菌落計(jì)數(shù)器廣泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗(yàn),可減輕實(shí)驗(yàn)人員的勞動(dòng)強(qiáng)度,提高工效,提高工作質(zhì)量。下面就讓小編帶你了解一下檢驗(yàn)菌落總數(shù)時(shí)如何處理樣品。
樣品處理操作步驟:
以無(wú)菌操作取檢樣25g(或25ml),放于225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶?jī)?nèi)(瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振要或研磨制成1:10的均勻稀釋液。
固體檢樣在加入稀釋液后,Z好置滅菌均質(zhì)器中以8000~10000r/min的速度處理1min,制成1:10的均勻稀釋液。

用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi),振搖試管混合均勻,制成1:100的稀釋液。
另取1ml滅菌吸管,按上項(xiàng)操作順序,制10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管。
操作中必須有“無(wú)菌操作”的概念,所用玻璃器皿必須是完全滅菌的,不得殘留有細(xì)菌或YJ物質(zhì)。所用剪刀、鑷子等器具也必須進(jìn)行消毒處理。樣品如果有包裝,應(yīng)用75%乙醇在包裝開口處擦拭后取樣。
操作應(yīng)當(dāng)在超凈工作臺(tái)或經(jīng)過(guò)消毒處理的無(wú)菌室進(jìn)行。瓊脂平板在工作臺(tái)暴露15分鐘,每個(gè)平板不得超過(guò)15個(gè)菌落。
如系固體樣品,取樣時(shí)不應(yīng)集中一點(diǎn),宜多采幾個(gè)部位。固體樣品必須經(jīng)過(guò)均質(zhì)或研磨,液體樣品須經(jīng)過(guò)振搖,以獲得均勻稀釋液。
為減少樣品稀釋誤差,在連續(xù)遞次稀釋時(shí),每一稀釋液應(yīng)充分振搖,使其均勻,同時(shí)每一稀釋度應(yīng)更換一支吸管。
在進(jìn)行連續(xù)稀釋時(shí),應(yīng)將吸管內(nèi)液體沿管壁流入,勿使吸管伸入稀釋液內(nèi),以免吸管外部粘附的檢液溶于其內(nèi)。
為減少稀釋誤差,SN標(biāo)準(zhǔn)采用取10mL稀釋液,注入90mL緩沖液中。
樣品稀釋液主要是滅菌生理鹽水,有的采用磷酸鹽緩沖液(或0.1%蛋白胨水),后者對(duì)食品已受損傷的細(xì)菌細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。如對(duì)含鹽量較高的食品(如醬油)進(jìn)行稀釋,可以采用滅菌蒸餾水。
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