光學(xué)顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器,它廣泛應(yīng)用于現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和生產(chǎn)的各個領(lǐng)域,是一種十分重要的觀測工具。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、畜牧、地質(zhì)、礦產(chǎn)和一些工業(yè)部門內(nèi),光學(xué)顯微鏡有特殊的地位,發(fā)揮重要的作用。
將光學(xué)顯微鏡小心地從鏡箱中取出(移動光學(xué)顯微鏡時應(yīng)以右手握住鏡壁,左手托住鏡座),放置在實(shí)驗(yàn)臺的偏左側(cè),以鏡座的后端離實(shí)驗(yàn)臺邊緣約6~10cm為宜。首先檢查光學(xué)顯微鏡的各個部件是否完整和正常。如果是鏡筒直立式光學(xué)顯微鏡,可使鏡筒傾斜一定角度(一般不應(yīng)超過45度)以方便觀察(觀察臨時裝片時禁止傾斜鏡臂)。

1、對光:
打開實(shí)驗(yàn)臺上的工作燈(如果是自帶光源光學(xué)顯微鏡,這時應(yīng)該打開光學(xué)顯微鏡上的電源開關(guān)),轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋,使鏡筒略升高(或使載物臺下降),調(diào)節(jié)物鏡轉(zhuǎn)換器,使低倍鏡轉(zhuǎn)到工作狀態(tài)(即對準(zhǔn)通光孔),當(dāng)鏡頭完全到位時,可聽到輕微的扣碰聲。
打開光圈并使聚光器上升到適當(dāng)位置(以聚光鏡上端透鏡平面稍低于載物臺平面的高度為宜)。然后用左眼向著目鏡內(nèi)觀察(注意兩眼應(yīng)同時睜開),同時調(diào)節(jié)反光鏡的方向(自帶光源光學(xué)顯微鏡,調(diào)節(jié)亮度旋鈕),使視野內(nèi)的光線均勻、亮度適中。
2、放置玻片標(biāo)本:
將玻片標(biāo)本放置到載物臺上用標(biāo)本移動器上的彈簧夾固定好(注意:使有蓋玻片或有標(biāo)本的一面朝上),然后轉(zhuǎn)動標(biāo)本移動器的螺旋,使需要觀察的標(biāo)本部位對準(zhǔn)通光孔的ZY。
3、調(diào)節(jié)焦距:
用眼睛從側(cè)面注視低倍鏡,同時用粗調(diào)螺旋使鏡頭下降(或載物臺上升),直至低倍鏡頭距玻片標(biāo)本的距離小于0.6cm(注意操作時必須從側(cè)面注視鏡頭與玻片的距離,以避免鏡頭碰破玻片)。然后在目鏡上觀察,同時慢慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)螺旋使鏡筒上升(或使載物臺下降)直至視野中出現(xiàn)物像為止,再轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)螺旋,使視野中的物像Z清晰。
如果需要觀察的物像不在視野ZY,甚至不在視野內(nèi),可用標(biāo)本移動器前后、左右移動標(biāo)本的位置,使物像進(jìn)入視野并移至ZY。在調(diào)焦時如果鏡頭與玻片標(biāo)本的距離已超過了1cm還未見到物像時,應(yīng)嚴(yán)格按上述步驟重新操作。
1、在使用高倍鏡觀察標(biāo)本前,應(yīng)先用低倍鏡尋找到需觀察的物像,并將其移至視野ZY,同時調(diào)準(zhǔn)焦距,使被觀察的物像Z清晰。
2、轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,直接使高倍鏡轉(zhuǎn)到工作狀態(tài)(對準(zhǔn)通光孔),此時,視野中一般可見到不太清晰的物像,只需調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦螺旋,一般都可使物像清晰。
