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核酸提取方法介紹

更新時間:2025-10-15 14:59:23 類型: 閱讀量:1942
導讀:核酸提取儀核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來使得樣本核酸提取工作自動完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、輸血安全、法醫(yī)學鑒定、疾病控制中心、生物學研究以及畜牧業(yè)等多種領域得到廣泛地應用。

核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來使得樣本核酸提取工作自動完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、輸血安全、法醫(yī)學鑒定、疾病控制ZX、臨床疾病診斷、生物學研究以及畜牧業(yè)等多種領域得到廣泛地應用。下面就讓小編為你介紹一下幾種核酸的提取方法。


1.陰離子去污劑法

蛋白質在SDS或二甲苯酸鈉等去污劑的作用下變性,DNA能夠直接從生物材料中提取,因為常常借靜電引力或配位鍵結合來時細胞中DNA與蛋白質結合,而陰離子去污劑可以對這種價鍵起到破壞作用,因此,陰離子去污劑以常用于DNA的提取。


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2.苯酚抽提法

苯酚不僅能夠作為蛋白變性劑,同時還能夠對DNase的降解起到YZ作用,使用苯酚對勻漿液進行處理的時候,因為蛋白與DNA聯(lián)結鍵已經(jīng)斷裂,又有很多與苯酚相似相溶的極性基團位于蛋白分子表面。DNA溶于水相,蛋白分子溶于酚相。離心分層后將水層取出,多次重復操作,再和含DNA的水相合并,利用醇不能夠溶解核酸的性質,使用乙醇沉淀DNA。此時DNA是十分粘稠的物質,可用玻璃漫漫繞成一團,取出。這種方法具有能夠提取保持天然狀態(tài)的DNA的特點。


3.濃鹽法

利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度差異,分離兩者。使用1M氯化納提取抽提,使DNA粘液獲得,加入含有少量辛醇的氯仿,振蕩,使乳化,再離心將蛋白質除去,此時,蛋白質在水相及氯仿相中間停留,而DNA在上層水相中。DNA鈉鹽通過用2倍體積95%乙醇沉淀出來,或可以使用0.15MNaCL液將洗滌細胞反復洗滌,將RNA去除,再通過氯仿-異醇法將蛋白去除。比較這兩種方法,第二種方法可能會降解更少的核酸。利用稀鹽酸溶液對DNA進行提取的時候,將如SDS適量去污劑加入,對于蛋白質與DNA的分離很有幫助。在提取過程中,為了對組織中的DNase對DNA的降解作用有所YZ,在氯化鈉溶液中,將檸檬酸鈉加入作為金屬離子的烙合劑,一般使用0.015M檸檬鈉和15MNaCL,即為SSC溶液,用作DNA的提取。


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