熒光檢測器是液相色譜儀常用的一種檢測器。靈敏度在目前常用的液相色譜儀檢測器中Zgao。它用于能激發(fā)熒光的化合物，極高靈敏度和良好選擇性是它Zda的優(yōu)點，因而在某些領域如藥物和生化分析中起著不可替代的作用。

液相色譜儀熒光檢測器的原理

　　液相色譜儀的熒光檢測器是雙光路固定波長熒光檢測器的中壓泵燈發(fā)出的連續(xù)光經過半反射半透鏡被分成兩束，再分別通過測量池和參比池。半反射半透鏡將百分之十左右的激發(fā)光反射在參比池及相應的光電倍增管上。液相色譜儀參比池有利于消除流動相所發(fā)射的本底熒光以及外界的影響，參比光路也有利于消除光源波動的影響。百分之九十左右的激發(fā)光經過激發(fā)光濾光片分光后選擇定波長的光線作為樣品激發(fā)光。該光束經過透鏡聚光在樣品池內的組分受激后發(fā)出的熒光強度與樣品濃度成正比，這就是熒光檢測器定量的基礎。為避免激發(fā)光的干擾而選取與激發(fā)光成直角方向的熒光，由第二透鏡將其會聚到發(fā)射濾光片后再通過光電倍增管以及放大器至記錄儀。

　　液相色譜儀熒光檢測器的靈敏度要比紫外檢測器要高一百倍，當要對痕量組分進行選擇性檢測時其是一種強有力的檢測工具。但它的線性范圍較窄不宜作為一般的液相色譜儀檢測器來使用但可用于梯度洗脫。它測定中不能使用可熄滅YZ或吸收熒光的溶濟作流動相。對不能直接產生熒光的物質要使用色譜柱后衍生技術但其操作比較復雜。液相色譜儀熒光檢測器現已在臨床醫(yī)學檢驗、生物化工、環(huán)境監(jiān)測、食品檢驗中獲得廣泛的應用。

液相色譜儀熒光檢測器的優(yōu)缺點

　　液相色譜儀熒光檢測器的優(yōu)點：

　?、凫`敏度極高。液相色譜儀熒光檢測器的靈敏度比紫外-可見光檢測器的靈敏度約高兩個數量級，Z小檢測量可達10^(-13)g。這是因為在紫外吸收檢測法中，被檢測的信號A=lg(Io/I)，即當樣品濃度很低時，檢測器所檢測的是兩個較大信號Io及I的微小差別;而在熒光檢測法中，被檢測的是疊加在很小背景上的熒光強度。熒光檢測器是Z靈敏的液相色譜檢測器，特別適合于痕量分析。愈是常用的衡量檢測器靈敏度的基準物質。另外，熒光檢測器的靈敏度還可以用水的拉曼譜帶的信噪比來衡量。

　?、诹己玫倪x擇性。產生熒光的一個必要條件是該物質的分子具有能吸收激發(fā)光能量的吸收帶，即物質分子具有一定的吸收結構;另外的條件是吸收了激發(fā)光能量之后的分子具有高的熒光效率。相對較少的分子具有大的足夠檢測的量子效率是熒光檢測器高選擇性的主要原因。在很多情況下，液相色譜儀熒光檢測器的高選擇性能夠避免不發(fā)熒光的成分的干擾，成為熒光檢測的獨特優(yōu)點。

　?、劬€性范圍較寬。雖然比紫外吸收檢測器窄，但對大多數痕量分析，該線性范圍已足夠寬。在分析物質濃度較大時，發(fā)射強度由于內濾效應可能隨濃度增加而降低。

　?、苁芡饨鐥l件的影響較小。

　?、葜灰x作流動相的溶劑不會發(fā)射熒光，熒光檢測器就能適用于梯度洗脫。

　　液相色譜儀熒光檢測器的缺點：

　　①熒光檢測器的高選擇性優(yōu)點在一些情況下，也是該檢測器的缺點。因為不是所有的化合物在選擇的條件下都能發(fā)生熒光，所以熒光檢測器不屬于通用型檢測器，與紫外-可見光檢測器相比，應用范圍較窄。

　?、趯νǔ０l(fā)生在熒光測量中的一些干擾非常敏感，如背景熒光和猝滅效應等。雖然這些干擾在液相色譜儀分析中不經常遇到，但在進行定量分析時，有必要驗證這些干擾是否存在，以及對樣品測定的影響程度。尤其對某些物質，如鹵素離子、重金屬離子、氧分子及硝基化合物等，都應予以特別注意。