1982年,美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院Ito博士研制開(kāi)發(fā)了一種新型的、連續(xù)gao效的液液分配色譜技術(shù)--高速逆流色譜法,這種技術(shù)不同于其它色譜技術(shù),任何固態(tài)載體其均不需要,所以可以使固相載體表面與樣品發(fā)生反應(yīng)而造成的樣品污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響得以避免,同時(shí)其具備較高的回收率,低廉的價(jià)格,較大的進(jìn)樣量,較為廣泛的適用范圍以及快速等優(yōu)點(diǎn)。所以其廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥、食品、材料、化妝品和環(huán)保等領(lǐng)域,其在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領(lǐng)域特別受到重視。
前景
這些年以來(lái),溶劑體系有了越來(lái)越寬泛的選擇范圍,一些人表示流動(dòng)相可以使用超臨界二氧化碳,對(duì)于化合物的分離而言,其擴(kuò)散性高,粘度低,無(wú)論是流體特性還是環(huán)境均相對(duì)友好,其相較于其他溶劑,優(yōu)勢(shì)非常的明顯,也有一些人表示流動(dòng)相可以使用制冷劑。又有一些人提出在高速逆流色譜分離中使用三相溶劑體系,能夠非常好的分離寬極性范圍的樣品。到目前為止,僅在分離標(biāo)準(zhǔn)品混合物時(shí)使用三相溶劑,還沒(méi)有在分離具體天然產(chǎn)物時(shí)使用三相溶劑??梢韵胂?,復(fù)雜天然產(chǎn)物以及藥物的分離若得到進(jìn)一步的發(fā)展,那么它的應(yīng)用前景一定非常大。
現(xiàn)在Z先發(fā)展起來(lái)的制備色譜技術(shù)為pH區(qū)帶逆流色譜,其可以使樣品提高超過(guò)10倍的負(fù)載容量。就算物質(zhì)的含量非常低,其也可以高度的濃縮。其是將保留劑和洗脫劑這一對(duì)試劑加入到固定相和流動(dòng)相中。在管柱內(nèi)保留樣品中的各組分為保留劑的作用,當(dāng)含有洗脫劑的流動(dòng)相通過(guò)一定流速?gòu)墓潭ㄏ啻┻^(guò),因?yàn)樗釅A反應(yīng)Z終達(dá)到平衡。溶質(zhì)的出峰時(shí)間取決于溶質(zhì)的分配系數(shù)與標(biāo)度值的差異。按照不同組分的Pka以及不一樣的疏水性來(lái)使分離實(shí)現(xiàn)。
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