控制

和計(jì)算控制相比，模塊控制的精確度要更加低些。在模塊控制下，樣品溫度達(dá)到設(shè)置溫度的時(shí)間一般在模塊之后。之所以會(huì)有這段延遲，是樣品體積和管子類型的緣故。

3.探針控制

探針控制一般能夠在不同的環(huán)境中使用，然而其需要被小心的使用。微信版和玻片就可以。

應(yīng)用：

1.血液檢驗(yàn)漏檢率

由于實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法比Elisa靈敏很多，因此，血站或血液研究所一般用來(lái)研究Elisa方法的漏檢率，即分析Elisa方法測(cè)定為陰性的血樣，再用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法來(lái)復(fù)檢。復(fù)檢時(shí)，一般24個(gè)Elisa陰性的血樣混合成一個(gè)樣本進(jìn)行檢測(cè)。

2.新診斷及檢驗(yàn)試劑的開(kāi)發(fā)

現(xiàn)有的很多診斷及檢驗(yàn)方法都不能同時(shí)滿足快速、靈敏、定量的要求如現(xiàn)有培養(yǎng)法、Elisa法等等，而熒光定量PCR方法以則可以做到這一點(diǎn)，從而可為臨床疾病、商檢、糧油檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、血液檢驗(yàn)等等開(kāi)發(fā)新的試劑，從而提高檢驗(yàn)的靈敏度、速度及準(zhǔn)確性等；這類試劑的種類是非常多的，所開(kāi)發(fā)的試劑的社會(huì)效益及經(jīng)濟(jì)效益都是很巨大的。

3.新藥開(kāi)發(fā)研究，人用藥物及其他藥物

針對(duì)一些感染性疾病的藥物，如各種病毒病、細(xì)菌病等，在新藥的開(kāi)發(fā)過(guò)程中，快速了解藥物對(duì)疾病進(jìn)程的影響可以為新藥開(kāi)發(fā)節(jié)約大量的人力、時(shí)間和資金，與以前所用的Elisa等方法相比，實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)可以快速、準(zhǔn)確、定量、靈敏地測(cè)定血液或組織中病原體的含量，因此有利用分析藥物的作用效果，為比較不同的配方的LX、用藥量、用藥時(shí)間等等提供快速、定量的評(píng)價(jià)。