注意:
(1)在從低倍鏡準(zhǔn)焦的狀態(tài)下直接轉(zhuǎn)換到高倍鏡時,有時會發(fā)生高倍物鏡碰擦玻片而不能轉(zhuǎn)換到位的情況(這種情況,主要是高倍鏡、低倍鏡不配套,即不是同一型號的光學(xué)顯微鏡上的鏡頭),此時不能硬轉(zhuǎn),應(yīng)檢查玻片是否放反、低倍鏡的焦距是否調(diào)好以及物鏡是否松動等情況后重新操作。如果調(diào)整后仍不能轉(zhuǎn)換,則應(yīng)將鏡筒升高(或使載物臺下降)后再轉(zhuǎn)換,然后在眼睛的注視下使高倍鏡貼近蓋玻片,再一邊觀察目鏡視野,一邊用粗調(diào)螺旋使鏡頭極其緩慢地上升(或載物臺下降),看到物像后再用細(xì)調(diào)螺旋準(zhǔn)焦。
(2)由于制造工藝上的原因,許多光學(xué)顯微鏡的低倍鏡視野ZX與高倍鏡的視野ZX往往存在一定的偏差(即:低倍鏡與高倍鏡的光軸不在一條直線上),因此,在從低倍鏡轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察標(biāo)本時常會給觀察者迅速尋找標(biāo)本造成一定困難。為了避免這種情況的出現(xiàn),幫助觀察者在高倍鏡下能較快找到所需放大部分的物像,可事先利用羊毛交叉裝片標(biāo)本來測定所用光學(xué)顯微鏡的偏心情況,并繪圖記錄制成偏心圖。
具體操作步驟如下:①用在高倍鏡下找到羊毛交叉點(diǎn)并將其移至視野ZX;②換低倍鏡觀察羊毛交叉點(diǎn)是否還位于視野ZY,如果偏離視野ZY,其所在的位置就是偏心位置;③將前面兩個步驟反復(fù)操作幾次,以找出準(zhǔn)確的偏心位置,并繪出偏心圖。當(dāng)光學(xué)顯微鏡的偏心點(diǎn)找出之后,在使用該光學(xué)顯微鏡的高倍鏡觀察標(biāo)本時,事先可在低倍鏡下將需進(jìn)一步放大的部位移至偏心位置處,再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察時,所需的觀察目標(biāo)就正好在視野ZY。
1、用高倍鏡找到所需觀察的標(biāo)本物像,并將需要進(jìn)一步放大的部分移至視野ZY。
2、將聚光器升至Zgao位置并將光圈開至Zda(因油鏡所需光線較強(qiáng))。
3、轉(zhuǎn)動光學(xué)顯微鏡物鏡轉(zhuǎn)換盤,移開高倍鏡,往玻片標(biāo)本上需觀察的部位(載玻片的正面,相當(dāng)于通光孔的位置)滴一滴香柏油(折光率1.51)或石蠟油(折光率1.47)作為介質(zhì),然后在眼睛的注視下,使油鏡轉(zhuǎn)至工作狀態(tài)。此時油鏡的下端鏡面一般應(yīng)正好浸在油滴中。
4、注視光學(xué)顯微鏡目鏡中,同時小心而緩慢地轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)螺旋(這時只能使用微調(diào)節(jié)螺旋,千萬不要使用粗調(diào)節(jié)螺旋)使鏡頭微微上升(或使載物臺下降),直至視野中出現(xiàn)清晰的物像。操作時不要反方向轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)螺旋,以免鏡頭下降壓碎標(biāo)本或損壞鏡頭。
5、油鏡使用完后,必須及時將鏡頭上的油擦拭干凈。操作時先將油鏡升高1cm,并將其轉(zhuǎn)離通光孔,先用干擦鏡紙揩擦一次,把大部分的油去掉,再用沾有少許清潔劑或二甲苯的擦鏡紙擦一次,Z后再用干擦鏡紙揩擦一次。至于玻片標(biāo)本上的油,如果是有蓋玻片的制片,直接用上述方法擦干凈;如果是無蓋玻片的標(biāo)本,則蓋玻片上的油可用拉紙法揩擦,即先把一小張擦鏡紙蓋在油滴上,再往紙上滴幾滴清潔劑或二甲苯。趁濕將紙往外拉,如此反復(fù)幾次即可干凈。
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